陈晓娟
- 作品数：4 被引量：17H指数：2
- 供职机构：包头医学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金内蒙古自治区自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 蛋白表达系统的研究进展被引量：10
- 2014年
- 利用重组蛋白表达技术，对蛋白质功能结构进行研究，给人类生产、生活带来了极大的影响，在各个领域发挥了重要的作用。本文主要分析原核和真核两种表达系统的优缺点，综述一些现有表达系统的研究进展，旨在对后续关于表达系统选择的工作提供一些参考。1蛋白表达的涵义 自上个世纪70年代基因工程技术诞生以来，基因表达技术已渗透到工业、农业等各个领域，并已取得显著成效。如今人类社会面临人口增加、资源匮乏、环境污染加剧、疑难病诊断和治疗等重大问题，都需要在不同程度上依赖基因工程的发展和应用来加以解决。重组DNA技术在分子水平上对生物医学的发展有很大的意义，如决定蛋白质结构的根本物质是DNA，而直接对蛋白质进行改造是很难实现的，所以必须在DNA水平上对基因进行改造或修饰。蛋白表达就是重组DNA的一种实现技术，是用人为的方法将某一供体生物的遗传物质一DNA大分子提取出来，之后在离体的条件下用适当的工具酶进行切割，再把它与载体的DNA分子连接起来，然后一起导入受体细胞中，从而使得外源物质在其中“安家落户”，进行正常的复制和表达[1]。
- 陈晓娟闫少春邵国
- 关键词：重组蛋白表达重组DNA技术基因工程技术蛋白质结构生物医学
- BS69细胞原核表达载体的构建和诱导表达
- 2014年
- 目的构建BS69原核表达载体,并且对其进行初步的表达。方法将BS69克隆到原核表达载体PGEX-4T·3中,之后对重组的质粒进行鉴定;再将质粒转化入E.coli BL21中,使用IPTG诱导目的蛋白。结果重组子利用限制性内切酶进行酶切、PCR鉴定和DNA序列分析得到原核表达载体PGEX-4T·3-BS69;IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析显示目的蛋白在E.coli BL21中高效表达,分子量约为69k D。结论成功构建了BS69原核表达载体,完成了其在E.coli BL21中的诱导表达,为进一步在体外研究BS69提供了条件。
- 陈晓娟张颜波闫少春邵国
- 关键词：原核表达
- 人DNA甲基化转移酶的分类及其功能被引量：5
- 2014年
- DNA甲基化是一种在原核和真核生物基因组中很常见的表观遗传学修饰,参与体内的多种过程,是基因印迹的主要特征。DNA甲基化不仅与细胞衰老﹑发育有关联,也与肿瘤的发生发展有密切的关系。虽然DNA甲基化的模式可以遗传,但并非永久不变,诸多因素可以引起DNA甲基化模式的改变,而改变的决定性因素为DNA甲基化转移酶(DNA methylation transferase,Dnmts)。将DNA异常的甲基化模式恢复以及研究Dnmts,可以为未来疾病的治疗提供一条新思路。
- 陈晓娟闫少春邵国
- 关键词：DNA甲基化
- 急性重复低氧预适应小鼠海马组织DNA甲基转移酶表达的变化被引量：2
- 2013年
- 目的:检测小鼠脑海马组织中三种DNA甲基转移酶在急性重复缺氧条件下的变化,探讨缺氧预适应过程中DNA甲基转移酶的变化在低氧神经保护中的作用。方法:昆明小鼠随机分成正常对照组(常氧组,H0)、低氧1次组(H1)或低氧4次(H4)组,实验后取海马组织,应用Real-time PCR技术、Western bolt技术和DNA甲基转移酶活性实验对三种DNA甲基转移酶的变化进行研究。结果:DNA甲基转移酶1的mRNA和蛋白质水平在三组之间无明显变化;DNA甲基转移酶3A和3B mRNA和蛋白质水平在三组之间有变化,DNA甲基转移酶3A和3B的mRNA在H4组中表达较H0组降低,差异有统计学意义(P<0.01),DNA甲基转移酶3A和3B的蛋白质变化与mRNA变化相似,H4组与H0组相比有所降低(P<0.05);DNA甲基转移酶活性在H4组较H0组降低。结论:DNA甲基转移酶的变化可能参与缺氧预适应小鼠获得脑保护。
- 姜树原张姝刘友陈晓娟刘璐吕国蔚张颜波邵国
- 关键词：缺氧预适应海马DNA甲基转移酶小鼠
