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体外分步构建组织工程血管的研究: 目的：探讨间充质干细胞体外构建组织工程血管的可行性。方法：将体外培养扩增的犬骨髓间充质干细胞定向分化为平滑肌样细胞和内皮样细胞，接种于PCLA支架上，将其置于生物反应器内，在搏动性力学刺激条件下培养。3天后行血管组织学检...; 李春民董建德谷涌泉邱荣鑫冯增国孟艳陈晓波汪忠镐; 关键词：间充质干细胞组织工程血管生物反应器

脱细胞血管基质制备及体内外生物相容性被引量：1: 2010年; 背景:利用脱细胞血管基质作为血管支架具有以下优点:脱细胞血管基质保留了自然血管的复杂三维结构;脱细胞基质表面的生长因子和结构域有利于细胞的黏附和浸润。目的:制备脱细胞血管基质并对其体内外生物相容性进行评价。方法:采用胰蛋白酶、Triton X-100逐步处理猪颈动脉制备脱细胞血管基质。采用皮下植入实验、急性毒性实验和体外细胞毒性实验等评价其生物相容性。结果与结论:脱细胞基质材料具有良好的化学稳定性,未释放对红细胞产生破坏溶解作用的有害元素,未引起急性溶血反应,对细胞的生长无毒性影响。脱细胞基质材料在动物体内植入后早期有较多炎性细胞浸润,到实验观察的后期无明显炎性细胞浸润,脱细胞基质内可见成纤维细胞。另外,脱细胞基质材料对周边组织未产生毒性作用,伤口Ⅰ期愈合。同时组织学切片显示:支架材料与周边组织相容性好,未产生排斥反应。说明脱细胞基质材料在动物体内具有很好的生物相容性。; 于高生董建德李春民陈晓波; 关键词：血管支架生物相容性生物材料脱细胞血管基质相容性

犬骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞定向分化的研究: 2010年; 目的:研究犬骨髓间充质干细胞(MSCs)在体外定向诱导,向血管内皮细胞(ECs)方向分化,探讨其作为组织工程血管种子细胞的可行性。方法:获取犬骨髓单个核细胞,体外分离出MSCs。将分离的MSCs接种于含EBM-2完全培养液的培养瓶,向内皮样细胞定向诱导分化;LG-DMEM完全培养液培养的MSCs作为对照组。对MSCs表型进行流式细胞仪鉴定;诱导的内皮样细胞进行CD31、Ⅷ因子免疫细胞化学鉴定和摄取Dil-Ac-LDL、结合FITC-UEA的双染色功能鉴定。结果:流式细胞术检测培养的原代MSCs表面标志CD44表达呈阳性,而CD34表达则呈阴性;诱导分化的内皮样细胞具有内皮细胞形态特征,与成体内皮细胞相似;诱导的内皮样细胞Ⅷ因子染色和CD31免疫荧光染色均呈明显阳性,对照组细胞为阴性;诱导的内皮样细胞Dil-Ac-LDL摄取实验和FITC-UEA结合实验,细胞呈阳性表现。结论:在体外用骨髓MSCs能够成功诱导分化为血管内皮样细胞,为组织工程血管内皮化提供了一种可行的种子细胞来源。; 李春民董建德谷涌泉陈晓波卞策汪忠镐; 关键词：血管间质干细胞内皮细胞细胞分化

不同方法制备脱细胞血管基质的比较被引量：3: 2011年; 目的筛选理想的脱细胞方法,制备符合组织工程要求的脱细胞血管基质。方法应用三种不同的脱细胞方法[1%TritonX-100+1%十二烷基硫酸钠(SDS)、1%SDS+0.25%胰蛋白酶+1%糜蛋白酶、1%TritonX-100+0.1%氢氧化铵+0.25%胰蛋白酶]脱除猪颈动脉细胞成分,对其进行组织学切片、扫描电镜检测判断脱细胞效果;比较脱细胞前后动脉管道的爆破压变化;测定脱细胞基质的孔径、孔隙率。结果经1%SDS+0.25%胰蛋白酶+1%糜蛋白酶处理后的脱细胞血管基质的细胞成分被完全清除;爆破压强度(1489.33±106.04)mmHg;孔径(140.00±57.73)μm;孔隙率91.22%。结论应用1%SDS+0.25%胰蛋白酶+1%糜蛋白酶顺序处理后得到的脱细胞血管基质适合用于组织工程血管的制备。; 陈晓波吴英锋段红永武欣陈兵张淑文谷涌泉汪忠镐; 关键词：脱细胞血管基质孔径孔隙率

ε-己内酯/L-丙交酯聚合物组织工程血管支架材料的生物相容性研究: 2010年; 目的探讨ε-己内酯/L-丙交酯聚合物(ε-caprolactone and L-lactide,PCLA)可降解组织工程血管支架材料的生物相容性,为进一步构建组织工程血管提供依据。方法取PCLA材料行大体和扫描电镜观察。行生物相容性检测,包括细胞相容性实验:将L929细胞接种于96孔培养板内,实验组加入PCLA材料浸提液,对照组加入DMEM完全培养基,MTT法7d内每天测定各组吸光度(A)值;急性全身毒性实验:分别将PCLA浸提液及等量生理盐水注入实验组和对照组小鼠腹腔内(n=5),72h内观察小鼠毒性表现;溶血实验:取抗凝兔血加入浸提液、生理盐水、三蒸水,测定各组A值;细胞贴附实验:L929细胞接种于PCLA表面,培养4h及3d后扫描电镜观察;皮下植入实验:将PCLA材料植入大鼠皮下,1、8周后行组织学观察。结果支架外观呈乳白色,质地均匀,具有良好柔韧性及弹性。扫描电镜观察可见超细纤维粗细均匀、外表平滑;纤维直径1～5μm;孔隙直径10～30μm。细胞相容性实验示实验组与对照组细胞生长曲线类似(P>0.05)。急性全身毒性实验示两组小鼠在观察期内活动及进食情况均良好,无呼吸抑制现象,无瘫痪、惊厥及死亡发生。溶血实验:溶血率为1.18%,低于国家标准(GB-T14233.2-2005)规定的5%。细胞贴附实验示细胞在材料表面能够充分贴附生长。皮下植入实验示材料与组织相容性好。结论 PCLA材料具有良好的显微结构,安全无毒性,具有良好的生物相容性,是一种理想的组织工程血管支架材料。; 李春民董建德谷涌泉叶霖陈晓波卞策冯增国汪忠镐; 关键词：血管组织工程生物相容性

生物反应器内构建小口径组织工程血管的实验研究被引量：1: 2010年; 近年来心脏及周围血管动脉硬化病变的患者大量增加，仅美国每年就有约140万人需要接受血管置换。目前大口径人工血管的临床应用已获得广泛的成功，而小口径人工血管却一直未获得满意的效果，主要是由于缺乏理想的内皮细胞层而易导致血栓形成，血管长期通畅率较差。; 李春民董建德谷涌泉邱荣鑫冯增国孟艳卞策陈晓波汪忠镐; 关键词：小口径人工血管组织工程血管生物反应器血管动脉硬化血管置换

小口径组织工程血管体外构建的研究被引量：1: 2010年; 目的探讨间充质干细胞体外构建组织工程血管的可行性。方法将体外培养扩增的犬骨髓间充质干细胞（MSCs）定向分化为平滑肌样细胞和内皮样细胞，接种于ε-己内酯／L-丙交酯（PCLA）支架上，将其置于生物反应器内，在搏动性力学（100±20／55±20）mmHg（1mmHg=0．133kPa）刺激条件下培养。3d后行血管组织学检测。结果血管支架拉伸强度6．1MPa；骨髓间充质干细胞成功定向分化为平滑肌样细胞和内皮样细胞；血管腔内表面完全为细胞覆盖，表面的细胞沿液体流动的方向分布；种植的部分细胞已经渗透人血管壁内。结论骨髓间充质干细胞可作为种子细胞，与PCLA支架在生物反应器内构建组织工程血管。; 李春民董建德谷涌泉邱荣鑫冯增国孟艳陈晓波汪忠镐; 关键词：间充质干细胞血管

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陈晓波

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