陈磊
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：同济大学附属第十人民医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-130a-3p下调CYLD表达对乳腺癌MCF-7细胞功能的影响
- 2014年
- 目的:探讨miR-130a-3p对人乳腺癌MCF-7细胞功能的影响及其可能的靶向基因。方法:应用脂质体介导方法将miR-130a-3p模拟物(实验组)或对照模拟物(对照组)转染MCF-7细胞,分别采用MTT方法和细胞划痕实验检测细胞增殖和迁移能力变化,印迹法检测细胞中miR-130a-3p靶基因圆柱瘤基因(CYLD)的表达。结果:与对照组比较,实验组MCF-7细胞的增殖和迁移能力增强(P<0.05),细胞中CYLD蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论:miR-130a-3p可能通过靶向调节CYLD蛋白表达增强人乳腺癌MCF-7细胞的增殖和迁移。
- 李登峰魏传奎宋洪明李晓宇罗颀枫陈磊黄毅祥菅伟房林
- 关键词：乳腺肿瘤MCF-7细胞
- 过表达缺氧诱导因子-1α的结直肠癌裸鼠可视化模型的建立被引量：2
- 2015年
- 目的:建立一种荧光可视化显像且稳定过表达缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的裸鼠结直肠癌移植瘤模型。方法:对不同的人结直癌细胞系(SW480、SW620、LOVO及HCT116细胞)用缺氧诱导剂Co Cl2处理,根据HIF-1α被诱导表达的情况选择合适的靶细胞;将HIF-1α的c DNA序列克隆至慢病毒表达质粒p LV-TRC-EGFP,构建p LVHIF1α-EGFP慢病毒表达质粒,并包装过表达HIF-1α的慢病毒颗粒Lenti-HIF1α-EGFP。将Lenti-HIF1α-EGFP感染SW480细胞,嘌呤霉素筛选稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,Western blotting检测SW480HIF-1α细胞内HIF-1α及其下游蛋白VEGF、M1型丙酮酸激酶(pyruvate kinase expression M1,PKM1)的表达情况,Transwell实验检测其迁移能力。裸鼠腹腔注射SW480HIF-1α建立结直肠癌移植瘤模型,倒置荧光显微镜观察裸鼠腹腔移植瘤结节。结果:常氧条件下4种结直肠癌细胞均不表达HIF-1α,经Co Cl2诱导后,除SW480细胞系以外的细胞均可被诱导表达HIF-1α,故选择SW480细胞作为研究靶细胞。成功构建稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,SW480HIF-1α细胞内HIF-1α、VEGF和PKM1的表达水平均高于野生型SW480细胞,其迁移能力较野生型SW480细胞显著增强[观察视野内迁移细胞数:(250±11)vs(50±5)个,P<0.01]。SW480HIF-1α组裸鼠肠壁形成肿瘤结节数量显著多于SW480组[(15±4)vs(4±1)个,P<0.05]。结论:成功建立了高表达HIF-1α的荧光可视化裸鼠移植瘤模型,为进一步的相关功能学研究以及药物筛选提供条件。
- 李喆叶小磊杨生生殷佩浩胡送娇陈磊房林
- 关键词：结直肠癌移植瘤模型稳定转染慢病毒缺氧诱导因子-1Α绿色荧光蛋白
