韩芳婷
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
- 供职机构:上海市农业科学院更多>>
- 发文基金:上海市高新技术成果转化项目上海市自然科学基金上海市青年科技启明星计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- PCR和IFA测定猪圆环病毒2型半数细胞培养感染量的比较被引量:6
- 2013年
- 采用聚合酶链式反应(PCR)和间接免疫荧光法(IFA)测定PCV2 SN07-1 2株的半数细胞培养感染量(TCID_(50)),初步比较两种方法测定病毒滴度的差异。参照Reed-Muench法计算TCID_(50),并采用荧光定量PCR(Real-time PCR)法对试验结果进行验证。对于同一病毒样品,IFA法测出的TCID_(50)为10^(6.5)/mL,PCR法测出的TCID_(50)为10^(5.0)/mL,结果表明:IFA法比PCR法更敏感,更适宜用于测定PCV2的效价。
- 王林山尹燕博邹勇何锡忠韩芳婷倪建平赵本进李春华
- 关键词:猪圆环病毒2型间接免疫荧光聚合酶链式反应
- Cry2A杀虫蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化
- 2013年
- 通过PCR方法从克隆载体上扩增转基因水稻中的抗虫基因cry2A,经限制性内切酶EcoRI和BamHI双酶切定向插入到原核表达载体pET-30a(+)中,成功构建了蛋白表达载体pET-30a(+)/Cry2A,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。通过对其表达条件进行优化,发现在IPTG浓度为0.4mmol/L、诱导时间为6h、诱导温度为30℃的表达条件下,目的蛋白表达量最高,大部分以包涵体形式表达。将包涵体裂解并用Ni-NTA亲和柱纯化,所得纯化蛋白在复性缓冲液中复性,最终得到有活性的高纯度目的蛋白。
- 杨奇韩芳婷刘启文蒋玲曦谭芙蓉吴潇赵凯王金斌唐雪明
- 关键词:转基因水稻包涵体纯化
- 一种猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测方法
- 本发明公开了一种猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测方法,包括以下步骤:1)首先设计并合成特异性引物和探针;2)目的片段的获得:配制PCR反应体系,按照PCR反应程序进行反应得到目的片段;3)配制连接反应液;4)转化并提...
- 赵凯唐雪明韩芳婷邹勇李春华吴潇朱宏谭芙蓉王金斌蒋玲曦陶世如刘启文施伟
- 环介导等温扩增方法在生物检测方面的研究进展被引量:3
- 2011年
- 综述了环介导等温扩增(LAMP)技术的原理、引物设计、方法创新、应用、技术特点等,并指出了LAMP技术的优点及可能存在的问题。
- 施伟赵凯唐雪明韩芳婷许燕
- 关键词:环介导等温扩增生物检测
- 一种猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测方法
- 本发明公开了一种猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测方法,包括以下步骤:1)首先设计并合成特异性引物和探针;2)目的片段的获得:配制PCR反应体系,按照PCR反应程序进行反应得到目的片段;3)配制连接反应液;4)转化并提...
- 赵凯唐雪明韩芳婷邹勇李春华吴潇朱宏谭芙蓉王金斌蒋玲曦陶世如刘启文施伟
- 文献传递