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马现锋
作品数:
2
被引量:5
H指数:1
供职机构:
清华大学化学工程系生物化工研究所
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相关领域:
生物学
化学工程
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合作作者
罗晖
北京科技大学应用科学学院生物科...
沈忠耀
清华大学化学工程系生物化工研究...
文程
清华大学化学工程系生物化工研究...
于慧敏
清华大学化学工程系生物化工研究...
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三角酵母D-氨基酸氧化酶和(His)<,6>的融合蛋白基因在大肠杆菌中的克隆和表达
通过PCR的方法实现了三角酵母D-氨基酸氧化酶基因(DAAO)和6-His多肽基因的融合;将融合基因连接到质粒载体pET-28a,经过菌落PCR筛选得到了重组质粒pET-DAAOHis;重组质粒转化BL21(DE3) 感...
马现锋
于慧敏
罗晖
沈忠耀
关键词:
D-氨基酸氧化酶
融合蛋白
重组大肠杆菌
文献传递
D-氨基酸氧化酶与麦芽糖结合蛋白和透明颤菌血红蛋白的融合表达
被引量:5
2008年
D-氨基酸氧化酶(DAAO)是一种重要的工业酶。为了进一步提高DAAO在大肠杆菌中的可溶性和活性表达,分别构建了麦芽糖结合蛋白(MBP)和透明颤菌血红蛋白与三角酵母DAAO(TvDAAO)的N-端融合蛋白。其中,MBP融合蛋白MBP-TvDAAO在组成型(JM105/pMKC-DAAO)和诱导型菌株(JM105/pMKL-DAAO)中表达时,目标蛋白的可溶性表达量分别达到全细胞蛋白表达量的28%以上和17%左右,比无MBP融合的对照菌株BL21(DE3)/pET-DAAO分别提高3.7和1.8倍;但其酶活水平显著下降。VHb融合蛋白VHb-TvDAAO在重组菌BL21(DE3)/pET-VDAAO中摇瓶诱导表达时,DAAO酶活达到了3.24u/mL,比对照菌株BL21(DE3)/pET-DAAO提高了约90%。
于慧敏
马现锋
罗晖
文程
沈忠耀
关键词:
D-氨基酸氧化酶
透明颤菌血红蛋白
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