高静
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 神经黏附分子NECL1抑制神经胶质瘤细胞的迁移、侵袭并诱导其分化被引量：3
- 2009年
- 目的在NECL1表达缺失的神经胶质瘤细胞系中探讨神经黏附分子NECL1恢复表达后对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响。方法在U251胶质瘤细胞系中,通过划痕及Transwell实验观察NECL1恢复表达后对肿瘤细胞迁移及侵袭的影响,通过对细胞外金属蛋白酶活性的检测证明NECL1恢复表达后对肿瘤侵袭能力的影响。利用不同培养密度的U251细胞,对NECL1恢复表达后细胞形态进行观察,并通过Western blot实验验证相关蛋白的表达。结果在NECL1表达缺失的胶质瘤细胞系U251中,恢复NECL1的表达后,肿瘤细胞的迁移及侵袭受到了抑制。NECL1恢复表达的U251细胞有向星形胶质细胞分化的趋势,星形胶质细胞标志蛋白神经胶质纤维酸性蛋白的表达上调。结论神经黏附分子NECL1作为一个潜在的胶质瘤抑制因子,对肿瘤细胞的迁移和侵袭能力均有不同程度抑制作用,同时,NECL1具有诱导神经胶质瘤U251细胞向星形胶质细胞方向分化的潜能。
- 阴彬陈涛高静袁建刚彭小忠
- 关键词：星形胶质细胞
- Necl1促进原代培养大鼠神经元间神经突触形成
- 2008年
- 目的研究神经黏附分子Necl1在神经突触形成过程中的功能。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测在体外神经分化细胞模型(SH-SY5Y,P19)中Necl1表达量的变化;Western blot方法检测原代培养的大鼠海马和皮层神经元在体外培养条件下Necl1的表达量变化和在突触小体中Necl1的表达;细胞免疫荧光法检测神经元和293细胞共培养后293细胞表面突触形成情况,并检测在神经元内过表达Necl1后神经元表面突触密度变化。结果Necl1的表达量可随神经细胞的分化或原代神经元体外培养时间的延长而升高。纯化后的突触小体中存在Necl1的表达。过表达Necl1的293细胞在与原代神经元共培养的情况下可产生突触样结构。直接在原代培养神经元内过表达Necl1可提高神经元间突触密度。结论Necl1可能在中枢神经系统的神经突触形成中发挥功能。
- 陈涛吴旭东高静郝维阴彬强伯勤袁建刚龚燕华彭小忠
- 关键词：突触形成
- PRMT5通过抑制NF-κB削弱DR4介导的趋化因子CCL20释放
- 2013年
- 构建表达DR4的质粒pCMV-DR4-HA(DR4)和表达PRMT5的质粒pCMV-PRMT5-Flag,共转染293T细胞,验证DR4和PRMT5的相互作用.将DR4和蛋白精氨酸N端甲基化转移酶5(protein arginine methyltransferase5,PRMT5)两种质粒分别或者共转染293T细胞,研究PRMT5对DR4引起的炎症因子释放的影响,探讨PRMT5抑制DR4(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor1)引起炎症因子释放的分子机制.分别通过RT-PCR和ELISA方法对炎症因子的表达进行定量检测.通过双荧光报告基因方法检测PRMT5对DR4引起NF-κB活性变化的影响,并且使用WesternBlot方法检测ERK的表达变化.DR4和PRMT5在293T细胞中能相互结合,PRMT5过表达降低了DR4引起的NF-κB活性和ERK的磷酸化,导致CCL20分泌减少.因此,PRMT5在293T细胞中与DR4结合,通过改变NF-κB和ERK激酶活性影响了CCL20的分泌,参与了DR4介导的细胞免疫调节.
- 王东生刘丹高静刘敏刘士廉刘彦信郑德先
- NECL1对神经胶质瘤细胞系T98G增殖的影响被引量：1
- 2008年
- 目的研究神经胶质瘤中表达缺失基因NECL1对神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及Westernblot方法检测NECL1在1例人正常脑组织和6株人神经胶质瘤细胞系中的表达谱。选取NECL1缺失表达、转染效率相对较高的T98G细胞作为研究对象,采用细胞生长曲线、流式细胞仪、Hoechst染色等方法观察过表达NECL1对T98G细胞体外增殖能力的影响。结果NECL1在6株人神经胶质瘤细胞系中的表达明显下降或缺失。在T98G细胞中过表达NECL1,细胞生长速度较对照组明显变慢,凋亡细胞数较对照组明显增多。结论NECL1可能通过促进神经胶质瘤细胞系的凋亡而抑制其增殖。
- 高静陈涛阴彬龚燕华强伯勤袁建刚彭小忠
- 关键词：神经胶质瘤增殖凋亡
- MiR-146a调节TRAIL不敏感的乳腺癌细胞迁移及其分子机制被引量：3
- 2013年
- 目的研究miR-146a及其靶基因EGFR对乳腺癌细胞迁移的影响。方法用终浓度为50、100、200和500μg/L的重组可溶性TRAIL(rsTRAIL)持续刺激对TRAIL敏感的MDA-MB-231细胞4周,筛选得到TRAIL不敏感的乳腺癌细胞MDA-MB-231/TR。RT-PCR检测miR-146a的表达;Transwell实验以及划痕实验检测乳腺癌细胞的迁移能力;双荧光素酶报告基因分析以及Western blot鉴定MDA-MB-231/TR细胞中miR-146a与EGFR基因的靶向调控关系;Western blot检测DR4、DR5、IRAK1、CXCR4、p-IκBα、IκBα、caspase 8和caspase 3的蛋白表达水平;染色质免疫共沉淀技术(ChIP)分析MDA-MB-231和MDA-MB-231/TR细胞中NF-κB P65亚基与miR-146a启动子区的结合情况。结果 TRAIL细胞毒作用不敏感的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231/TR中miR-146a的表达降低,并引起其靶基因EGFR的表达增加,最终导致TRAIL不敏感的乳腺癌细胞迁移能力增强。同时发现NF-κB参与miR-146a低表达的调控。结论 miR-146a对TRAIL不敏感的乳腺癌细胞迁移起重要的调节作用。
- 刘丹姜明红刘敏高静刘彦信郑德先
- 关键词：TRAIL乳腺癌细胞MIR-146A迁移
- miR-146a对小鼠巨噬细胞IL-18表达的影响被引量：8
- 2011年
- 目的:探讨miR-146a对小鼠单核-巨噬细胞株RAW264.7以及小鼠原代腹腔巨噬细胞Thl/Th2类细胞因子表达的影响。方法:体外培养的小鼠单核-巨噬细胞系RAW264.7细胞和腹腔新鲜分离的巨噬细胞分别瞬时转染miR-146a mimics、阴性对照mimics(NC mimics)、抑制性miR-146a(miR-146a inhibitor)和抑制性miR-146a阴性对照(NC in-hibitor)。转染后,利用real time PCR定量检测IL-18、IL-5和IL-10的表达情况。结果:RAW264.7细胞和原代腹腔巨噬细胞在转染miR-146a mimics后IL-18的表达水平明显降低(P<0.05),转染miR-146a inhibitor后IL-18的表达水平明显升高(P<0.05),但对IL-5和IL-10的表达,两种转染形式均没有影响。结论:巨噬细胞RAW264.7及原代巨噬细胞表达的miR-146a能够负向调控Thl类细胞因子IL-18的表达,但是不能调控Th2类细胞因子IL-5及IL-10的表达。
- 项洋姜明红王东生高静张亚玺刘彦信郑德先
- 关键词：巨噬细胞MIR-146ATH1/TH2细胞因子表达
- miR-23a对LPS诱导小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响被引量：8
- 2013年
- 目的探讨miR-23a对LPS诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响。方法 Real-time PCR定量分析LPS刺激不同时间的腹腔巨噬细胞中miR-23a的表达以及瞬时转染miR-23a mimics和inhibitors的腹腔巨噬细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α等促炎性细胞因子的表达;ELISA检测mRNA变化明显的细胞培养上清的IL-6的含量。结果原代腹腔巨噬细胞在LPS刺激后,miR-23a的表达明显下调;在转染miR-23a mimics后,IL-6的表达和分泌明显升高(P<0.05),但对IL-1β和TNF-α的表达没有明显影响。而转染miR-23a inhibitors后,则IL-6的表达水平受到抑制。结论 LPS刺激原代巨噬细胞可抑制miR-23a的表达;miR-23a可促进炎性细胞因子IL-6的表达,对IL-1β和TNF-α无显著影响。
- 刘敏姜明红高静刘丹刘彦信郑德先
- 关键词：巨噬细胞LPS促炎性细胞因子
