黄梁浒
- 作品数:123 被引量:352H指数:9
- 供职机构:福州总医院更多>>
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- 低剂量免疫抑制剂诱导人脐带间充质干细胞自噬并促进CXCR4的分泌被引量:1
- 2017年
- 目的 分析低剂量免疫抑制剂诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)产生自噬,并对趋化因子受体CXCR4分泌的影响.方法 低剂量的免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司分别处理MSC后,流式细胞术检测hUC-MSC细胞表面标志物变化,WST-1法检测hUC-MSC细胞增殖的影响;并通过qRT-实时聚合酶链反应(PCR)检测自噬基因LC3B、Atg5、Beclin1 mRNA水平的变化,及Western blot检测他克莫司和西罗莫司诱导的自噬相关蛋白LC3B、Atg5、Beclin1和p-ULK1的表达;同时流式细胞术也分析了在hUC-MSC产生细胞自噬的状态下趋化因子受体CXCR4的分泌.结果 低剂量的免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司并不引起hUC-MSC细胞表面标志物分子的表达明显改变,且低剂量的他克莫司对hUC-MSC完全没有细胞毒性作用,而西罗莫司对hUC-MSC的细胞增殖有一定的抑制作用,24 h和48 h的存活率分别为73.66%或68.81%,P<O.05具有统计学意义.他克莫司和西罗莫司都能通过抑制PI3K/AKt/mTOR信号通路激活hUC-MSC自噬,自噬相关蛋白LC3B、Atg5和Beclin1表达显著上调,并诱导CXCR4分泌上调.结论 低剂量免疫抑制剂他克莫司和西罗莫司能诱导人脐带间充质干细胞hUC-MSC产生自噬并促进CXCR4的分泌.
- 雷艳赵红州李荣春付云烽施小华林娜陈津詹世淮谭建明黄梁浒
- 关键词:他克莫司西罗莫司间充质干细胞细胞自噬CXCR4
- 应用双侧扩增阻滞突变系统排除肾上腺脑白质营养不良分子诊断中假基因的干扰被引量:1
- 2006年
- 目的应用扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutationsystem,ARMS)排除ABCD1假基因的干扰,对肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy, ALD)家系进行基因突变分析。方法按ARMS引物设计原则设计上游引物(正常引物、突变引物)和下游公共引物,对家系成员的基因组DNA分别进行PCR扩增。结果R617C突变患者及其母亲的突变引物均扩增出特异性条带(107 bp) ,患者父亲和对照则未见条带,在基因组DNA水平证实了R617C突变的存在。结论双侧ARMS方法可以快速、有效地排除假基因干扰。
- 王志红黄梁浒兰风华
- 关键词:肾上腺脑白质营养不良分子诊断ABCD1基因假基因扩增阻滞突变系统
- 成人胰岛细胞分离纯化技术
- 2009年
- 目的探讨成人胰岛细胞分离纯化技术,为胰岛细胞移植治疗1型糖尿病提供大量高质量的胰岛细胞。方法使用LiberaseHI复合胶原酶和改良的Recordi自动胰岛细胞分离技术分离胰岛,采用COBE2991细胞淘洗仪连续密度梯度离心纯化胰岛细胞,用DTZ和AO-PI染色显微镜下评价胰岛细胞的数量、纯度和活性。结果本组研究共分离30例胰腺的胰岛,获得胰岛细胞数量平均为(316626±191972)IEQ,平均每克胰腺收获胰岛细胞3389IEQ,收获的胰岛纯度平均为(74.7±7.84)﹪,活度平均为(94.1±2.19)﹪,胰岛细胞刺激指数平均为3.68±0.58。在此基础上,成功实施7人12次的成人胰岛细胞移植。结论成功建立了改良的Recordi自动胰岛分离技术,获得大量高纯度有活性的胰岛细胞,为开展胰岛细胞临床移植提供了保障。
- 陈津黄梁浒王庆华马予洁杨顺良蔡锦全谭建明
- 关键词:胰岛细胞细胞分离纯化
- 成人胰岛细胞移植25例次临床研究被引量:1
- 2009年
- 目的建立新型成人胰岛细胞分离纯化方法,观察成人胰岛细胞移植的安全性与有效性。方法PFC与UW液双层冷藏胰腺,Liberase酶消化,COBE2991型专用胰岛细胞分离机分离及连续密度梯度纯化,获取高纯度与高活性的胰岛细胞。采用外科方法,将短期培养的胰岛细胞经门静脉移植到肝脏内。术后监测血糖与胰岛素用量、C肽与糖化血红蛋白水平以及肝肾功能,并与术前比较。结果47个胰腺成功分离胰岛细胞,平均数量32.5万IEQ、纯度81.4﹪、活率93.2﹪、刺激指数3.26,病原学结果均阴性。14例1型糖尿病患者实施成人胰岛细胞移植25次,每次移植平均胰岛数量为10200IEQ/kg。采用无激素免疫抑制治疗。随访18个月至5年,8例完全撤除胰岛素,6例胰岛素用量较术前减少60﹪以上。术后血糖稳定维持在正常水平,C肽均超过0.5nmol/L,糖化血红蛋白基本正常,肝肾功能稳定维持正常,无胰岛移植并发症。结论新型成人胰岛细胞分离纯化方法可靠,成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病临床疗效较好,手术简捷,安全性好。
- 谭建明杨顺良蔡锦全吴卫真郭君其黄梁浒王庆华吴志贤陈津
- 关键词:糖尿病成人胰岛细胞
- 亲子鉴定实验在遗传病产前分子诊断中的应用
- 为探讨亲子鉴定实验在遗传病产前分子诊断中的应用,超声监视下行羊膜穿刺术,抽取羊水,提取羊水细胞基因组DNA。在对相关疾病基因(X-连锁肾上腺-脑白质营养不良基因、脊肌萎缩症SMV1基因和DMD基因)进行检测前,先对羊水细...
- 严爱贞曾健柯龙凤王志红黄梁浒兰风华
- 关键词:产前诊断羊水
- 文献传递
- 一种经卵磷脂处理的脂肪基质血管组分制备技术
- 本发明公开了一种经卵磷脂处理的脂肪基质血管组分制备技术,包括从腹部抽取脂肪组织,经卵磷脂处理,离心过滤后即可获得基质血管组分。本发明技术简单易行,能更有效地从脂肪组织中获取富含各种类型干细胞的基质血管组分,同时有效的保护...
- 谭建明陈津黄梁浒徐秀敏
- 文献传递
- 糖尿病患者骨髓间充质基质细胞大规模分离培养的影响因素分析
- 【背景】骨髓间充质基质细胞(Bone Marrow-Mesenchymal Stromal Cells,BM-MSCs)具有强大的自我更新能力和多向分化潜能,为目前的再生医学和临床治疗各种疾病提供有力帮助。目的初步探讨疾...
- 黄梁浒陈津王庆华马予洁林娜付云烽施小华赵红州谭建明
- 文献传递
- 间充质干细胞治疗重症胰腺炎一例被引量:4
- 2011年
- 急性重症胰腺炎是以胰腺弥漫性出血和组织坏死为特征,发病急骤,并发症和死亡率较高[1]。传统治疗手段包括抗炎和抑制胰腺外分泌及胰酶活性,属于对症治疗,尚不能有效促进胰腺组织修复和再生。研究表明,间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)分泌多种细胞因子和生长因子,作用于周围组织发挥旁分泌作用,促进组织再生及防止纤维化形成。因此,MSCs可能成为治疗急性胰腺炎的新方法。
- 王瑾王庆华黄梁浒陈津罗芳宋京翔谭建明
- 关键词:急性重症胰腺炎干细胞治疗胰腺外分泌MSCS弥漫性出血
- TNFα和TNFR1信号通路对小鼠急性肾损伤敏感性影响的研究被引量:3
- 2012年
- 目的本研究拟从衣霉素诱导的内质网应激反应着手,观察肿瘤坏死因子α(TNFα)及TNF受体1、受体2(TNFR1、TNFR2)在急性肾组织损伤过程中的作用。方法采用衣霉素腹腔注射TNFα、TNFR1、TNFR2基因敲除小鼠及TNFR1R2联合基因敲除小鼠,造成其肾组织急性内质网应激反应和急性肾损伤,对各种小鼠肾组织分别进行病理染色、mRNA和蛋白水平表达检测、凋亡细胞染色、免疫组化染色和油红O染色等。在体外应用免疫印迹方法,检测TNFR1基因敲除小鼠肾近曲小管细胞的真核翻译起始因子2α(eIF2α)的磷酸化蛋白表达水平,并检测磷酸化酶抑制剂(salubrinal)作用后eIF2α的磷酸化水平。结果与C57小鼠相比,TNFα基因敲除小鼠对衣霉素引起的肾损伤更严重,且其病变主要位于肾近曲小管,表现为广泛的空泡变性、脂质聚积和细胞凋亡。提前24h用TNFα腹腔注射TNFα基因敲除小鼠,能逆转衣霉素引起的肾损伤。用衣霉素作用于TNFR1、TNFR2基因敲除小鼠,发现只有TNFR1基因敲除小鼠出现严重的肾损伤,而TNFR2基因敲除小鼠未出现类似的反应,提示TNFα主要通过TNFR1通路发挥作用。衣霉素诱导的急性内质网应激反应,未引起TNFα和TNFR1基因敲除小鼠肾组织中eIF2α的活化(磷酸化)。在体外,衣霉素也未引起TNFR1基因敲除小鼠肾近曲小管细胞的eIF2α磷酸化,反而造成小管细胞凋亡增加;eIF2α磷酸化酶抑制剂作用于TNFR1基因敲除小鼠肾小管细胞后,能明显提高eIF2α的磷酸化,降低小管细胞凋亡率。结论阻断TNFα/TNFR1信号通路能导致肾组织eIF2α失调,提高了对急性内质网应激损伤的敏感性。
- 黄梁浒张瑞华吴瑾陈建谭建明郑丰
- 关键词:肿瘤坏死因子Α肿瘤坏死因子受体1内质网应激急性肾损伤
- 福州地区产超广谱β-内酰胺酶菌的药敏监测被引量:5
- 2002年
- 目的 监测福州地区产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对 1 4种常用抗生素的药敏情况。方法 收集 2 0 0 1年 3月~ 1 0月福州地区 4家医院分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌 42 6株 ,用表型确认试验检测 ESBLs,用 Kirby- Bauer琼脂扩散法作药敏试验。结果 42 6株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中 ,共检出产 ESBLs菌1 4 2株 ,检出率为 33.33% ;产 ESBLs菌对大多数抗生素的耐药性严重 ;亚胺培南、头孢哌酮 /舒巴坦、哌拉西林 /三唑巴坦和头孢美唑对产 ESBLs菌的耐药率最低。结论 福州地区产 ESBL s菌流行情况严重 ;产 ESBLs菌对大多数抗生素耐药性严重 ;亚胺培南、头孢哌酮 /舒巴坦、哌拉西林 /三唑巴坦和头孢美唑是治疗由产 ESBLs菌引起感染的有效抗生素。
- 林庆安赖国祥黄梁浒马洪玉柳德灵赖红斌
- 关键词:产超广谱Β-内酰胺酶菌药敏监测ESBLS耐药性肺炎克雷伯菌大肠埃希菌