丁一娟
- 作品数：31 被引量：40H指数：4
- 供职机构：西南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- HIGS-SsCCS转基因拟南芥的菌核病抗性鉴定被引量：4
- 2020年
- 【目的】菌核病是由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起的一类真菌病害,核盘菌寄主范围广泛,严重危害多种作物的品质。本研究利用寄主诱导基因沉默(HIGS)的方法在寄主中诱导核盘菌致病相关基因的沉默从而增强寄主的菌核病抗性,为菌核病抗病育种提供新的思路。【方法】铜锌超氧化物歧化酶是一种重要的抗氧化剂,以核盘菌铜锌超氧化物歧化酶铜伴侣基因(copper chaperone for copper/zinc superoxide dismutase,SsCCS)为靶基因,通过生物信息学分析该基因的结构特点,并利用MEGA6.0软件构建系统发育树;通过分别比对拟南芥及核盘菌基因组,选择特异的干扰片段进行扩增;采用农杆菌介导的浸花序法,将HIGS载体转入拟南芥Col-0,通过DNA鉴定以及标记筛选出稳定的HIGS-CCS转基因拟南芥;选取4—5周龄的HIGS-CCS转基因拟南芥植株叶片接种核盘菌野生菌株1980,于接种24 h后统计病斑面积,分析转基因株系的菌核病抗性;通过qRT-PCR分析核盘菌侵染转基因植株过程中SsCCS的表达情况;同时在接种6、12、24 h后利用DAB染色的方法检测转基因植株与核盘菌互作过程中H2O2的积累。【结果】生物信息学分析结果表明,SsCCS(SS1G_00102)全长为1010 bp,编码序列长759 bp,共编码253个氨基酸,该蛋白分子质量为27176.96 Da,等电点(PI)为5.04,与灰霉病菌BcCCS(EDN25358)亲缘关系最近,氨基酸同源性达到87%,与拟南芥AtCCS(AT1G12520.1)亲缘关系较远;通过与核盘菌以及拟南芥基因组比对,选择314 bp特异干扰片段,成功构建SsCCS的HIGS表达载体,转化拟南芥。T1及T2代转基因拟南芥接种核盘菌24 h后的病斑面积均小于野生型拟南芥。从T2代中获得3个稳定表达的T3代HIGS-CCS转基因拟南芥株系:HIGS-CCS-5、HIGS-CCS-8、HIGS-CCS-13;与野生型拟南芥相比,转基因拟南芥在接种核盘菌24 h后,病斑面积显著减小46%—61%;qRT-PCR结果显示核盘菌在侵染转基因植株过�
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- 关键词：拟南芥核盘菌菌核病
- 一种植物离体茎杆接种鉴定菌核病抗性的方法
- 本发明涉及一种植物离体茎杆接种鉴定菌核病抗性的方法，即将植物主茎或者分枝砍下，放置在温度和湿度恒定的密闭环境，进行核盘菌接种。通过记录菌斑扩展长度，衡量材料的抗病性强弱。与传统的菌核病茎杆抗性鉴定方法相比较，本发明在可控...
- 钱伟梅家琴丁一娟魏大勇
- 一种与油菜菌核病茎杆抗性紧密相关的分子标记及应用
- 本发明属于油菜育种和分子生物学技术领域，具体涉及一种油菜菌核病茎杆抗性紧密相关的分子标记及其应用，该分子标记综合使用可预测油菜菌核病茎杆抗性的相对高低。以油菜单株的总DNA为模板，利用上述两个引物进行PCR扩增，扩增产物...
- 梅家琴邵超国钱伟丁一娟李月华
- 文献传递
- 利用甘蓝改良甘蓝型油菜的方法
- 本发明属于植物育种技术领域，具体涉及利用甘蓝改良甘蓝型油菜的方法。本发明要解决的技术问题是为改良甘蓝型油菜提供一种新选择。本发明的技术方案是利用甘蓝改良甘蓝型油菜的方法，包括如下步骤：（1）种间六倍体F1杂种的获得；（2...
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- 文献传递
- 核盘菌SsMAS3基因及其在植物菌核病抗性育种中的应用
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及核盘菌SsMAS3基因及其在植物菌核病抗性育种中的应用。将该基因的部分编码序列的正义序列和反义序列分别与沉默载体pCIT的内含子的两端连接形成SsMAS3的RNAi结构，将该RNAi结...
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- 核盘菌分泌蛋白SsGSSP1的功能验证
- 核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)作为一类世界性分布的重要植物病原真菌,其引起的菌核病严重威胁到油菜等作物的生产。研究发现核盘菌在侵染寄主过程中会分泌小分子蛋白,与寄主植物相互作用,参与核盘菌的致病...
- 廖洪梅丁一娟陈燕桂冬梦荃孟欣然钱伟
- 关键词：核盘菌分泌蛋白致病机制
- 核盘菌SsBMR1基因及其在植物菌核病抗性育种中的应用
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及核盘菌SsBMR1基因及其在增强寄主菌核病抗性中的应用。将该基因的部分编码序列的正义序列和反义序列分别与沉默载体pCIT的内含子的两端连接形成SsBMR1的RNAi结构，将该RNAi结...
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- 文献传递
- 一种筛选数量性状候选基因的方法
- 本发明属于分子育种领域，主要涉及一种筛选数量性状候选基因的方法，该方法是提取数量性状相关区间（QTL区间和GWAS区间）的基因作为“候选基因集”，收集与该性状相关的已知基因作为“诱饵”基因，通过对一组样品的转录组数据进行...
- 钱伟崔艺馨万华方贺亚军熊清丁一娟梅家琴刘智曾晓廖泾行索朗贡布
- 文献传递
- 核盘菌SsMAS3基因及其在植物菌核病抗性育种中的应用
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及核盘菌SsMAS3基因及其在植物菌核病抗性育种中的应用。将该基因的部分编码序列的正义序列和反义序列分别与沉默载体pCIT的内含子的两端连接形成SsMAS3的RNAi结构，将该RNAi结...
- 丁一娟钱伟柴亚茹申浩晶杨文静闫宝琴
- 文献传递
- 水稻Os-miR6225y调控核盘菌靶基因ssv263参与非寄主抗性的分子机制
- 由真菌核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary]引起的菌核病严重影响油菜(Brassica napus L.)生产,造成其产量品质下降。由于缺乏抗源,目前油菜菌核病抗性改良陷...
- 陈燕桂冬梦荃廖洪梅孟欣然赵斯琪吴朝晖杨楠丁一娟钱伟
- 关键词：核盘菌非寄主抗性
