于旸
- 作品数:72 被引量:95H指数:5
- 供职机构:哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- RNA干扰技术沉默Stat3基因对胃癌细胞SGC7901生物学行为影响的实验研究被引量:7
- 2008年
- 目的:构建Stat3-siRNA表达载体,探讨转染Stat3-siRNA表达载体阻断人胃癌细胞系SGC7901的Stat3信号传导通路对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用RNAi技术,构建Stat3-siRNA表达载体,稳定转染胃癌细胞系SGC7901,利用Real-time PCR、Western Blot、MTT、流式细胞技术等方法分别检测Stat3基因mRNA和蛋白表达及细胞增殖和凋亡的变化情况。结果:成功构建Stat3-siRNA表达载体,经测序验证无误。Western Blot及Real-time PCR结果显示:Stat3基因的表达水平均下降,其中以SGC7901-siRNA3干扰效果最明显,差异具有显著性(P<0.05)。MTT法结果显示:稳定转染SGC7901细胞后,细胞的增殖能力明显下降,与对照组相比差别显著(P<0.05)。流式细胞技术显示:Stat3-siRNA3实验组较对照组出现了明显的细胞凋亡,在G1期前出现的亚二倍峰即为凋亡峰。结论:Stat3基因的RNAi重组体可以有效的抑制Stat3基因的表达,RNA干扰技术沉默Stat3基因能够抑制胃癌细胞的生长,促进其凋亡。
- 赵亮赵家宏孙凌宇于旸刘锋张岂凡张玉宝董新舒傅松滨崔滨滨
- 关键词:STAT3RNA干扰
- OPB7-1基因的克隆及初步的功能分析
- OPB7-1是该课题组前期工作在肺癌细胞系中获得的存在表达差异的片段.该文通过GenBank数据库检索获得的同源序列设计基因特异性引物,应用RACE方法,从人正常肺组织中调取该片段的3'和5'末端,获得OPB7-1基因在...
- 于旸
- 关键词:选择性剪接CDNA末端快速扩增亚细胞定位
- 文献传递
- 人卵巢癌细胞系UACC-1598中双微体序列测定方法
- 本发明提供了一种人卵巢癌细胞系UACC-1598中双微体序列测定方法,一、人卵巢癌细胞UACC-1598的培养及细胞完整双微体的脉冲场凝胶电泳分离;二、将获得的卵巢癌细胞系UACC-1598的双微体,应用Roche公司4...
- 傅松滨于旸朱静孟祥宁孙文靖张春玉
- 文献传递
- 构建Neuregulin1克隆载体的实验
- 2005年
- 目的:Schwann细胞具有促进神经元再生的作用,Neuregulin1(NRG1)具有促进神经元再生和Schwann细胞增殖的效应,构建NRG1克隆载体,可为下一步建立NRG1转染的Schwann细胞系,对神经损伤模型进行Schwann细胞移植,观察其对神经损伤的修复作用提供重要实验方法。方法:实验于2003-09/2004-01在哈尔滨医科大学医学遗传学研究室完成。提取幼龄大鼠脑RNA,反转录聚合酶链反应,用XbaⅠ和EcoRⅠ对目的基因和载体质粒进行双酶切,T4连接酶连接Schwann后转化Top10感受态大肠杆菌,挑取LB(Amp+)平板生长克隆菌摇菌扩增,用菌液扩增聚合酶链反应检测目的基因,同时提取质粒与空载体并列电泳验证克隆质粒,进行克隆载体测序。结果:获得一株NRG1克隆质粒,测序结果显示为NRG1新的异构体,用基因组DNA和cDNA为模板扩增聚合酶链反应验证是NRG1新的剪切体。结论:构建的NRG1克隆异构体是大鼠NRG1基因克隆载体,可用于进一步的细胞转染、蛋白表达功能检测和细胞移植研究。
- 张际绯金连弘傅松滨史忠诚于旸
- 关键词:克隆载体SCHWANN细胞反转录聚合酶链反应聚合酶链反应检测神经元再生幼龄大鼠
- DNA-PKcs在制备改变肿瘤细胞对MTX耐药性的药物中的应用
- 本发明涉及DNA-PKcs在制备影响DHFR基因扩增改变肿瘤细胞对MTX耐药性的药物中的应用,属于生物医药。本发明通过建立MTX耐药细胞进化模型,选取低浓度耐药(HSRs)和高浓度耐药(DMs)细胞为研究对象,检测亲本细...
- 傅松滨孟祥宁朱静李春香金焰孙文靖于旸
- 非同源末端连接途径在含双微体肿瘤的功能研究
- 目的:探讨NHEJ途径在双微体形成过程中的功能以及对肿瘤细胞本身的影响。方法:利用pSUPER siRNA基因沉默系统,在含双微体的人卵巢癌细胞系UACC-1598中将NHEJ通路相关蛋白DNA-PKcs、XRCC4、A...
- 于旸朱鹏飞张慧媛白静傅松滨
- 关键词:双微体DNA-PKCSARTEMIS
- 文献传递
- UBC9的反义核苷酸序列在制备抑制癌细胞生长药物中的应用
- 本发明公开了UBC9的反义核苷酸序列在制备抑制癌细胞生长药物中的应用。在本发明中,设计合成了一条UBC9特异性的反义核苷酸序列,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用UBC9特异性的反义核苷酸序列,通过RN...
- 傅松滨吴杰孙文靖计薇贾学渊于旸邹宏岩白静
- 文献传递
- rab5a基因在肿瘤转移中的作用研究被引量:6
- 2005年
- 为研究rab5a基因在肿瘤转移机制中的作用,将该基因稳定转染至低转移肺腺癌细胞系AGZY83-a中,采用Superarray肿瘤转移相关基因微芯片分析rab5a对肿瘤转移相关基因的表达影响。共获得了5个差异表达基因,rab5a基因促进s100a4的表达,同时抑制了nm23ar、ac1、cst3、col4a2等基因的表达,并分别在RNA及蛋白水平进行验证,确认rab5a基因影响了肿瘤转移的多个途径,促进了肿瘤细胞转移能力增强。
- 史忠诚于旸李钰傅松滨
- 关键词:RAB5A基因肿瘤转移微芯片
- UBC9的反义核苷酸序列在制备抑制癌细胞生长药物中的应用
- 本发明公开了UBC9的反义核苷酸序列在制备抑制癌细胞生长药物中的应用。在本发明中,设计合成了一条UBC9特异性的反义核苷酸序列,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用UBC9特异性的反义核苷酸序列,通过RN...
- 傅松滨吴杰孙文靖计薇贾学渊于旸邹宏岩白静
- 文献传递
- P53可以通过激活BniP3参与调控肺癌细胞的凋亡
- 目的:p53基因是重要的抑癌基因之一。它抑制肿瘤细胞增殖、参与细胞凋亡调控,但具体机制尚不十分清楚。本研究采用凋亡相关基因芯片检测p53基因介导肺癌细胞发生凋亡的通路,拟阐明与之相关的调控机制。方法:采用Superarr...
- 金焰李明吴杰吕娜于旸白静陈峰傅松滨
- 关键词:P53基因肺癌