刘雪琴
- 作品数：14 被引量：145H指数：6
- 供职机构：中南大学湘雅医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划湖南省重点学科建设项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 多价复合疫苗免疫猪血清与SIEA免疫特性的初步分析
- 血吸虫病疫苗研究一直是当前血防科研的重点内容之一。业已证明来源于血吸虫不同阶段抗原如Sm28,Sj26,97kDa,155kDa,GP68,GP38等,免疫动物均可产生不同程度的保护效果。本研究采用抗日本血吸虫病天然分子...
- 刘雪琴汪世平徐绍锐周帅峰何卓周松华彭先楚肖小芹曾少华车宏丽
- 文献传递
- 湖北钉螺人工感染、室内传代与模拟野外饲养的研究(英文)被引量：2
- 2011年
- 目的:通过人工方法将湖北钉螺制备成血吸虫感染性钉螺,确定钉螺感染的最佳条件,建立钉螺人工感染传代的室内株,为研究其感染活性、遗传变异和疫苗等提供实验室依据。方法:用尼龙绢筛集卵法收集日本血吸虫成熟虫卵,常规法孵化毛蚴。将钉螺与毛蚴按不同比例进行感染,感染方式分为个体感染和集体感染。个体感染随机分6组(Ⅰ～Ⅵ组),每组200只钉螺,每只钉螺置单孔内分别感染,钉螺感染毛蚴比例分别为1:0,1:5,1:10,1:15,1:20,1:25;集体感染随机分6组(Ⅶ～Ⅻ组),每组200只钉螺,按组别集中感染,Ⅶ～Ⅻ组钉螺感染毛蚴比例分别同Ⅰ～Ⅵ组。然后对每组钉螺的感染数、死亡数及尾蚴逸出量进行比较,确定最佳感染方法和比例。以第1代人工感染性钉螺逸出的尾蚴感染实验动物,获取成熟虫卵并孵化毛蚴,然后采用个体感染方式,以1:15的比例继续感染钉螺,获得第2代人工感染性钉螺。比较第1代与第2代人工感染性钉螺的感染数、死亡数及尾蚴逸出数。通过动物感染实验,比较人工第1代、第2代感染性钉螺与自然感染性钉螺日本血吸虫成虫发育率、每克粪卵数(fecaleggspergram,FEPG)及每克肝卵数(livereggspergram,LEPG)。结果:个体感染Ⅰ～Ⅵ组的钉螺感染数分别为0±0,22.7±4.2,31.7±4.5,53.0±5.3,39.3±5.9,32.7±4.7;钉螺死亡数分别为21.7±3.1,25.0±3.6,31.3±4.9,44.7±6.5,78.3±9.5,89.7±13.6;钉螺平均逸蚴量为0±0,308.0±96.6,428.1±146.2,527.0±171.1,571.4±148.9,602.9±356.3。集体感染Ⅶ～Ⅻ组,钉螺感染数分别为0±0,12.3±2.5,18.7±4.7,28.3±4.2,33.3±4.7,29.3±5.5;钉螺死亡数分别为22.7±3.8,23.7±4.5,28.3±5.5,47.0±9.5,75.7±8.5,86.3±12.2;钉螺平均逸蚴量为0±0,244.5±57.3,292.3±74.8,347.1±100.8,477.2±142.1,447.3±161.4。用人工制备的第1代感染性钉螺对血吸虫进行人工传代研究,成功获得了人工第2代感染性钉螺,感染率为24.65%,钉螺死亡�
- 夏英定汪世平刘雪琴高冬梅李庆华吴平陈秀春冯其梅周云飞张树菊
- 关键词：日本血吸虫湖北钉螺毛蚴传代
- 高效天然分子疫苗免疫猪血清筛选尾蚴抗原的结果分析被引量：8
- 2007年
- 采用日本血吸虫天然分子(Schistosoma japonicum immature egg ws-vaccine,SjiEw)免疫猪血清识别日本血吸虫可溶性尾蚴抗原(Soluble cercariae antigen,SCA),以筛选新的具有保护性免疫潜在价值的抗原分子。按常规方法制备日本血吸虫尾蚴抗原。家猪随机分组并分次免疫日本血吸虫天然分子疫苗,制备SjiEw疫苗免疫猪血清,通过蛋白免疫印迹技术分析其与SCA的免疫反应性。结果显示SDS-PAGE中SCA有16条主带。SjiEw疫苗免疫猪血清共筛选6种具免疫学活性的抗原分子,分子量分别为:50、56、66、68、70、85kDa。这些抗原分子的获得为以后的天然分子编码基因工程疫苗的制备奠定基础。
- 刘雪琴汪世平曾少华高冬梅何卓
- 关键词：日本血吸虫免疫反应性
- 人体蠕形螨人群感染现场流行病学的调查与分析(英文)被引量：3
- 2006年
- 目的了解人群感染蠕形螨情况和流行规律及居住环境中物品污染情况,为科学防治提供依据。方法应用挤压刮拭法和透明胶纸粘贴法检验人体皮肤;采用透明胶纸法检验物器具。结果调查发现在校中学生感染率为48.05%,连续4次检查男、女人群感染率差异无显著性;蠕形螨人群感染随年龄增加而增多,对154名在校生的观察,人体蠕形螨感染具有家庭聚集性;宾馆房间物品检测,面巾和面巾挂杆污染率分别为0.07%和0.03%。结论蠕形螨人群感染具有家庭聚集性,外界物品可作为传播载体,防治人体蠕形螨应包括感染者和与感染者共同生活人群的治疗,对感染者居住环境中的物品应采取消杀等措施进行处理。
- 曾少华汪世平李文凯周松华刘雪琴张加祥肖小芹徐绍锐姜孝新彭先楚
- 关键词：蠕形螨污染
- 美洲大蠊提取物抗炎、镇痛作用的实验研究被引量：91
- 2007年
- 目的本实验就美洲大蠊提取物的抗炎、镇痛等药理作用进行动物实验研究。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀和蛋清致大鼠足跖肿胀两种动物模型,考察美洲大蠊提取物抗炎作用;采用小鼠热板法镇痛试验及醋酸致小鼠扭体反应模型以考察其镇痛的效果。结果美洲大蠊提取物可抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿(P<0.05)、蛋清所致的大鼠足跖肿胀(P<0.05),可使醋酸所致的扭体次数明显减少(P<0.05),并使小鼠热板法痛阈明显提高(P<0.01)。结论初步证明美洲大蠊提取物具有抗炎消肿、镇痛的作用。
- 肖小芹汪世平徐绍锐刘雪琴罗臣吴仕筠曾少华
- 关键词：美洲大蠊抗炎作用镇痛作用
- 日本血吸虫中国株次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶真核重组质粒的构建及其动物免疫保护性研究被引量：4
- 2007年
- 目的克隆日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(SjHGPRT)全长编码基因,研究其DNA疫苗诱导小鼠的免疫保护作用。方法将全长SjHGPRT基因克隆到真核表达载体pcD- NA3上,构建真核表达质粒pcDNA3-SjHGPRT,用经双酶切、PCR和测序鉴定正确的真核表达质粒免疫昆明小鼠3次,每次间隙2周,第3次免疫后第2周进行日本血吸虫尾蚴攻击感染,感染后42 d处死小鼠,收集成虫、肝脏和24 h粪便,计算减虫率和减卵率。结果成功构建真核表达质粒pcDNA3- SjHGPRT。动物免疫实验结果显示:pcDNA3-SjHGPRT疫苗组减虫率23.17%、肝减卵率41.64%、粪减卵率40.57%,每雌虫子宫内卵减卵率26.95%,与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。每雌虫子宫内卵减卵率及肝、粪减卯率明显高于减虫率,表明pcDNA3-SjHGPRT疫苗可能主要在抗血吸虫卵胚发育或抗生殖方面起作用。结论日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶DNA疫苗可诱导抗血吸虫卵胚发育或抗生殖作用,具有潜在的疫苗研究与开发价值。
- 余俊龙汪世平何卓戴橄徐绍锐刘雪琴
- 关键词：日本血吸虫DNA疫苗
- 日本血吸虫单性感染雄虫和双性感染雄虫差异表达蛋白的筛选与鉴定被引量：11
- 2007年
- 采用双向凝胶电泳和质谱技术对日本血吸虫单性感染雄虫和双性感染雄虫蛋白质表达谱进行分析,并在mRNA水平进行验证;观察差异表达SJCHGC蛋白重组真核表达质粒pEGFP-C1/SJCHGC在COS-7细胞中的表达和亚细胞定位,并分析其表达产物的抗原性.成功鉴定了9个日本血吸虫雌雄合抱差异表达蛋白,其中在日本血吸虫雄虫合抱前表达上调的蛋白质有6个;而有3个蛋白质在日本血吸虫雄虫合抱后表达明显上调.大多数差异蛋白功能涉及血吸虫的生长发育、生殖、营养、运动、信号传递等过程.重组质粒pEGFP-C1/SJCHGC融合基因真核表达载体在真核细胞COS-7中获得了表达,可用荧光显微镜直接观察其表达情况及亚细胞定位,细胞所表达的融合蛋白具有血吸虫抗原性.研究结果为揭示日本血吸虫雌雄合抱机制、研制抗血吸虫雌雄合抱疫苗提供了理论依据.
- 戴橄汪世平余俊龙徐绍锐彭先楚刘雪琴周松华刘芬
- 关键词：日本血吸虫COS-7细胞
- 日本血吸虫SIEA66-68kDa抗原的分离、纯化及免疫保护性研究
- 2011年
- 目的研究日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原66-68kDa(SIEA66-68kDa)的动物免疫保护力,并对其作为天然分子疫苗的可行性进行评估。方法采用电泳切胶、电洗脱、超滤离心等技术,分离纯化SIEA66-68kDa天然分子抗原,免疫小鼠,待其产生抗体后进行尾蚴攻击感染(40尾/只),计算减虫率和减卵率。结果 SIEA66-68kDa天然蛋白质分子能刺激机体产生抗日本血吸虫的作用,其减虫率为41.70%,每克肝脏减卵率为51.23%,雌虫子宫减卵率为29.30%,每克大肠减卵率为59.26%,每克粪便减卵率为45.17%,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SIEA66-68kDa天然分子抗原具有刺激小鼠产生较好的抗日本血吸虫感染的免疫保护作用,可作为抗日本血吸虫感染候选分子疫苗的靶标。
- 姜孝新汪世平刘雪琴李庆华刘明社何卓彭先楚徐绍锐
- 关键词：日本血吸虫疫苗
- 抗日本血吸虫病天然分子疫苗免疫猪血清筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库结果分析被引量：4
- 2006年
- 目的通过天然分子疫苗免疫猪血清作为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,应用表达序列标签获得日本血吸虫新基因。方法制备天然分子免疫猪血清,将筛选的尾蚴cDNA文库中大肠杆菌XL1-Blue侵入大肠杆菌BM25.8后环化成质粒,筛选出已转入质粒的菌株。提取质粒DNA,进行测序,得到一个表达序列标签(EST)。通过NCBI网站的BLASTx及BLASTn公共数据库,编辑分析EST序列并进行同源性比较。结果从26个克隆样品中筛选出8个阳性克隆,其中有一个新基因(GenBank登录号DQ097517),该基因全长861bp,有完整的阅读框架,与蜜蜂(Apismellifera)SMC3蛋白编码的mRNA基因序列同源性最高。结论疫苗免疫猪血清可作为筛选日本血吸虫新基因的有效探针,新发现1个日本血吸虫相关基因。
- 曾少华吕志跃汪世平张加祥陈晓光周松华刘雪琴李文凯姜孝新肖小芹徐绍锐彭先楚
- 关键词：日本血吸虫表达序列标签
- 日本血吸虫SJCWL06基因编码蛋白结构与功能的生物信息分析被引量：7
- 2006年
- 目的分析和预测日本血吸虫SJCWL06基因编码蛋白的结构与功能。方法利用国际互联网中生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI)等的相关信息,分析与预测该编码蛋白一、二、三级结构与功能。结果该基因长861bp,有一个完整的327bp的开放读框,编码109个氨基酸,其编码蛋白有一个信号肽,多个磷酸化位点和一个ABC-三磷酸腺苷酶的结构域,与蜜蜂(Apis mel-lifera)SMC3编码的mRNA基因序列同源性最高(84%)。结论SJCWL06基因编码蛋白具有进一步研究的潜在价值。
- 曾少华汪世平张加祥吕志跃周松华刘雪琴徐绍锐姜孝新彭先楚李文凯
- 关键词：日本血吸虫生物信息学基因
