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卞爱琳
作品数:
2
被引量:6
H指数:1
供职机构:
北京协和医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
张华
北京协和医院
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北京协和医院
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北京协和医院
张文宝
北京协和医院
陈钢炜
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2006
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大鼠Tenon’s囊成纤维细胞体外培养及生长特性的研究
2006年
目的 探讨建立体外大鼠Tenon’s囊成纤维细胞的培养方法,并对体外培养的Tenon’s囊成纤维细胞的生长特性进行观察。方法 选用健康年幼的SD大鼠40只,采用断颈法将其处死,摘除眼球,无菌条件下,分离剪下Tenon’s囊组织,采用植块法对Tenon’s囊成纤维细胞进行体外培养;通过细胞形态学观察和细胞免疫组化染色技术对其细胞性质进行鉴定;通过细胞记数和MTT法对其生长特性进行研究。结果 原代培养的大鼠Tenon’s囊组织块接种后,约48h即可见细胞由组织块中爬出,培养8~10d,细胞汇合程度大约可达70%左右;培养14~16d,细胞完全汇合;在细胞汇合程度达到70%-80%时,可以进行细胞传代,传代细胞接种后4—5h大部分细胞贴壁,10-12d左右传代细胞完全汇合。光镜下观察,可见Tenon’s囊成纤维细胞,在汇合程度低时细胞呈细长梭形外观,汇合程度高时细胞可呈多边形改变。免疫组化染色可见Tenon’s囊成纤维细胞角蛋白染色阴性,波蛋白染色阳性。细胞生长曲线显示,在2—8d细胞处于对数生长期。结论 体外成功地培养了大鼠Tenon’S囊成纤维细胞,这不仅为青光眼滤过泡瘢痕化防治的基础研究提供了一种新的细胞来源,同时为抗结膜瘢痕化药物的研究和开发提供了一种新的简便实用的细胞来源途径。
马建民
赵家良
陈钢炜
卞爱琳
张华
关键词:
细胞培养
细胞生长曲线
大鼠结膜囊成纤维细胞TGFβ_2特异性siRNA的筛选及其载体构建的研究
被引量:6
2006年
目的筛选结膜囊成纤维细胞转化生长因子β2(TGFβ2)特异性siRNAs,并构建其载体。方法采用体外转录法合成4个TGFβ2siRNAs(L1、L2、L3、L4),分别转染体外培养的大鼠Tenon’s囊成纤维细胞,以未转染细胞作为对照,转染后48h采用RT-PCR技术检测所合成的siRNAs对TGFβ2mRNA表达的干扰作用;在此基础上,再构建有干扰作用siRNA的载体。结果与对照组相比,转染48h后,仅L4能够使大鼠Tenon’s囊成纤维细胞TGFβ2的mRNA表达水平明显下调,其余3条TGFβ2siRNAs未产生明显的干扰效果。经过测序检测证明成功构建了有干扰效果TGFβ2siRNA的载体。结论不同的TGFβ2siRNA对大鼠Tenon’s囊成纤维细胞TGFβ2mRNA表达具有不同的干扰效能;能够构建出有干扰效能的TGFβsiRNA特异性载体。
马建民
赵家良
卞爱琳
程钢炜
张文宝
张华
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