周卫军
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：暨南大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省海洋渔业科技推广专项项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 南方水牛奶酪蛋白及大豆蛋白肽指纹图谱的差异性被引量：5
- 2014年
- 通过LTQ Orbitrap XL组合型傅里叶变换高分辨质谱与反相高效液相色谱技术联用建立了南方水牛奶酪蛋白和大豆蛋白主要组分肽质指纹图谱，并对其氨基酸组成与序列进行了比较．结果表明：酪蛋白经胰蛋白酶酶解后得到的28个肽段中没有检测到与酶解大豆分离蛋白181个肽段相匹配的肽段；酪蛋白（CN）的主要组分是仅αs1-CN、β-CN、κ-CN，大豆蛋白的主要组分为大豆球蛋白（包括大豆球蛋白Gl～G5亚基）和／3伴大豆球蛋白（α，α′，β 链）；水牛奶酪蛋白和大豆蛋白在亚基组分的氨基酸数量、组成比例和排列方式均呈现出明显的差异，大豆蛋白的各组分亚基的氨基酸全序列均大于酪蛋白各组分的氨基酸全序列，且大豆蛋白各组分的分子质量均显著高于酪蛋白各组分．LTQOr-bitrap XL质谱技术对乳源蛋白肽质指纹的分析，为今后鉴定分析牛奶蛋白中是否添加廉价蛋白提供了高精度和高准确度的检测方法，也为复杂混合物中的痕量组分检测提供了理论依据．
- 徐明芳戴金凤向明霞成希飞曾晓琮万丛庆周卫军
- 关键词：大豆蛋白ORBITRAP肽指纹图谱氨基酸序列
- 基于LTQ-Orbitrap液相色谱-质谱联用技术的乳源乳清蛋白组分的差异性研究被引量：5
- 2014年
- 利用LTQ Orbitrap XL组合型傅立叶变换高分辨质谱系统分析了乳源蛋白主要组分肽指纹图谱。对南方水牛乳与不同来源的乳清蛋白的氨基酸序列研究结果表明,乳清蛋白经酶解后主要为α-乳白蛋白(α-La)和β-乳球蛋白(β-Lg)组分,乳清蛋白肽质指纹谱的分析显示水牛乳与荷斯坦奶乳清蛋白α-La氨基酸发生变异的比率明显少于山羊奶乳清蛋白α-La,说明荷斯坦奶α-La和水牛乳α-La的差异更小,同源性更强;而水牛乳β-Lg与荷斯坦乳β-Lg氨基酸发生变异的部位比率要多于山羊奶,水牛乳β-Lg与山羊奶同源性更强;乳源酪蛋白酶解后的肽段主要组分为αs1-CN,β-CN,κ-N,通过对水牛乳酪蛋白的氨基酸序列的差异性分析,不同品种的乳源酪蛋白的氨基酸序列明显存在差异。与乳清蛋白相比,奶牛品种差异导致乳蛋白发生氨基酸差异现象更显著,酪蛋白的氨基酸序列对比表明,水牛奶酪蛋白与山羊奶酪蛋白比与乳牛酪蛋白的差异更大。
- 徐明芳戴金凤向明霞成希飞曾晓琮万丛庆周卫军
- 关键词：酪蛋白乳清蛋白
- 鲢抗菌肽Hepcidin的基因克隆和表达及抑菌活性分析被引量：1
- 2014年
- 利用同源克隆的方法从鲢(Hypophthalmichthys molitrix)的肝脏中克隆出抗菌肽Hepcidin cDNA(GenBank登入号KF312213)后,通过pET32a(+)构建含抗菌肽Hepcidin的重组质粒的pET-Hep/Rosetta菌株,在37℃、28℃和16℃下分别用0.5 mmol·L-1和1.0 mmol·L-1IPTG诱导表达,产物用Ni SepharoseTM亲和层析柱纯化并进行体外抑菌试验。鲢Hepcidin cDNA总长度755 bp,ORF为282 bp,5'UTR为108 bp,3'UTR为365 bp,编码93氨基酸,信号肽24个氨基酸,前域42个氨基酸和成熟肽27个氨基酸。pET-Hep/Rosetta在28℃和16℃主要是可溶性表达,37℃主要是包涵体表达。纯化的产物经15%SDS-PAGE电泳验证为目的产物。目的产物、pET32/Rosetta产物以及氟苯尼考的体外抑菌试验表明,目的表达产物对无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)等具有很好的抑菌效果。
- 周卫军刘振兴柯浩马艳平郝乐徐明芳
- 关键词：基因克隆原核表达抑菌效果
