周智锋
- 作品数：56 被引量：195H指数：9
- 供职机构：福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金福建省科技计划重点项目福建省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 原发性肝癌免疫治疗现状及展望被引量：5
- 2011年
- 免疫治疗已成为继手术、放疗、化疗之后的第四种肿瘤治疗手段,在肝癌的综合治疗方案中,免疫治疗在提高肿瘤治愈率,改善患者生活质量,延长生存期方面起重要作用,显示良好应用前景。文章对肝癌的免疫治疗现状及发展作一论述。
- 叶韵斌周智锋
- 关键词：免疫治疗LAK细胞CIK细胞DC细胞DC-CIK细胞NK细胞
- 应用CliniMACS细胞分选系统纯化自体外周血干细胞的探讨被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨应用CliniMACS细胞分选系统纯化自体外周血干细胞的效果。方法 4例非霍奇金淋巴瘤患者,经Vp-16+G-CSF动员后,采集外周血中造血干细胞,并用CliniMACS细胞分选系统作干细胞纯化分选,3例患者作2次采集后行1次分选,1例患者经3次采集后作2次分选。通过单个核细胞计数及流式细胞术测定CD34+细胞,分析纯化效果。结果 4例患者进行7例次干细胞采集,循环量6000～8 000ml,采集前体内CD34+细胞数为每千克体重(12.77±11.21)×106,经采集得到CD34+细胞数为每千克体重(4.70±4.17)×106,CD34+细胞采集效率为(40.91±33.35)％,对5例次磁珠分选结果,标记前CD34+细胞数为每千克体重(6.07±3.18)×106,分选后获得的CD34+细胞数为每千克体重(4.03±2.28)×106,CD34+细胞回收率为(64.19±13.35)％。终产物细胞悬液量为40～45 ml,CD34+细胞纯度为(83.18±6.76)％。结论 应用CliniMACS细胞分选系统获得纯化的自体造血干细胞,可应用于支持大剂量化疗治疗实体肿瘤。
- 叶韵斌陈强周智锋陈明水李洁羽
- 关键词：纯化自体外周血干细胞非霍奇金淋巴瘤流式细胞术
- 体外扩增对食管癌患者NK细胞表面受体表达及其抑瘤活性的影响被引量：4
- 2013年
- 目的:探讨食管癌患者NK细胞扩增前后的受体表达及其对肿瘤细胞的杀伤。方法:收集福建省肿瘤医院食管癌患者外周血20例,健康供者(对照组)外周血10例。NK细胞培养采用细胞因子(IL-2+IL-12+IL-15+IL-18)组合,流式细胞术检测NK细胞免疫表型及其受体(CD56+、CD69+、NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46、CD158b、CD159a)的表达,LDH法检测不同效靶比时NK细胞对多种肿瘤细胞株(K562、Raji、Eca-109、TE-1)的杀伤作用。结果:与对照组相比,食管癌患者外周血CD3+、CD4+细胞比例以及CD4+/CD8+T细胞比值明显降低(P<0.05),NK细胞(CD3-CD56+)及调节性T细胞(Treg)比例明显升高(P<0.05)。经细胞因子IL-2+IL-12+IL-15+IL-18组合定向扩增20 d后,食管癌患者NK细胞比例高达90%以上,NK细胞数扩增达1 000倍以上(P<0.01);而CD3+T细胞、CD4+、CD8+T细胞、CD19+B细胞、Treg细胞及单核巨噬细胞(CD14+)比例均显著降低(P<0.01),且食管癌患者与对照组之间无统计学差异(P>0.05)。经细胞因子体外培养20 d后,NK细胞表面CD69及活化性受体(NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46)均明显上调,而抑制性受体(CD158b、CD159a)均明显下调(P<0.05)。培养20 d后,食管癌患者NK细胞对肿瘤细胞K562、Raji、Eca-109、TE-1的杀伤能力均显著高于培养前[(69.2±5.1)%vs(42.3±3.0)%,(44.6±3.2)%vs(21.1±2.0)%,(69.7±3.9)%vs(50.3±3.5)%,(67.1±4.5)%vs(41.2±3.3)%;均P<0.01]。结论:细胞因子IL-2+IL-12+IL-15+IL-18组合能有效扩增外周血NK细胞并上调其活并性受体的表达、下调抑制性受体的表达,其数量及功能均能满足临床治疗需要。
- 周智锋柳硕岩郑庆丰李洁羽王枫叶韵斌
- 关键词：NK细胞活化性受体抑制性受体
- MICA表达预测非小细胞肺癌术后化疗联合NK细胞输注治疗的疗效被引量：5
- 2017年
- 目的探讨MHC-Ⅰ类相关分子A(MHC classⅠ-related molecules A,MICA)表达是否能预测非小细胞肺癌术后化疗联合NK细胞输注治疗的疗效。方法流式细胞仪检测92例非小细胞肺癌组织MICA表达。非小细胞肺癌患者手术后,单纯化疗41例(多西他赛+顺铂方案)、化疗联合NK细胞治疗51例,单因素与多因素比较临床因素与生存期关系。结果非小细胞肺癌组织46.74%MICA阴性表达,53.26%MICA阳性表达,NK细胞培养14~17 d后NKG2D高达(97.8%±2.5)%,明显高于培养前(88.2%±7.2)%(P<0.05)。MICA是否表达与NKG2D高低无关(P=0.189)。非小细胞肺癌患者术后Ⅱ期患者的3年及5年的生存率分别为70.8%及47.9%,ⅢA期患者的3年及5年的生存率分别为54.5%及22.7%,中位生存期在是否联合NK治疗(P=0.037)及临床分期(TNM)(P=0.009)存在差异,而患者在年龄(P=0.999)、性别(P=0.412)、病理类型(P=0.782)及MICA表达(P=0.172)均无差异。多因素分析显示,中位生存期在是否联合NK治疗(P=0.044)、临床分期(TNM)(P=0.002)及NK与MICA交叉分析(P=0.002)存在差异。结论 MICA在非小细胞肺癌患者术后化疗联合NK细胞免疫治疗中起重要作用,MICA表达可作为NK细胞免疫治疗的预后因素。
- 周智锋李洁羽林万松陈淑萍王玲叶韵斌郑庆丰
- 关键词：非小细胞肺癌MICA自然杀伤细胞
- 可溶性MICA在乳腺癌免疫逃逸中的作用被引量：11
- 2008年
- 目的:观察乳腺癌患者血清中可溶性MICA(sMI-CA)表达情况,探讨sMICA在乳腺癌免疫逃逸中的作用。方法:ELISA方法检测乳腺肿瘤患者外周血sMICA的分泌。流式细胞术(FCM)检测sMICA及白细胞介素15(IL-15)对NK细胞表面NKG2D表达的影响。MTT法检测NK细胞对乳腺癌细胞的杀伤活性。结果:ELISA结果显示,血清sMICA含量在健康成年人血清中为阴性,在乳腺良性肿瘤患者血清中含量为(76.8±22.3)ng/L,在恶性肿瘤患者血清中含量为(205.36±71.27)ng/L,乳腺癌患者中血清sMICA含量高低与TNM分期呈正相关。应用含sMICA的血清与NK细胞共培养可明显下调NK细胞的杀瘤活性[(76.2±6.7)%vs(48.4±4.1)%],NK细胞表面NKG2D表达和上清中IFN-γ分泌量也下降。IL-15明显上调NK细胞表面NKG2D表达,增加培养上清IFN-γ分泌量和增强NK对MCF-7的杀瘤活性。结论:sMICA表达与乳腺癌TNM分期正相关,sMICA通过下调NK细胞NKG2D表达水平而降低NK细胞杀瘤活性,在肿瘤免疫逃逸中起重要作用。IL-15可以上调NK细胞NKG2D的表达并增强NK细胞杀瘤活性。
- 叶韵斌周智锋陈强李洁羽陈夏黄伟炜
- 关键词：自然杀伤细胞乳腺肿瘤MICANK细胞受体
- MDR相关蛋白在口腔鳞癌的表达及其临床意义被引量：4
- 2003年
- 目的 检测口腔鳞癌患者化疗前后P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药相关蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)、拓朴异构酶Ⅱα(TopoⅡα)的蛋白质表达,分析其与临床病理参数及化疗敏感性的关系。方法 采用流式细胞术的方法,对34例口腔鳞癌患者术前诱导化疗前后P-gp,LRP,MRP,TopoⅡα的蛋白质表达进行测定。化疗方案为平阳霉素16mg/m2,第1-10天。结果 ①口腔鳞癌临床化疗有效率为20.6％,其中CR 1例、PR 6例、NC 26例、PD 1例。多因素分析结果表明P-gp的表达水平与口腔鳞癌对平阳霉素化疗的敏感性呈负相关(P=0.041),而LRP,MRP,TopoⅡα的蛋白质表达均与化疗反应无明显的相关性;同时单因素分析发现化疗有效者的P-gp表达水平明显低于无效者(P<0.05),而LRP、MRP及TopoⅡα蛋白质表达在二者并无显著差异;②在口腔鳞癌组织中,同时存在多种MDR相关蛋白超表达的现象,其中P-gp平均表达率为27.7％±30.2％,LRP为41.1％±17.9％,MRF为43.9％±16.1％;癌组织的MDR相关蛋白表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05),同时,它们在化疗前后的表达水平并无显著差异,表明口腔鳞癌的多药耐药性与内在性耐药有关;③P-gp的表达水平与肿瘤细胞的分化程度呈正相关(P<0.05),分化越好,表达水平也越高(P<0.05),但与临床分期、淋巴结转移无关;而LRP、MRP?
- 钟清木叶韵斌张其忠陈强李洁羽周智锋
- 关键词：多药耐药性流式细胞术
- NKG2D配体预测肿瘤细胞免疫治疗疗效的临床实践
- <正>自然杀伤细胞(NK细胞)是体内抗肿瘤免疫的第一道防线。NK细胞表面有许多受体包括抑制性受体(KIR)和活化性受体(KAR),其中NKG2D是一重要的活化性受体。通过与肿瘤细胞表面的NKG2D配体MICA、MICB、...
- 叶韵斌周智锋陈誉柳硕岩李洁羽郑庆丰陈淑萍郭增清黄传钟林万松
- 文献传递
- 外周血干细胞移植治疗实体体瘤的研究
- 陈强叶韵斌刘健陈明水郑天荣张其忠毛雪华杨建伟郑泓宇范南峰蔡雄超黄伟炜李洁羽周智锋
- 如何解除肿瘤病人大剂量化疗所致的造血－免疫功能的损伤，是临床研究的一大课题。该研究采用自体外周血干细胞移植术以迅速恢复大剂量化疗后病人的造血－免疫功能。自1995年迄今该院已对恶性淋巴瘤、精原细胞瘤、骨滑膜肉瘤、乳腺癌、...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤外周血干细胞移植
- T-exo负载DC诱导抗肝癌细胞免疫效应研究被引量：3
- 2016年
- 目的：观察肝癌细胞来源的外泌体（T-exo）负载DC体外诱导细胞毒T细胞（CTL）对肝癌细胞的杀伤作用。方法：采用超滤离心技术联合蔗糖密度梯度超速离心的方法从肝癌Huh-7细胞培养上清液中分离外泌体（T-exo）,透射电镜鉴定形态,Western blot检测外泌体相关蛋白CD9、CD63、HSP70及肿瘤抗原分子AFP的表达;分离健康供者外周血单个核细胞（PBMC）培养DC,流式细胞术鉴定负载T-exo的DC细胞表型;用2-（4-碘苯）-3-（4硝基苯）-5-（2,4-磺苯基四氮唑）-2H-四唑单钠盐-1（WST-1）法检测负载T-exo的DC刺激T淋巴细胞增殖情况;流式细胞术Annexin-V/PI双染法检测负载T-exo的DC诱导CTL分别对AFP阳性Huh-7细胞及AFP阴性的SMMC7721细胞的杀伤作用。结果：透射电镜下可见T-exo为圆形或椭圆形双层膜囊泡状小体,大小不等,平均直径50～100 nm,表达外泌体膜相关分子及肿瘤抗原分子。负载T-exo的DC可促进初始T细胞增殖,T-exo致敏DC对AFP阳性的Huh-7肝癌细胞系杀伤活性明显高于AFP阴性的SMMC7721肝癌细胞组（P〈0.05）及未负载T-exo的对照组DC（P〈0.05）。结论：负载T-exo的DC能促进T细胞增殖,提高CTL细胞的细胞毒活性诱导特异性的抗肝癌效应。经T-exo抗原致敏DC诱导的CTL对肝癌细胞有明显的细胞毒作用,明显高于DC对照组（P〈0.05）。
- 李洁羽陈明水陈淑萍周智锋王玲叶韵斌
- 关键词：树突状细胞外泌体肝癌细胞毒T细胞
- 食管癌中MICA的表达及其意义被引量：5
- 2013年
- 目的:观察食管癌细胞株组织膜MHCⅠ链相关分子A(MHC class Ⅰ chain-related gene A,MICA)及血清中可溶性MICA表达,探讨食管癌中MICA的表达及其临床意义。方法:流式细胞术检测膜型MICA(mMICA)及NK细胞表面NKG2D表达,ELISA方法检测乳腺肿瘤患者外周血可溶性MICA(sMICA)的分泌。分组实验分析可溶性MICA(sMICA)对NKG2D表达的影响。结果:食管细胞膜型MICA在食管癌旁组织无表达,在31.7%食管癌组织有表达,表达量为(42.2±3.6)%。可溶性MICA含量在健康成年者为阴性,食管癌患者中74.67%阳性,含量为(1977.30±292.67)ng/L。食管癌患者中血清sMICA含量高低与TNM分期呈正相关,远处转移组比无远处转移组高(P<0.05),但和病理类型表达无差异。含可溶性M!CA的血清可明显下调NK细胞NKG2D的表达,从而降低NK细胞对食管癌细胞株ECA-109的杀伤活性。结论:食管癌细胞膜表达MICA,可作为食管肿瘤相关性抗原。而可溶性MICA含量高低与TNM分期呈正相关,可通过下调NK细胞NKG2D表达介导肿瘤免疫逃逸。
- 柳硕岩周智锋郑庆丰李洁羽王枫叶韵斌
- 关键词：自然杀伤细胞食管癌MICANK细胞受体
