夏仪
- 作品数:7 被引量:11H指数:2
- 供职机构:第二军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市公共卫生重点学科建设项目上海市“科技创新行动计划”更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 大鼠腔前卵泡体外三维培养系统的建立及其在雌性生殖毒性研究中的应用
- 目前雌性生殖毒性评价方法主要采用整体动物试验,存在的主要问题是所需动物数多,不符合3R原则;实验周期长、所需受试样品量多,难以满足化学品快速发展的需求;所提供的毒作用机制等信息有限,不足以提供安全性和危险度评定的需求,也...
- 夏仪
- 关键词:腔前卵泡海藻酸钠卵母细胞成熟
- 文献传递
- 体外卵泡三维培养系统的研究现状被引量:2
- 2012年
- 卵泡体外培养方法是将早期卵泡不成熟卵母细胞(GV期或GV前期)在体外发育到可正常受精的成熟卵母细胞(MII)的方法。由于该方法能对卵巢的主要功能即卵泡发育、激素生成和卵子发生进行动态观察,可在卵泡不同发育阶段对卵泡每一组分进行分析,对卵泡发育,卵子发生和激素调控等生殖生物学机制和生殖毒作用机制进行深入研究,因而成为一项新的前沿技术,受到生殖生物学、临床医学和生殖毒理学等领域的关注。在过去10年当中,卵泡的体外二维培养方法得到了很大的发展,已基本建立绵羊、猪、小鼠和大鼠等体外卵泡培养方法。然而体内所有的细胞都处于一个三维的状态,这个三维的环境对于细胞的生长和分化都是非常关键的,在二维的状态下破坏了卵泡原本的三维结构,与卵泡在体内的实际生长环境不符。为了更好地模拟体内的三维环境,近年来发展了多种培养系统。本文拟对体外卵泡三维培养系统、相关生物材料及各个系统的优缺点等作一简要的综述。卵泡的三维培养方法根据目前文献报道,可大致分为原位培养、微流体培养、凝胶培养和非凝胶培养系统4类。1原位培养方法卵泡的原位培养是指将卵巢组织小块从卵巢皮质中分离出来在体外培养的一种方法。但卵巢组织小块的体外培养作为一项技术运用于原位三维卵泡成熟并不是很有效。Abir等。报道在这种培养模式下卵泡不能顺利的跨过腔前阶段进入有腔阶段,在体外要获得成熟的卵泡必须将卵泡从卵巢皮质中剥离出来。
- 夏仪张天宝
- 关键词:卵泡生物材料动物模型
- 双酚A对大鼠卵泡体外生长和卵母细胞成熟的影响
- 目的观察双酚A(BPA)对大鼠卵泡体外生长发育及卵母细胞成熟的影响。方法采用大鼠卵泡体外长期培养方法,从12~14 d龄的雌性大鼠卵巢中机械性分离腔前卵泡(140~170μm),隔天分别换一半含BPA 0,50,100和...
- 夏仪王卓张天宝
- 关键词:双酚A生殖毒性卵泡体外培养
- 文献传递
- 双酚A对大鼠卵泡体外生长和卵母细胞成熟的影响
- 目的观察双酚A(BPA)对大鼠卵泡体外生长发育及卵母细胞成熟的影响。方法采用大鼠卵泡体外长期培养方法,从12~14 d龄的雌性大鼠卵巢中机械性分离腔前卵泡(140~170μm),隔天分别换一半含BPA 0,50,100和...
- 夏仪王卓张天宝
- 关键词:双酚A生殖毒性卵泡体外培养
- Establishment of in-vitro three dimensional rat follicle culture system and validation of the applicability as an in vitro female reproductive toxicity testing system
- Recent increasing restrictions on animals have persuaded researchers to seek in vitro alternatives that could ...
- 张晓芳夏仪田逸君朱江波张天宝
- 关键词:BPA
- 文献传递
- 双酚A对大鼠卵泡体外生长和卵母细胞成熟的影响被引量:6
- 2013年
- 目的观察双酚A(BPA)对大鼠卵泡体外生长发育及卵母细胞成熟的影响。方法采用大鼠卵泡体外长期培养方法,从12~14d龄的雌性大鼠卵巢中机械性分离腔前卵泡(140~170μm),隔天分别换一半含BPA 0,50,100和150μmol·L-1的培养液,连续培养10d。倒置相差显微镜下观察卵泡发育的形态,计算卵泡存活率、有腔卵泡形成率和卵丘-卵母细胞复合体(COC)排出率,测定卵泡直径,显微镜下观察卵泡的排卵情况以及卵母细胞成熟情况,计算生发泡(GV)、生发泡破裂(GVBD)和第一极体(PB)的形成率;分别于培养2,6和10d时采用磁性酶联免疫法测定培养基中雌二醇和孕酮的分泌量。结果正常对照组卵泡在10d培养过程中,大多数正常对照组卵泡都经历了腔前卵泡、有腔卵泡以及成熟卵泡阶段。与正常对照组相比,BPA 100和150μmol·L-1组的卵泡存活率、有腔卵泡形成率、COC排出率、GVBD率以及PB率均明显降低(P<0.05)。BPA 50μmol·L-1组培养10d时的卵泡直径以及培养6和10d时BPA100和150μmol·L-1组卵泡和卵母细胞的直径均明显降低(P<0.05);与正常对照组相比,BPA 100和150μmol·L-1组卵泡膜细胞和颗粒细胞的增殖受到明显抑制(P<0.05)。与正常对照组相比,BPA 100和150μmol·L-1组在培养6和10d时雌二醇和孕酮含量均显著减少(P<0.01)。结论 BPA 100和150μmol·L-1可抑制大鼠卵泡的生长和卵母细胞的成熟。
- 夏仪王卓张天宝
- 关键词:双酚A生殖毒性卵泡体外培养
- 兔着床后全胚胎培养方法的建立被引量:2
- 2012年
- 目的:建立用于发育毒物研究和评价的兔着床后全胚胎培养方法。方法:取怀孕第9天(gestation day 9,GD9)的孕兔胚胎,参照Carney和Naya的方法,剥离胚胎后单瓶培养,体外培养48 h后将发育情况与文献报道的结果进行对比;并用5.0mmol/L的甲氧基乙酸(methoxyacetic acid,MAA)作为致畸阳性物对所建立的培养方法作进一步验证,采用Carney建立的兔胚胎形态评分系统进行评分。结果:本研究中23个GD9兔胚胎体外培养48 h后,存活率为100%,头长平均增长2.15倍,卵黄囊闭合和胚胎弯曲情况、体节数、自发畸形率、形态评分均数等指标均与文献报道的体外培养发育情况相近,5.0 mmol/L的MAA显示对兔胚胎有发育毒性,包括卵黄囊闭合减少、头部肿胀、面部器官缺失、体节紊乱、尾神经管闭合不全等,形态评分低于溶剂对照(P<0.05)。结论:本研究所建立的兔着床后全胚胎培养方法是可行的。
- 王卓夏仪朱江波朱玉平张天宝
- 关键词:体外全胚胎培养发育毒性