妙亮
- 作品数：8 被引量：4H指数：1
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- 相关领域：生物学化学工程理学医药卫生更多>>
- 一种高活性可溶型血管生长抑制剂Kringle 5三聚体的高效表达方法
- 一种高活性可溶型血管生长抑制剂Kringle 5三聚体的高效表达方法，方法包括：1)制备Kringle 5基因的上、下游引物、pET15b质粒DNA以及感受态细胞BL21(DE3)plys；2)对Kringle 5基因进...
- 边六交妙亮
- 基因重组血管生长抑制因子Kringle5的克隆、表达、纯化及活性研究
- 血管生长抑制因子kringle 5 (K5)是目前发现的一种能够抑制血管内皮细胞增殖和肿瘤生长的人纤溶酶原片段,特异性高、毒副作用小,在肿瘤的治疗方面具有潜在的应用价值。本实验在前期成功表达融合型血管生长抑制因子K5的基...
- 妙亮
- 关键词：克隆纯化活性
- 文献传递
- β2-肾上腺素受体芯片模型用于高通量快速筛选中药活性成分
- 目的：以β2-肾上腺素受体作为实验受体蛋白构建受体芯片模型，筛选中药活性成分。方法：将牛血清蛋白键合于经过醛基化处理的玻片上，在牛血清蛋白的表面连接上活性醛基基团，采用亲和色谱法提取β2-肾上腺素受体并将其键合到玻片表面...
- 段美娇妙亮边六交
- 关键词：高效液相色谱
- 可溶型非融合血管生长抑制因子Kringle 5基因工程菌发酵培养和诱导表达条件的优化被引量：1
- 2012年
- 在实验室试管培养条件下优化了基因工程菌E.coli BL21(DE3)pET15b/K5发酵产可溶型非融合血管生长抑制因子Kringle 5的培养基和诱导表达条件。经菌体干重测定和SDS-PAGE检测,确定最佳培养基(g.L-1)为:胰蛋白胨10.0,酵母提取物5.0,NaCl 10.0,葡萄糖6.0,NH4Cl 2.6,NaH2PO45.0,Na2HPO46.0;优化的诱导表达条件为:诱导剂浓度0.01mmol.L-1,诱导时间6h,诱导温度37℃,摇床转速220r.min-1。在优化的培养基和诱导表达条件下,菌体干重为1.8g.L-1,Kringle 5表达量为360mg.L-1,占总蛋白含量的20%,与基础LB培养基相比,Krin-gle 5表达量提高了1.18倍。
- 马晓娟蔚萍妙亮边六交
- 关键词：发酵培养基基因工程菌
- 基因重组血管生长抑制因子Kringle 5的分离纯化
- ：建立了一种用SP Sepharose F.F.离子交换色谱分离纯化目的蛋白Kringle 5的方法。 方法：在成功克隆表达Kringle 5的基础上用SP SepharoseF.F.离子交换色谱分离纯化目的蛋白...
- 妙亮徐立华边六交
- 关键词：基因重组血管生长抑制因子KRINGLE分离纯化离子交换色谱
- 可溶型三聚体血管生长抑制因子Kringle 5的克隆,表达,纯化及活性研究被引量：3
- 2011年
- 血管生长抑制因子Kringle 5是目前发现的抑制血管内皮细胞增殖和肿瘤生长的活性最强的纤溶酶原片段,特异性高而毒副作用小,在肿瘤的治疗方面具有潜在的巨大价值和广阔的应用前景。根据K5基因的序列设计PCR引物,通过PCR从已有的克隆载体扩增出人纤维蛋白溶酶原的K5部分基因,将K5基因克隆入原核表达载体pET15b,经序列测定,成功构建了pET15b-K5非融合表达载体。将重组载体导入大肠杆菌中IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白主要以可溶形式存在于菌体中,破碎后上清通过阳离子交换层析,纯化获得纯度大于95%的目标蛋白,脱盐后对分子量测定推测形成了三聚体。通过鸡胚绒毛尿囊膜法证明蛋白产物对鸡胚绒毛尿囊膜血管增生有一定的抑制作用。
- 妙亮徐立华冀胥边六交
- 关键词：KRINGLE克隆
- β2-肾上腺素受体芯片模型用于高通量快速筛选中药活性成分
- 目的:以β2-肾上腺素受体作为实验受体蛋白构建受体芯片模型,筛选中药活性成分。方法:将牛血清蛋白键合于经过醛基化处理的玻片上,在牛血清蛋白的表面连接上活性醛基基团,采用亲和色谱法提取β2-肾上腺素受体并将其键合到玻片表面...
- 段美娇妙亮边六交
- 文献传递
- 一种高活性可溶型血管生长抑制剂Kringle5三聚体的高效表达方法
- 一种高活性可溶型血管生长抑制剂Kringle 5三聚体的高效表达方法，方法包括：1)制备Kringle 5基因的上、下游引物、pET15b质粒DNA以及感受态细胞BL21(DE3)plys；2)对Kringle 5基因进...
- 边六交妙亮
- 文献传递
