孟志刚
- 作品数:86 被引量:221H指数:7
- 供职机构:中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 转基因抗虫棉Bt基因与nptⅡ基因的遗传与表达被引量:3
- 2008年
- 采用花粉管通道法将含有Bt杀虫基因的pG4AB质粒导入受体棉花中23中,通过卡那霉素筛选,Bt免疫检测条检测,PCR扩增对转基因抗虫棉的各个自交世代进行跟踪研究。结果表明,具有卡那霉素抗性的单株能扩增出Bt基因,而且均有Bt杀虫蛋白表达。Bt基因与npt Ⅱ基因均整合进了棉花基因组中,相互之间紧密连锁遗传,均稳定表达,因此报告基因npt Ⅱ可用于研究Bt基因的遗传情况。
- 闫喜中张锐孟志刚孙国清周涛郭三堆
- 关键词:BT基因
- 与棉花雄蕊发育相关的体细胞胚发生受体类激酶
- <正>棉花是重要的战略经济作物,其经济价值主要通过其生殖器官的发育来体现,因此,利用分子生物学手段对棉花生殖器官发育进行研究,尤其是雄蕊的发育,对培育优质高产的棉花新品种,缓解土地资源紧张和棉花供不应求的矛盾以及促进我国...
- 石雅丽张锐孙国清孟志刚周焘郭三堆
- 关键词:棉花雄蕊发育雄性不育
- 文献传递
- 人乳铁蛋白基因与透明颤菌血红蛋白基因在毕赤酵母中表达的研究
- <正> 人乳铁蛋白(human Lactoferrin,hLf)是一种具有多种生物学功能的铁结合性糖蛋白,相对分子量为80KD左右。人乳铁蛋白广泛存在于人乳,泪液,唾液,汗液,胰液,胆汁等内外分泌系统中,其中人乳中含量最...
- 孟志刚张锐郭红媛孙国清崔鑫欣刘娜郭三堆
- 文献传递
- 异源表达irrE转基因烟草的耐盐耐旱性被引量:4
- 2017年
- 【目的】IrrE是从耐辐射异常球菌中发现的全局调控蛋白,主要通过修复强辐射等逆境条件下DNA损伤,提高耐辐射异常球菌对极端逆境环境的抗性。研究按植物密码子优化的irrE后导入烟草对转基因烟草耐逆能力的提高,为棉花等作物耐逆育种研究打下基础。【方法】按照植物密码子优化细菌irrE并合成基因;通过酶切连接法构建irrE植物表达载体;通过叶盘法转化烟草并PCR验证获得阳性转基因再生苗;通过实时荧光定量PCR(q RT-PCR)分析转基因株系中irrE的表达量;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IrrE编码蛋白;通过NaCl和甘露醇模拟盐处理和干旱处理分析纯和转基因株系的耐盐耐旱性,通过测定抗逆相关生理指标鉴定其对植物耐逆的贡献。【结果】按照植物密码子对irrE进行改造,共优化了241个密码子;构建了高效植物表达载体GBI-IE;利用除草剂草甘膦作为筛选剂获得转基因再生幼苗,并通过PCR验证共获得15个独立的转基因株系;通过q RT-PCR分析从中选取两个表达量最高的株系GO1和GO2进行后续的抗逆性分析;Western blot验证IrrE编码蛋白在GO1和GO2中能正确翻译。转基因烟草耐盐耐旱性分析:种子萌发试验表明,正常1/2 MS培养基上,转基因株系GO1和GO2发芽率和非转基因野生型对照之间没有明显的差异。然而250 mmol·L^(-1)NaCl培养基上GO1和GO2萌发率分别为78.8%和90.0%,野生型仅为10.3%,分别提高了68.5%和79.7%。类似地,300 mmol·L^(-1)甘露醇条件下,野生型的萌发率为39.7%,转基因株系GO1和GO2分别提高了42.9%和50.8%;正常萌发的种子移栽到250 mmol·L^(-1) NaCl和300 mmol·L^(-1)甘露醇条件12 d后,转基因株系根长、侧根数以及鲜重等生理指标显著高于野生型对照;温室中正常生长30 d的苗期烟草在250 mmol·L^(-1) NaCl处理下,转基因烟草SOD、CAT活性比野生型对照分别提高了48.80%和88.55%,而MDA含量比野生型对照�
- 赵雷霖范鑫聂星梁成真张锐孙国清孟志刚林敏王远郭三堆
- 关键词:密码子优化转基因烟草
- 一种控制叶片颜色的融合蛋白及其在植物转录因子与DNA互作研究上的应用
- 本发明公开了一种控制叶片颜色的融合蛋白,该融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;本发明还公开了用于鉴定转录因子与启动子DNA之间互作关系的报告系统,包括表达盒A和表达盒B;其中表达盒A包括植物强表达启动子、M...
- 梁成真周琪张锐孟志刚王远魏云晓郭三堆
- 陆地棉胞质雄性不育系与保持系线粒体SCAR分子标记
- 陆地棉胞质雄性不育(CMS)系P30A已应用于杂交棉制种的生产实践,但该不育系及其保持系的分子标记尚不丰富,有必要开发新的分子标记。在克隆棉花atpA基因时发现,P30A与其保持系P30B线粒体基因组中各存在两个atpA...
- 张晓张锐史计王远孙国清孟志刚周焘郭三堆
- 关键词:细胞质雄性不育保持系ATPASCAR
- 文献传递
- 一种能促进棉花侧根发育的sgRNA及其应用
- 本发明公开了一种能促进棉花侧根发育的sgRNA,该sgRNA的靶标序列分别由SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成,两个靶标序列也可结合在一起使用。本发明通过CRISPR/Cas9基因编辑系统...
- 张锐孟志刚郭三堆王艳玲梁成真朱涛王远
- 文献传递
- 抗虫三系杂交棉分子育种研究进展
- <正> 棉花是我国最重要的经济作物之一,在国民经济发展中占有重要地位。随着原油涨价和人类趋于消费天然产品,棉纺织品需求量正呈上升趋势,预计“十五”后皮棉年需求量将大幅增加。在粮棉争地矛盾日益突出,国家首先确保粮食安全的条...
- 郭三堆张锐王远孟志刚张金英
- 文献传递
- 一种花瓣紫斑蛋白及其编码基因
- 本发明公开了一种花瓣紫斑蛋白,该蛋白由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成;同时公开了由SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成的编码该蛋白的基因;本发明还公开了该蛋白及其编码基因在调控植物花瓣紫斑性状上的应用。...
- 梁成真穆罕默德·阿里·阿比德孟志刚王远张锐
- 文献传递
- 棉花品系Y18在草甘膦胁迫下的epsps基因表达分析研究被引量:8
- 2008年
- 5-烯醇丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合成酶(5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase,EPSPS)是植物或微生物体内合成芳香族氨基酸所必需的一个关键酶,但其受广谱性除草剂草甘膦的强烈抑制。通过对草甘膦胁迫下的棉花品系Y18进行研究发现:棉花品系Y18具有两个不同的5-烯醇丙酮酰-莽草酸-3-磷酸合成酶基因epsps1和epsps2,并且两个基因的编码区与其他植物的epsps基因具有较高的同源性,在草甘膦胁迫作用下,棉花的epsps1基因中表达较为稳定,epsps2基因表达量却提高了1.85~2.3倍,初步认为epsps基因的表达量提高是生物在受到胁迫作用时的一种应激反应。
- 刘东军张锐郭三堆孟志刚孙国清王成社张宏纪
- 关键词:EPSPS草甘膦