宁云山
- 作品数：73 被引量：173H指数：7
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 胶体金免疫层析技术及其在疟疾诊断中的应用被引量：9
- 2004年
- 免疫层析技术具有快速、简便、不需特殊仪器等特点 ,胶体金标记技术结果具有肉眼可观察的红色 ,为试剂盒法的检测提供了可能。把这两种技术结合起来 ,将是一种非常具有应用前景的免疫诊断技术。现就免疫层析技术和胶体金标记技术的基本原理及胶体金免疫层析技术在疟疾诊断中的应用作一综述。
- 李妍宁云山李明
- 关键词：色谱法胶体金疟疾
- 人血小板生成素基因cDNA和基因组DNA的克隆和序列测定被引量：2
- 2001年
- 目的研究内含子和5＇非翻译区对血小板生成素(TPO)基因表达的影响.方法以中国人胎肝mRNA为模板,应用RT-PCR和长距离PCR(LD-PCR)技术扩增了约1.1kb的全长人TPO cDNA.6.2 kb的TPO基因组DNA和TPO基因组中的内含子I,内含子Ⅱ～Ⅳ和内含子Ⅴ.结果全序列分析表明,全部的编码序列、所有的内含子/外显子剪切部位序列同已知一致,个别差异发生在内含子中.结论通过PCR扩增技术,成功地从中国人胎肝组织中克隆了全长人TPO cDNA、TPO基因组DNA及其全部的内含子.
- 宁云山周宏伟周明乾陈泽洪方向东富宁王小宁
- 关键词：血小板生成素基因组DNA内含子克隆
- 幽门螺杆菌Catalase基因的克隆、表达及其抗原性鉴定被引量：7
- 2006年
- 目的：构建含人幽门螺杆菌（Hpylori，Hp）过氧化氢酶（catalase，KatA）编码基因的重组质粒，测定、分析其核酸序列，并在E.coli中表达，研究其抗原性。方法：应用PCR技术从HpDNA染色体中扩增KatA编码基因片段，将其T-A克隆和测序，并与GenBank公布的其他Hp菌株的基因序列比较，再将目的基因插入至融合表达载体pGEX-4T-1中进行表达，用GST亲和层析对其进行纯化。纯化产物用于对29株小鼠抗Hp-全菌单克隆抗体（mAb）的鉴定及与Hp啊感染患者血清进行Western blot。结果：KatA基因全长为1 515 bp，并在GenBank上登录（No．DQ333889），与GenBank公布的其他Hp菌株的核酸的同源性为96％～97％，表达的KatA融合蛋白的相对分子质量（Mr）为85 000，29株小鼠抗Hp全菌mAb中有4株mAb是针对KatA的，表达产物可被Hp感染患者的血清特异性识别。结论：重组KatA具有较好的抗原性，为坳检测试剂和疫苗的研究奠定了基础。
- 李妍宁云山龙敏董文其李明
- 关键词：幽门螺杆菌CATALASE克隆基因表达抗原性
- 生物技术专业《新概念疫苗》教学设计与实践被引量：1
- 2012年
- 《新概念疫苗》已成为我校生物技术专业本科生必修的一门专业课程,作者结合自己在《新概念疫苗》课程教学中的亲身体会,对教材选择、教学形式和方法以及考核方式等方面进行了深入探讨。
- 李妍宁云山黎莉
- 关键词：教学方式教学改革
- 幽门螺旋杆菌免疫优势表位肽L<Sub>55-72</Sub>及其应用
- 本发明涉及一种幽门螺旋杆菌Lpp20的HLA限制性CD4+T细胞表位免疫优势肽和核心肽，其组成如SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.30所示。本发明所涉及的合适的CD4<Sup>+</Sup>T细胞表位(SEQ...
- 李妍宁云山
- 文献传递
- 指导医学生物技术专业本科生毕业实习的体会
- 2012年
- 本科毕业实习是本科教学最后一个重要的实践性教学环节,是学生创新思维、综合素质与实践能力培养效果的全面检验。本文针对在高等医学院校实习的生物技术专业学生的实际情况,从课题选题、开题报告、实验研究等几个基本环节总结实习带教模式和经验,为提高本科生毕业实习质量进行了积极的探索。
- 李妍宁云山黎莉
- 关键词：生物技术专业
- 人Notch信号通路中Jagged1基因的克隆与真核表达被引量：3
- 2015年
- [目的]克隆人Notch信号通路中配体Jagged1基因并进行真核表达。[方法]采用RT-PCR的方法从Hela细胞总RNA中获取Jagged1基因,并克隆至携带FLAG标签的真核表达载体pCMV-Tag4。经酶切、PCR和测序鉴定后,将重组质粒Jagged1-pCMV-Tag4瞬时转染HEK 293T细胞,通过Q-PCR和Western blot检测目的蛋白的表达。[结果]成功构建了真核表达质粒Jagged1-pCMV-Tag4并在HEK 293T细胞中瞬时表达。[结论]Jagged1在HEK 293T细胞中实现瞬时表达,为稳定表达和进一步研究Jagged1/Notch信号通路奠定基础。
- 叶健斌陈中标梁来妹杨宜宁立军宁云山李妍
- 关键词：NOTCH信号通路真核表达JAGGED1
- 幽门螺杆菌NCTC11639标准株lpp20基因的克隆、表达及其抗原性的鉴定被引量：1
- 2006年
- 李妍宁云山龙敏董文其李明
- 关键词：幽门螺杆菌标准株抗原性LPP20基因工程技术免疫保护性
- 人DLL1真核表达质粒的构建及过表达DLL1抑制人口腔鳞癌细胞SCC15的增殖被引量：4
- 2017年
- 目的:构建人全长DLL1基因真核表达质粒及过表达DLL1对人口腔鳞癌细胞增殖的影响.方法:PCR扩增人全长DLL1基因,酶切和测序鉴定后克隆至真核表达载体pCMV-Tag4并构建真核重组质粒DLL1/pC MVTag4,瞬时转染HEK293T细胞并通过实时荧光定量PCR(Q-PCR)和Western blot鉴定DLL1的表达;进一步检测DLL1在SCC15等3株人口腔鳞癌细胞中的表达;DLL1/pCMV-Tag4瞬时转染SCC15细胞,Q-PCR和Western blot检测过表达及MTT检测DLL1过表达对细胞SCC15增殖的影响.结果:真核重组质粒DLL1/pCMV-Tag4在HEK293T细胞中成功表达;DLL1在口腔鳞癌细胞中的表达高于正常口腔细胞;DLL1/pCMV-Tag4在SCC15细胞中获得表达且过表达DLL1抑制SCC15细胞的增殖.结论:人全长DLL1分子在HEK293T及SCC15细胞中获得表达,过表达DLL1抑制口腔鳞癌细胞SCC15的增殖.
- 粟芃芃叶健斌邱晓媚胡冰心李妍宁云山
- 关键词：NOTCH信号通路真核表达
- 一种制备抗复合抗原单克隆抗体的方法被引量：2
- 2005年
- 目的建立通过单次细胞融合制备抗复合抗原(多种抗原)单克隆抗体的方法.方法用复合抗原(甲胎蛋白、癌胚抗原、乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎核心抗原、乙型肝炎e抗原)免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备单克隆抗体.通过Protein-G亲和层析纯化阳性杂交瘤细胞株腹水,并通过亚类试剂盒法和非竞争ELISA法分别测定抗体亚类和亲和常数,同时应用免疫印迹分析其特异性.结果通过单次细胞融合共获得20株抗上述复合抗原的单克隆抗体,其中针对甲胎蛋白的单克隆抗体5株、针对癌胚抗原的单克隆抗体6株、针对乙型肝炎表面抗原的单克隆抗体3株;针对乙型肝炎核心抗原的单克隆抗体4株、针对乙型肝炎e抗原的单克隆抗体3株.已鉴定的部分阳性杂交瘤细胞株亚类均为IgG1,抗体亲和常数介于1×109M-1～2.8×1011M-1,免疫印迹分析显示,所获得的单抗都与其抗原发生特异性结合.结论建立了通过单次细胞融合制备针对复合抗原的单克隆抗体制备技术,使单克隆抗体的产出率显著提高,制备周期明显缩短,为建立规模化单克隆抗体制备平台奠定基础.
- 彭丹丹宁云山李妍洪燕华王云丹吴芬芳李明
- 关键词：复合抗原单克隆抗体蛋白质组学
