宿靖伟
- 作品数：11 被引量：22H指数：3
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青年科技基金NSFC-广东联合基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 马立克氏病病毒河南分离株Meq基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2014年
- 【目的】了解马立克氏病病毒（Marek’s disease virus,MDV）河南分离株Meq基因的分子特性,为中原地区MDV流行情况提供较详细的信息,为更好地防控MD奠定基础。【方法】应用PCR方法分别扩增了17株MDV河南省野毒分离株的Meq基因片段,克隆测序后,将各毒株Meq基因序列与vv＋MDV 648A株、vvMDV RBIB株、vMDV GA株、mMDV疫苗株CVI988株和814株的Meq基因序列进行比对分析。【结果】17株分离株中除HNGS201和HNLC503的Meq基因扩增产物较预期稍大外,其余15个的片段长度为1 020bp,与预期长度相符;MDV河南分离株之间及其与参考毒株Meq基因的核苷酸同源性为99.0%～100%,部分毒株Meq基因的氨基酸序列有10个位点的氨基酸存在规律性突变;MDV河南分离株和参考株共组成3个进化分支,其中强毒株GA、RB1B和648A位于一个分支,分离株HNGS201、HNLH304、HNLC503与mMDV毒株CVI988和814位于同一分支,其余14株分离株位于另一个较大的分支。【结论】河南省可能流行着不同毒力的MDV,一些mMDV毒株的Meq蛋白存在59个或60个氨基酸的插入。
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- 关键词：马立克氏病病毒MEQ基因克隆
- MDV Meq-clustered miRNAs基因缺失BAC克隆株的构建及其体外增殖特性被引量：3
- 2015年
- 为构建缺失马立克氏病病毒(Mareks disease virus,MDV)Meq基因簇microRNAs(Meq-clustered miRNAs的突变株,本研究在vv MDV GX0101细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)克隆的基础上,采用Red/ET同源重组技术将Meq-clustered miRNAs的编码基因进行缺失突变,经PCR鉴定及序列分析证明Meq-cluster miRNAs序列成功缺失后,提取Δmeq-miRNAs BAC DNA,转染鸡胚成纤维细胞(CEF)进行病毒拯救,用SYBR GreenⅠqRT-PCR检测病毒体外增殖特性。结果表明成功拯救出缺失MDV Meq-clustered miRNAs基因的感染性BAC克隆株GX0101Δmeq-miRNAs,且该缺失株与亲本株GX0101BAC具有相似的增殖曲线,Meq-clustered miRNAs是MDV体外复制的非必需基因。MDV Meq-clustered miRNAs基因缺失感染性BAC克隆株的成功构建为进一步研究MDV Meq-clustered miRNAs在MDV致病和致肿瘤方面的作用奠定了基础。
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- 关键词：马立克氏病病毒细菌人工染色体克隆
- 马立克病病毒与禽网状内皮增生病病毒的混合感染及在传代过程中的重组被引量：3
- 2016年
- 旨在了解国内鸡群马立克病病毒(MDV)和禽网状内皮增生病病毒(REV)的混合感染及自然重组状况,探讨两种病原的基因重组对MDV病原学特性的潜在影响及危害。利用PCR扩增、序列测定及间接免疫荧光试验(IFA),对来自河南商品蛋鸡群的17个MDV分离株进行研究。结果表明,其中两个毒株HNGS206和HNXZ103的病毒基因组中存在REV—LTR的重组插入。进一步的IFA结果显示,HNGS206和HNXZ103并非MDV与REV的自然重组流行毒株,这两个毒株基因组中LTR的插入发生于临床病例鸡混合感染后的病毒分离及传代培养过程中。结果提示,虽然目前国内鸡群中MDV和REV的混合感染较为普遍,但MDV与REV自然重组毒株的流行状况仍需要进一步的流行病学监测。
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- 关键词：马立克病病毒禽网状内皮增生病病毒流行病学基因重组
- 调控马立克氏病病毒原癌蛋白MEQ的病毒miRNA的筛选及鉴定
- 马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)是引起家禽免疫抑制和肿瘤病最重要的病原之一,其早期感染宿主后可最终诱导感染鸡产生T 细胞淋巴瘤。至今,在MDV 编码的众多蛋白中,仅MEQ 蛋白被认为是...
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- 关键词：马立克氏病病毒微RNAMEQ肿瘤形成
- 河南商品蛋鸡群中鸡马立克氏病的流行病学研究被引量：9
- 2012年
- 2011-2012年,河南省大面积暴发商品蛋鸡群肿瘤病,临床剖检疑似马立克氏病(Marek's disease,MD),为进一步确诊病因,根据马立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV)的meq、gB和pp38基因分别设计了3对特异性引物,利用PCR技术对送检的疑似病例鸡的肝脏和脾脏样品分别进行了检测和分析。结果显示,各地区随机抽取的5只病例鸡肝脏、脾脏样品中均扩增出3种不同大小的MDV特异性病毒基因PCR产物,这表明MDV在河南鸡群中广泛流行,并导致了商品蛋鸡群MD的暴发。研究结果填补了河南省MD流行病学空白,为今后MD的临床快速诊断及有效防控提供了重要参考依据。
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- 关键词：马立克氏病流行病学马立克氏病病毒聚合酶链式反应
- 猪乙脑病毒分离株BSF．ZZ-1和BSF．ZZ-3在BHK-21细胞上的传代培养及E基因序列稳定性分析被引量：3
- 2013年
- 为研究猪乙脑病毒(JEV)分离株遗传基因的稳定性,将JEV分离株BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3在BHK-21细胞上进行连续传代培养,并对其E基因的遗传稳定性进行了研究。结果表明,经连续传代60次后病毒E基因趋于稳定,BSF.ZZ-1毒株E蛋白氨基酸位点E21(A→V)、E200(T→A)、E244(G→E)、E279(M→K)和E426(G→D),以及BSF.ZZ-3毒株的E244(G→E)、E255(F→L)、E285(M→L)、E368(L→S)和E497(N→S)传代后发生稳定点突变。与JEV毒力相关的部分位点如E107、E138、E176、E177和E315遗传稳定性较高,经连续传代后均未发生突变,与疫苗株SA14-14-2相应位点完全一致。但是,另外一些位点的遗传稳定性较差,如BSF.ZZ-3的E279(M→K→M)出现反复突变。这些突变是否与JEV的宿主细胞适应性及毒力变化相关有待进一步研究。
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- 关键词：乙脑病毒传代培养E基因
- 河南鸡群马立克氏病病毒流行毒株的分子进化分析被引量：2
- 2015年
- 为了解鸡马立克氏病病毒流行毒株的分子特征，对2012－2014年河南省发病鸡群的临床病料进行了采集，并对MDV 132 bp重复序列进行了PCR扩增，同时对meq、gE、gI基因进行了克隆和序列测定。结果表明，9份病料中均可扩增出与132 bp双拷贝大小相符的PCR主产物；meq、gE、gI基因的核苷酸序列同源性与国内外参考毒株相比，分别为98．5％～100％，98．8％～100％和98．0％～100％；基于这些基因构建的系统发生树的分析结果表明，与美国、澳大利亚、日本以及印度的MDV分离株相比，目前，河南省鸡群中流行的MDV与此前分离的河南流行株进化关系较近，并且与其他国内分离株共同形成一个较大的独立进化分支。
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- 关键词：马立克氏病病毒MEQGI进化分析
- 河南鸡群马立克氏病病毒流行毒株与禽网状内皮增生症病毒的体外重组研究
- 马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)和禽网状内皮增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)是导致家禽免疫抑制性疾病和肿瘤病最重要的两种病原。
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- miR-M7-5p靶向调控马立克病病毒原癌基因meq的表达被引量：1
- 2014年
- 马立克病病毒(MDV)基因组编码数十个miRNA,并且可能在MDV的感染及致病过程中发挥重要作用。此前研究发现,MDV-1编码的miR-M7-5p在病毒感染宿主发病的过程中具有高水平表达特征,为探讨miR-M7-5p对MDV可能具有的自我调控作用,利用生物信息学方法对MDV编码的蛋白基因进行了扫描分析,预测发现了10个潜在的miR-M7-5p结合靶点,其中包括MDV的原癌基因meq。双荧光报告试验表明miR-M7-5p与meq基因的3′-UTR在体外能够相互作用,qRT-PCR进一步证实miR-M7-5p在体内能够下调meq基因mRNA的转录。结果表明,miR-M7-5p能够自我调控病毒原癌基因meq的表达,在MDV致瘤过程中可能发挥重要作用。
- 赵朴滕蔓罗俊迟佳琦宿靖伟党露邓瑞广张改平
- 关键词：马立克病病毒MICRORNA自我调控原癌基因MEQ
- 河南商品蛋鸡群马立克氏病病毒流行株的分离与鉴定被引量：2
- 2014年
- 2011年～2012年，河南省多个地区养殖场鸡群爆发了马立克氏病，应用外周血淋巴细胞培养分离技术对流行毒株分离并进行了PCR鉴定，最终分离到17个马立克氏病毒毒株，这些病毒株感染鸡胚成纤维细胞3～5d后均能形成典型的病毒蚀斑，从感染细胞总DNA中均能扩增出132bp重复序列的特异性条带，且各毒株间132bp重复序列扩增产物的拷贝数存在明显差异，分离鉴定表明：河南鸡群中可能存在不同毒力马立克氏病毒野毒株的共流行。
- 余祖华丁轲滕蔓宿靖伟罗俊
- 关键词：马立克氏病病毒
