彭颖
- 作品数：49 被引量：153H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金温州市科技计划项目浙江省医药卫生重点科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 肠杆菌基因间重复一致序列-聚合酶链反应技术在大肠埃希菌基因分型中的应用研究被引量：5
- 2006年
- 目的应用ERIC-PCR技术对致尿路感染大肠埃希菌进行基因分型。方法收集大肠埃希菌致尿路感染患者标本24例,以ERIC序列为引物结合位点,PCR扩增致病大肠埃希菌基因组。结果24例菌株中23例得到阳性扩增,ERIC-PCR绘制的基因组指纹图条带清晰可辨且有一定的复杂度。结论ERIC-PC技术可用于大肠埃希菌的基因分型,能够有效地鉴别不同的菌株。
- 俞雅萍彭颖吕建新
- 关键词：基因分型ERIC-PCR大肠埃希菌
- 7型腺病毒E1A基因克隆及真核表达被引量：1
- 2008年
- 为了研究7型腺病毒(Ad7)E1A在感染中的致病机制,分离了Ad7d2病毒株,构建了Ad7E1A基因的真核表达体系。用A549细胞分离培养痰液标本中的腺病毒,应用重叠延伸PCR扩增Ad7E1A基因外显子,产物克隆至真核表达载体pIRES-Neo,构建重组子pIRES-Neo-Ad7E1A并转染A549细胞,利用Western印迹对其表达产物进行鉴定。克隆测序显示扩增的Ad7E1A基因外显子包含了完整的编码区基因,pIRES-Neo-Ad7E1A转染A549细胞的表达产物经Western印迹鉴定与设计相符。成功建立了Ad7E1A基因的真核表达体系。
- 沈鑫烽申宝玲黄燕燕余雪娇彭颖吕建新
- 关键词：7型腺病毒E1A基因克隆真核表达
- 重组EGF-IL-18融合蛋白的表达优化与分离纯化
- 目的:构建 EGF-IL-18融合蛋白的原核表达系统,优化表达 EGF-IL-18 融合蛋白,分离纯化有活性的 EGF-IL-18。方法:将人 EGF-IL-18融合蛋白基因克隆到 pET12a(+)和 pET26b(+...
- 赵峰彭颖吕建新王震赖飞
- 关键词：分离纯化复性
- 文献传递
- 乳腺癌bcl-2甲基化的检测及与表达、预后的关系被引量：2
- 2005年
- 目的:建立Bcl-2基因甲基化特异的PCR(MSP)检测方法,并探讨乳腺癌bcl-2甲基化与蛋白表达、 预后因素(肿瘤大小,淋巴结转移,增殖细胞核抗原PCNA,雌、孕激素受体ER、PR情况)的关系。方法:设计bcl-2基 因MSP引物,采用MSP方法检测54例乳腺癌bcl-2基因5’端启动子CpG岛甲基化状态。采用免疫组化S-P法检 测54例乳腺癌bcl-2、PCNA、ER、PR的表达。结果:乳腺癌bcl-2甲基化率为29．6％。Bcl-2甲基化与其蛋白表达 之间呈显著负相关(P<0．01)。Bcl-2甲基化率高与不良的预后因素(PCNA标记指数LI高、ER-和PR-)显著相关 (P<0．01)。结论:该研究建立bcl-2基因MSP检测方法,MSP扩增和测序结果证实,bcl-2基因MSP引物设计是合 理的。bcl-2甲基化有可能成为乳腺癌预后不良的分子检测指标。
- 李红智李东彭颖吕建新
- 关键词：乳腺肿瘤DNA甲基化BCL-2
- 用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定被引量：2
- 2005年
- 目的 :制备能用于肿瘤靶向治疗的重组表皮生长因子受体干扰序列 白细胞介素 18(EGF-IL-18)融合蛋白 ,并鉴定其生物学活性。方法 :利用Bac-to-Bac表达系统在昆虫细胞Sf9中表达融合蛋白 ,用离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析等方法纯化表达产物 ,并以IFN-γ诱导实验和EGFR竞争结合实验初步评价融合蛋白的生物活性。结果 :经SDS-PAGE和Westernblot检测 ,Sf9细胞中表达的重组蛋白与预期的EGF-IL-18融合蛋白分子量一致 ,纯化后融合蛋白具有较高纯度和良好的免疫原性。IFN -γ诱导实验和EGFR竞争结合实验显示 ,该融合蛋白具有肿瘤导向性和抗肿瘤活性。结论 :成功表达并纯化了具有肿瘤导向性的抗肿瘤蛋白———EGF-IL-18融合蛋白 ,该蛋白具有较好的肿瘤导向性和抗肿瘤活性 。
- 孟哲峰彭颖沈波吕建新
- 关键词：昆虫细胞肿瘤靶向治疗
- 重组人EGF-IL-18融合蛋白的表达纯化及复性研究
- 目的构建EGF-IL-18融合蛋白的原核表达载体,分离纯化有活性的EGF-IL-18融合蛋白。方法采用:PCR方法,以质粒pFUS-EGF-IL-18为模板, 扩增EGF-IL-18融合基因,将其亚克隆入原核表达质粒pE...
- 潘建华彭颖郑昭暻吕建新
- 关键词：包涵体
- 文献传递
- 幽门螺杆菌临床分离株的随机扩增多态性DNA指纹图分析被引量：3
- 2004年
- 目的 :建立武汉及周边地区幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)感染病人胃内分离的Hp的DNA指纹图谱 ,并进行数理统计分析 ,探讨Hp基因型与疾病的相互关系 ,为临床诊断、防治及致病机制提供理论与实践基础。方法 :采取随机扩增多态性DNA指纹法 (RandomamplifiedpolymorphicDNA ,RAPD)对 4 8例病人Hp基因组DNA进行PCR反应 ,其随机引物为 :12 90 5’ GTGGATGCGA 3’。反应产物经 2 %琼脂糖凝胶电泳 ,成像存盘。用统计分析软件 (Statisticanalysissoftware,SAS)对HpDNA指纹图的相似性以及与疾病的相关性进行分析。结果 :每个菌株都有其独特的DNA指纹图 ,显示其基因的多态性 ;计算机聚类分析显示 :HpDNA指纹图可分为两大类 ,其与宿主疾病之间有一定程度的相关性 (P <0 0 5 )。结论 :(1)RAPD对HpDNA扩增结果是稳定、可靠的 ,是一种较好的分型方法。 (2 )幽门螺杆菌感染所致疾病可能与其基因型相关。
- 许迪叶嗣颖孔利佳彭颖黄庆华廖方
- 关键词：DNA指纹图谱幽门螺杆菌随机扩增多态性DNA聚类分析基因型
- 氨基糖苷-(3)-乙酰转移酶II的表达纯化及初步活性
- 2007年
- 用PCR扩增的氨基糖苷-(3)-乙酰转移酶II[aac(3)-II]基因构建了能表达较高活性AAC(3)-II的重组工程菌,并获取重组AAC(3)-II。含pET28a质粒的工程菌转入aac(3)-II基因前后对氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度进行比较,重组菌超声裂解上清液及其纯化的AAC(3)-II进行SDS-PAGE和Western印迹电泳鉴定。最低抑菌浓度表明转入aac(3)-II基因的工程菌比未转入的工程菌对庆大霉素(gentamicin,GEN)的提高了256倍,对妥布霉素(tobramycin,TOB)及其奈替米星(netilmicin,NTL)提高了16倍,电泳鉴定表明纯化获取的是重组AAC(3)-II,其相对分子质量约为32kDa,纯度大于95%,纯化后的10μgAAC(3)-II,分别在10s内使80μgGEN、30s内使80μgTOB和NTL乙酰化而失去抑菌作用。研究为氨基糖苷类抗生素伴侣的开发研究初步打下基础。
- 王震陈云波查长森邹立林彭颖季敬璋陈秀枢吕建新
- 关键词：最低抑菌浓度氨基糖苷类抗生素
- 不同剂量牛膝多糖对其在荷瘤鼠体内的杀瘤活性的影响
- 目的研究腹腔注射不同浓度的牛膝多糖对其在荷瘤鼠体内杀瘤活性的影响。方法选择 6-8 周龄雄性C57BL／6小鼠右侧腰肋部皮下注射1×106个Lewis肺癌细胞制成荷瘤鼠模型。肿瘤细胞接种后24小时每天小鼠腹腔注射不同浓度...
- 郑昭璟彭颖吕建新
- 关键词：牛膝多糖TNF小鼠脾脏杀瘤活性小鼠脾细胞
- 文献传递
- 人EGF-IL-18融合基因的构建、表达及体内外生物活性的研究
- 目的构建EGF-IL-18融合基因,进行原核表达重组,并对获得的表达产物进行体内、外生物活性研究。方法pMD18T-EGF-IL-18质粒DNA转化BL21(DE3) 大肠杆菌,IPTG诱导EGF-IL-18融合蛋白表达...
- 郑昭璟潘建华彭颖吕建新
- 关键词：表皮生长因子
- 文献传递
