李超 作品数:37 被引量:130 H指数:7 供职机构: 广西大学 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 广西壮族自治区科学研究与技术开发计划 广西科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 经济管理 文化科学 更多>>
斑点叉尾鮰暴发海豚链球菌病的研究 2008年 2006—2007连续两年广西斑点叉尾鮰网箱养殖暴发一种流行性传染病,该病波及面广,传染性强,死亡率30%~100%。发病症状主要表现为浮头、转圈、狂游及发病后期单边眼睛浑浊、突出及伴有全身大面积弥漫性出血。作者先后从症状较为典型发病班点叉尾鮰分离到CMS003~CMS005、CMS009~CMS012共7株代表性菌株,经人工感染实验表明分离菌株对健康斑点叉尾鮰具有很强的致病力,出现症状与自然发病斑点叉尾鮰症状相同。通过常规形态、生理生化及海豚链球菌(Streptococcus iniae)特异性PCR诊断和16S rRNA基因序列系统发育进化分析方法对分离菌株进行分类鉴定,结果表明分离的7株细菌均为海豚链球菌。研究结果表明,海豚链球菌已成为广西斑点叉尾鮰网箱养殖的高致病性病原菌。 余晓丽 陈明 李超 李莉萍 雷爱莹 钟穆妮 梁万文关键词:斑点叉尾鮰 海豚链球菌 细菌鉴定 奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离与血细胞指数研究 2008年 鱼类外周血白细胞分离一直是一项技术难题,为探讨一种便捷、高效的奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离方法,本实验使用76%泛影葡胺(Urografin)调整标准人淋巴细胞分离液比重,通过梯度密度离心筛选最佳奥利亚罗非鱼白细胞分离液比重,并对分离前后的细胞进行分类计数与形态观察。结果发现分离前奥利亚罗非鱼外周血细胞总数为1.5×10^9个/ml,白细胞占35%,最佳奥利亚罗非鱼白细胞分离液比重为1.082,每毫升外周血可分离得到6×10^6~8×10^6个细胞,其中白细胞可达90%以上。对分离前后的细胞进行瑞氏染色分析可明显区分出单核细胞、大淋巴细胞、小淋巴细胞和嗜中性粒细胞,且各类白细胞之间的比例分离前后基本一致。本研究成功建立了奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离技术,测定奥利亚罗非鱼血细胞指数,并对血细胞进行了形态学观察与鉴定,这对罗非鱼细胞免疫学研究具有一定的实际意义。 李超 陈明 黄维义 余晓丽 王瑞 雷爱莹 黄婷 秦春香 梁万文关键词:奥利亚罗非鱼 外周血白细胞 罗非鱼链球菌病疫苗的研制及其免疫机制的研究 甘西 梁万文 陈汉忠 陈明 余晓丽 李莉萍 廖振平 黄维义 雷爱莹 王瑞 黄婷 张彬 陈福艳 徐增辉 李超 李波等 任务来源2006年5月,广西科技厅将广西科技计划项目《罗非鱼链球菌病疫苗的研制及其免疫机制的研究》下达给广西水产研究所和广西大学共同承担并签订了项目合同。合同编号为桂科基0639036,项目类别为科技创新能力与条件建设,...关键词:关键词:罗非鱼 免疫机制 用链球菌疫苗免疫罗非鱼前后其差异表达基因的鉴定与分析 被引量:5 2009年 采用抑制性差减杂交技术(SSH)成功构建了罗非鱼O reochrom is nilotica被链球菌Streptococcus iniae疫苗免疫前后正、反两个淋巴细胞cDNA差减文库,富集了免疫过程中表达谱发生变化的淋巴细胞基因,并对文库进行了斑点杂交筛选、测序和ESTs初步分析。结果表明:文库富集了高丰度的差异表达基因,阳性率较高。正向文库中筛选得到21个免疫期间表达丰度上调的基因,其中1个基因与罗非鱼已知基因具有相似性,10个基因与其他鱼类已知基因相似,1个基因与其他物种已知基因具有相似性,9个为未知新基因;负向文库中筛选得到24个免疫期间表达丰度下调的基因,其中3个与罗非鱼已知基因具有相似性,15个与其他鱼类已知基因相似,6个为未知新基因。进一步功能注解发现,正向文库功能基因包括免疫信号传导相关蛋白、防御相关蛋白、肿瘤免疫相关蛋白和淋巴细胞相关蛋白,这些基因免疫后表达丰度升高,提高了机体免疫抵抗力。负向文库功能基因包括细胞免疫相关蛋白、感染相关蛋白和肿瘤发生相关蛋白,这些基因免疫后表达丰度降低,可以降低机体感染和发病几率。 李超 陈明 李莉萍 黄维义 余晓丽 黄婷 张彬 雷爱莹 陈福艳 梁万文关键词:罗非鱼 链球菌 疫苗 差减文库 免疫相关基因 罗非鱼免疫前后白细胞cDNA差减文库的构建及鉴定 被引量:9 2010年 为筛选罗非鱼链球菌疫苗免疫前后白细胞表达变化基因及探讨鱼类白细胞免疫机理,利用抑制性差减杂交(SSH)技术,以链球菌疫苗免疫前后罗非鱼白细胞cDNA为材料,构建了罗非鱼免疫前后正、负2个cDNA差减文库,并采用地高辛(DIG)标记差减文库cDNA作为探针,进行差异表达片段的筛选鉴定。结果显示:2个文库重组率均在90%以上,插入片段在300~900 bp,接头连接效率超过50%,差减效率非常高效,阳性率均超过70%。杂交筛选后正、负文库各挑选30个阳性克隆进行测序组装聚类,正、负文库各获得16和18条非冗余EST(unigene),所得序列经GenBank同源性分析,正、负文库各有10和11条unigene获得功能注释,且各有6和7条unigene没有同源性匹配,为未知新基因。 李超 陈明 李莉萍 黄维义 余晓丽 黄婷 张彬 雷爱莹 陈福艳 梁万文关键词:罗非鱼 链球菌 差减文库 罗非鱼二联链球菌灭活疫苗的制备方法 本发明公开了一种罗非鱼二联链球菌灭活疫苗及其制备方法,该疫苗是将从发病罗非鱼体内分离出的海豚链球菌和无乳链球菌分离纯化、液体活化培养、生物反应器的扩大培养、培养物的灭活和洗涤,以及将灭活完全的菌体按等比例混合制成罗非鱼二... 陈明 梁万文 甘西 王瑞 雷爱莹 李莉萍 李超 陈晓汉 余晓丽 徐增辉SMA沥青混合料振动搅拌技术研究 由于重载交通以及改扩建工程对开放交通时间的要求,SMA沥青路面经常出现早期车辙和泛油等病害,降低了路面的高温稳定性和抗滑性能。为提高SMA沥青路面的路用性能,本文从振动降黏减阻的概念出发,提出SMA沥青混合料振动搅拌技术... 李超关键词:沥青混合料 振动搅拌 黏附性 稳定性 基于质子交换膜燃料电池的模型优化及建模参数的影响研究 质子交换膜燃料电池(PEMFC)以其环保无污染、能量密度高和使用绿色能源氢气等特点已成为当前新能源领域的研究热点。但其目前在商业化进程中仍存在很多技术壁垒需要突破。一个精准预测性能的模型可以为实际实验以及工程应用提供前期... 李超关键词:质子交换膜燃料电池 广义回归神经网络 文献传递 罗非鱼热休克蛋白70在毕赤酵母中的表达与纯化 被引量:3 2011年 以尼罗罗非鱼血液mRNA反转录获得编码罗非鱼Hsp70完整cDNA,重组构建罗非鱼真核表达载体pPIC9K/rtHsp70;在毕赤酵母Pichia pastoris KM71中表达重组罗非鱼的热休克蛋白70(rtHsp70),对表达上清液进行SDS-PAGE及Western blot分析;采用亲和层析、HiTrap Desalting预装柱脱盐纯化目的蛋白。结果表明:克隆至pMD载体上的基因与目的基因完整编码区序列完全一致;诱导表达上清液经SDS-PAGE及Western blot分析,上清液中蛋白条带大小与目的蛋白相对分子质量大小一致;每升诱导上清液可以获得约2 mg纯化蛋白。本研究中获得的rtHsp70毕赤酵母工程菌及纯化的rtHsp70为后期rtHsp70-肽疫苗研究奠定了基础。 陈明 王秋华 王瑞 黄婷 梁万文 李超 雷爱莹 陈福艳 余晓丽 甘西关键词:基因表达 毕赤酵母 罗非鱼外周血白细胞分离与血细胞指数研究 被引量:3 2009年 采用Ficoll-Urografin法探讨了罗非鱼外周血白细胞的最佳分离条件,并通过瑞氏染色和细胞分类计数对罗非鱼外周血血细胞指数进行测定。结果表明:罗非鱼最佳白细胞分离条件为18℃,且细胞分离液的相对密度为1.082;分离前罗非鱼外周血血细胞总数为1.5×109个/mL,红细胞约占65%,白细胞约占35%,其中小淋巴细胞、大淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞比例分别是5.81%、12.79%、12.79%和1.16%;每毫升外周血可分离得到(1.3~1.5)×107个细胞,其中白细胞可达90%以上,用瑞氏染色可明显区分出单核细胞、大淋巴细胞、小淋巴细胞、嗜中性粒细胞和血栓细胞,但嗜碱性和嗜酸性细胞较难分辨,且各类白细胞之间的比例分离前后保持一致。血细胞指数测定显示,单核细胞最大,其次为嗜中性粒细胞和红细胞,淋巴细胞和血栓细胞最小,各类血细胞指数与鲤科鱼类同源性较高。 李超 陈明 王瑞 黄维义 余晓丽 黄婷 雷爱莹 梁万文关键词:罗非鱼 外周血白细胞