杨卫平
- 作品数：6 被引量：11H指数：1
- 供职机构：生物芯片北京国家工程研究中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蛋白芯片技术在自身抗体检测中的应用被引量：10
- 2006年
- 目的建立应用蛋白芯片技术检测抗核抗体谱中11种自身抗体的方法,并对蛋白芯片技术对自身抗体检测的敏感性和特异性进行评价。方法通过蛋白芯片技术与间接免疫荧光法(IIF)和酶联免疫吸附法(ELISA)自身抗体检测试剂盒进行比对,验证抗核抗体谱检测蛋白芯片(抗SSA-52抗体、抗SSA-60抗体、抗SSB抗体、抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗Scl-70抗体、抗Jo-1抗体、抗dsDNA抗体、抗rRNP抗体、抗着丝点抗体和抗核抗体)在临床应用中的敏感性和特异性。除抗Jo-1抗体阳性样品较罕见,仅检测阳性样品32份,其他10种自身抗体,每种选择各阳性样本70份,阴性样本294份;并对检测结果进行统计学分析。结果除抗SSA52抗体和抗SSB抗体的检测敏感度分别为95·7%和98·6%外,其他9种自身抗体的检测敏感度均为100%;除抗SSB抗体、抗RNP-68抗体、抗Scl-70抗体、抗dsDNA抗体、抗CENP-B抗体、抗核抗原提取物抗体(ANA)的检测特异度分别为98·0%、98·0%、99·7%、99·7%、99·7%、98·3%外,其他5种自身抗体的检测特异度均为100%。结论蛋白芯片技术检测11种抗核抗体谱自身抗体的检测敏感度(均>95·0%)和特异度(均>98·0%)均较高,且与IIF和ELISA法有较高的符合率,能满足临床检测自身抗体谱的要求。此外,蛋白芯片技术检测自身抗体时具有高通量、简单快速、敏感度好和特异度强等优点,值得临床推广应用。
- 李永哲赵智贤佟大伟张蜀澜胡朝军高扬杨卫平于孟学朱立平程京
- 关键词：自身抗体抗体抗核蛋白芯片自身免疫性疾病
- 间接酶联免疫法测定抗Jo-1抗体及其临床应用
- 2009年
- 目的利用基因工程表达的组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原Jo-1蛋白,建立ELISA法,初步用于检测多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)中的抗Jo-1抗体。方法用表达蛋白建立间接ELISA,摸索反应时间、抗原包被浓度、样本稀释浓度及抗抗体工作浓度等工作条件,进一步检测方法的重复性及稳定性。用建立的方法,检测40例健康体检者、30例系统性红斑狼疮(SLE)、30例类风湿关节炎(RA)、20例干燥综合征(SS)、90例多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)患者血清中抗Jo-1抗体。结果成功建立间接ELISA法,并确立了一系列反应条件。临床检测结果显示,PM/DM患者抗Jo-1抗体的阳性率为25.6%,而非PM/DM患者均为阴性。PM/DM组Jo-1抗体阳性率与疾病对照组及健康对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论本研究成功应用基因工程表达的Jo-1蛋白建立了间接ELISA法,检测抗Jo-1抗体,与国外报道的结果基本相当,与常用免疫印迹法对比检测的结果一致。
- 李珊珊李永哲赵智贤佟大伟张蜀澜胡朝军杨卫平
- 关键词：自身抗原酶联免疫吸附法
- 组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原的原核表达及初步临床应用被引量：1
- 2008年
- 目的通过克隆人组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原Jo-1基因，构建重组表达质粒，获得具有免疫活性的纯化重组蛋白，建立间接ELISA法，并探讨其在检测多发性肌炎／皮肌炎（PM／DM）中的抗Jo-1抗体的价值。方法构建重组表达载体，在大肠杆菌DH5仪和B121（DE3）中表达；融合蛋白经Ni-NTA树脂柱进行亲和层析纯化，并通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和免疫印迹（WB）进行免疫活性鉴定；应用表达蛋白建立间接ELISA法。同时用该方法检测30名正常献血者，30例SLE，30例类风湿关节炎（RA），10例原发性干燥综合征（SS），75例PM／DM患者血清中抗Jo-1抗体。结果经重组质粒测序和酶切结果证实，Jo-1目的基因已正确插入原核表达载体中，基因序列正确，符合表达框架；经SDS-PAGE检测显示，表达产物在相对分子质量55000处有一明显的蛋白表达条带；WB分析表明，重组蛋白具有人Jo-1抗原反应性；间接ELISA法检测标本血清结果显示，PM／DM组中抗Jo-1抗体的阳性率为28％，非PM／DM组（疾病对照组及正常对照组）均为阴性，其差异均有统计学意义（r=31．84，均P〈0．01）。结论成功克隆了人组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原Jo-1基因，其可在大肠杆菌中表达，且重组自身抗原具有较好的抗原性和特异性。应用纯化融合蛋白建立的间接ELISA法检测PM／DM抗Jo-1抗体具有较好的特异性。
- 李珊珊李永哲赵智贤佟大伟张蜀澜胡朝军杨卫平
- 关键词：自身抗原酶联免疫吸附测定皮肌炎
- 蛋白芯片技术在自身抗体检测中的应用
- 自身免疫性疾病(autoimmune disease,AID)泛指机体针对自身组织或细胞产生病理性免疫应答反应,由自身免疫参与发病机制, 导致组织损伤或功能障碍的一大类疾病。近年来AID发病率明显上升,其总体发病率占世界...
- 李永哲赵智贤佟大伟张蜀澜胡朝军高扬杨卫平于孟学朱立平程京
- 关键词：抗体检测检测芯片抗核抗体谱间接免疫荧光法
- 文献传递
- 组氨酰转移核糖核酸合成酶自身抗原的原核表达及初步临床应用
- 多发性肌炎(PM)是一种以肌肉损害为主要表现的自身免疫性疾病,累及皮肤时称为皮肌炎(DM)。目前研究显示, 该病的发生发展不仅与基因有关,还与特定的环境有关。多发性肌炎(PM)彼肌炎(DM)由于其临床表现的多样性和复杂性...
- 李珊珊李永哲佟大伟张蜀澜胡朝军赵智贤杨卫平
- 关键词：氨酰转移核糖核酸核糖核酸合成酶原核表达
- 文献传递
- 抗核抗体谱检测蛋白芯片在自身抗体谱检测中的应用
- 研究背景:自身免疫性疾病的起始原冈和发病机制非常复杂,目前认为是在内因和外因的共同作用下,机体的自身免疫应答失控,反应过度,直接或间接破坏白身组织,并引起相应器官病变或临床症状的一类疾病。因此自身免疫病患者中,有相当一部...
- 李永哲赵智贤佟大伟张蜀澜胡朝军高扬杨卫平于孟学朱立平程京
- 关键词：抗体谱免疫性疾病特异度
- 文献传递
