杨国宏 作品数:26 被引量:45 H指数:4 供职机构: 牡丹江医学院 更多>> 发文基金: 黑龙江省卫生厅科研项目 黑龙江省教育厅科学技术研究项目 黑龙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
自体骨髓基质干细胞移植联合EPO治疗脊髓损伤的研究 被引量:4 2014年 目的:探讨自体骨髓基质干细胞(MSCs)移植联合促红细胞生成素(EPO)对大鼠脊髓损伤(SCI)治疗的效果。方法:培养与纯化骨髓基质干细胞。80只SD大鼠制备脊髓损伤模型,随机分为4组:干细胞移植组、EPO组、联合组和对照组。采用BBB法进行运动能力评分和组织切片观察来评定修复情况。结果:三个实验组与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),三个实验组均可明显促进大鼠运动功能和损伤后组织结构的恢复,其中联合组效果更显著。结论:骨髓基质干细胞移植联合EPO具有促进大鼠脊髓损伤后神经功能的修复。 杨国宏 张春军 赵富生 孙晓冬 张静 姚志文 李月珍 梁军 刘志新关键词:骨髓基质干细胞 促红细胞生成素 脊髓损伤 黄芪对大鼠脑缺血再灌注损伤c-fos和Bcl-2表达及细胞凋亡的影响 被引量:3 2011年 目的探讨黄芪对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞凋亡和凋亡基因c-fos、Bcl-2表达的影响。方法 40只Wistar大鼠,体质量180~220 g,随机分为黄芪组、缺血4 h再灌注1 h组(Ⅰ组)、缺血4 h再灌注12 h组(Ⅱ组)、缺血4 h再灌注24 h组(Ⅲ组)和对照组。线栓法建立脑缺血再灌注损伤大鼠模型。切片分别行HE染色,应用免疫组织化学染色检测神经细胞凋亡基因c-fos、Bcl-2蛋白表达。结果对照组、Ⅰ组脑细胞未见明显变化,Ⅱ组轻度脑细胞水肿,Ⅲ组脑细胞明显水肿,黄芪组损伤区范围变小,肿胀减轻。与对照组比较,其余各组脑细胞c-fos和Bcl-2阳性表达率增高(P<0.01);黄芪组c-fos和Bcl-2阳性表达率较Ⅱ、Ⅲ组降低(P<0.01)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组和黄芪组细胞凋亡指数较对照组明显增加(P<0.01);黄芪组较Ⅱ、Ⅲ组明显降低(P<0.01)。结论黄芪在脑缺血再灌注损伤后可抑制c-fos表达、增加Bcl-2表达,减轻脑细胞凋亡。 张春军 董琦 董凯 杨国宏关键词:脑缺血再灌注 细胞凋亡 C-FOS BCL-2 骨髓基质干细胞诱导分化为神经细胞的研究进展 被引量:3 2014年 骨髓基质干细胞具有取材简单、增殖速度快、培养过程中始终保持多向分化的潜能等特点,已经成为干细胞研究领域的热点,是最好的组织工程种子细胞之一,还可以诱导分化为神经细胞。本文对骨髓基质干细胞诱导分化为神经细胞的研究进展作一综述。 杨国宏 张春军 曹艳丽 崔荣军 孙晓冬 董建将 刘志新关键词:骨髓基质干细胞 神经细胞 骨髓 NRG1基因修饰的大鼠BMSCs对体外氧糖剥夺/复氧损伤少突胶质细胞的保护作用 被引量:1 2022年 目的:探讨神经调节蛋白1(NRG1)基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对体外氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤少突胶质细胞(CG4细胞)的保护作用及可能机制。方法:采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMSCs,取第3代BMSCs转染NRG1基因。体外培养CG4细胞,分为常规培养(control)组、OGD/R组、OGD/R处理CG4细胞与BMSCs共培养组(BMSCs组)和OGD/R处理CG4细胞与NRG1-BMSCs共培养组(NRG1-BMSCs组)。采用倒置相差显微镜观察CG4细胞形态学变化;MTT法和细胞划痕实验检测CG4细胞活力和迁移能力;二氢乙啶(DHE)荧光探针检测CG4细胞活性氧(ROS)水平;比色法检测CG4细胞总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量;衰老相关β-半乳糖苷酶染色检测CG4细胞衰老变化;乳酸脱氢酶(LDH)法和calcein/PI双染法检测CG4细胞损伤和死亡情况;Western blot检测CG4细胞衰老相关蛋白p21和p53,以及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/AKT)信号通路相关蛋白表达。结果:成功分离培养BMSCs,并构建NRG1-BMSCs。与control组相比,OGD/R组CG4细胞突起短小、分枝少;细胞活力、迁移能力及T-AOC水平均显著降低(P<0.01);CG4细胞内ROS和MDA含量均显著升高(P<0.01);LDH漏出率、细胞衰老阳性率及死亡率均显著升高(P<0.01);衰老相关蛋白p21和p53表达显著增加(P<0.01);p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值显著降低(P<0.01)。与OGD/R组相比,NRG1-BMSCs组CG4细胞突起细长、分枝增多;细胞活力、迁移能力及T-AOC水平均显著增高(P<0.05);ROS和MDA含量显著降低(P<0.01);LDH漏出率、细胞衰老阳性率及死亡率均显著降低(P<0.01);p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值显著增加(P<0.01),衰老相关蛋白p21和p53表达均显著降低(P<0.01)。与OGD/R组相比,BMSCs组结果均呈现改善趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NRG1基因修饰的大鼠BMSCs在体外能够抑制OGD/R诱导的CG4细胞衰老及死亡,其作用机制可能与调节PI3K/AKT信号通路,减轻细胞氧化应激有关。 赵富生 陈君 杨国宏 符禹玄 张可心 李媛媛 武庚关键词:神经调节蛋白1 少突胶质细胞 PI3K/AKT信号通路 肝细胞生长因子对鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞的作用 2015年 目的观察肝细胞生长因子(HGF)在胚胎干细胞(ESC)向心肌细胞分化过程中的作用。方法制备小鼠胚胎成纤维细胞饲养层(FL),复苏的E14细胞接种在FL上,经直接悬浮法形成拟胚体(EBs),诱导组每孔加2m L胚体完全培养液再加15 ng/m L HGF,对照组只加入胚体完全培养液每孔2ml,免疫荧光染色激光共聚焦扫描显微镜下观察细胞心肌特异性蛋白Mlc-1v的表达,透射电子显微镜下观察分化细胞的超微结构特征。结果制备的FL细胞为长梭型,呈条索状或漩涡状排列,复苏在FL上的ES-E14细胞呈圆形、椭圆形克隆,经悬浮培养后即可见球形悬浮状EBs。诱导分化后第12d的细胞其心肌Mlc-1v蛋白表达阳性,透射电子显微镜下可见细胞核的周围有许多不规则成束的肌丝分布。结论肝细胞生长因子可以促进胚胎干细胞分化为心肌样细胞。 孙晓冬 刘光耀 冯春梅 杨清东 菜克瑞 穆寅东 杨国宏关键词:胚胎干细胞 心肌细胞 肝细胞生长因子 小鼠 骨髓基质干细胞的研究进展 被引量:1 2015年 骨髓基质干细胞具有取材简单、增殖速度快、抗原性小、培养过程中始终保持多向分化的潜能等特点,已经成为干细胞研究领域的热点,是最好的组织工程种子细胞之一。骨髓基质干细胞研究为组织器官的修复和替代提供了一个新的选择,具有广阔的临床应用前景。 杨国宏 张春军 赵富生 崔荣军 李月珍 董建将 刘志新 孙晓冬关键词:骨髓基质干细胞 种子细胞 体外扩增 软骨细胞 细胞生物学特性 抗原性 探究式教学法在组织学与胚胎学教学中的应用 2015年 评价组织学与胚胎学教学中应用探究式教学法的效果,探讨适合组织学与胚胎学特点的教学方法。方法随机选择我校12级临床专业两个班为研究对象,分别采用探究式教学法和传统教学法,对比分析两班考试成绩和问卷调查结果。结果采用探究式教学法的班级学生考试平均成绩(82±5.8)明显好于采用传统教学法班级的成绩(70±5.2),差异有统计学意义(P<0.05),问卷调查结果表明学生对探究式教学法效果的评价明显好于传统教学法。结论探究式教学法有利于提高组织学与胚胎学教学质量,有利于学生创新能力的培养,对贯彻素质教育有一定意义。 杨国宏 孙晓冬 刘俊峰 张春军 刘春玲 崔荣军 蔡克瑞 郭丽双关键词:探究式教学法 素质教育 组织学与胚胎学 Notch信号分子在ICA诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化的作用 被引量:4 2014年 目的观察Notch信号通路在淫羊藿苷(ICA)诱导胚胎干细胞(ESC)向心肌细胞分化过程中的作用。方法实验分为自然分化组、ICA诱导分化组及ICA+MW167(Notch信号抑制剂)组。相差显微镜下观察各组自发性节律收缩细胞出现情况的差别,免疫荧光染色观察各组细胞心肌特异性蛋白ANP的表达,RT-PCR检测各组细胞ANP mRNA的表达。结果 ICA+MW167组自发性节律收缩细胞数明显多于自然分化组与ICA诱导分化组,ICA+MW167组心肌细胞特异性蛋白ANPmRNA和蛋白的表达水平随培养时间延长逐渐增加,明显高于自然分化组与ICA诱导分化组。结论 Notch信号通路参与了ICA诱导ESC分化为心肌细胞的过程,抑制该信号通路可以明显提高心肌细胞特异性ANP基因及蛋白的表达,上调分化的心肌细胞比率。 马微 刘光耀 杨国宏 刘春玲 闫磊 黄永纯 孙晓冬关键词:胚胎干细胞 淫羊藿苷 三氧化二砷对卵巢癌细胞抑制作用及机制的研究 被引量:1 2007年 目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对卵巢癌细胞HO-8910体外生长的影响及其相关机制.方法:用倒置显微镜对细胞进行观察,用免疫细胞化学染色法检测p53基因表达.结果:(1)三氧化二砷作用浓度在0~12.0 μmol/L时,随着剂量的增加对卵巢癌细胞抑制作用增强.(2)卵巢癌细胞p53基因表达增强.结论:较高浓度三氧化二砷对卵巢癌细胞株HO-8910细胞有生长抑制作用并呈剂量-时间依赖效应 As2O3作用引起卵巢癌细胞HO-8910细胞凋亡的机制与p53基因表达增强有关. 杨国宏 张际绯 金华 刘志新关键词:三氧化二砷 卵巢癌 凋亡 骨髓基质干细胞在治疗脊髓损伤中的应用 被引量:1 2018年 骨髓基质干细胞(BMSCs)具有取材简单、增殖速度快、抗原性小和培养过程中始终保持多向分化的潜能等特点,已经成为干细胞研究领域的热点,是最好的组织工程种子细胞之一。近年研究发现这类细胞具有高度分化的潜能,能分化为神经细胞,为脊髓损伤(SCI)的修复提供了一条新的途径,具有广阔的临床应用前景。 杨国宏 潘艳明 赵富生 曹艳丽 张玉荣 孙晓冬 李月珍 梁军 刘志新 张春军关键词:骨髓基质干细胞 脊髓损伤 多向分化潜能