林敏 作品数:9 被引量:41 H指数:4 供职机构: 南华大学 更多>> 发文基金: 湖南省教育厅科研基金 湖南省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
DADS作用HL-60细胞后对细胞凋亡和周期相关基因表达的影响 第一部分DADS诱导HL-60细胞增殖抑制和凋亡作用目的:研究二烯丙基二硫/(diallyl disulfide, DADS/)对人白血病细胞HL-60的增殖、凋亡及其周期分布的影响。
方法:通过绘制不... 林敏关键词:二烯丙基二硫 白血病 HL-60细胞 凋亡 二烯丙基二硫 白血病 HL-60细胞 基因芯片 文献传递 DADS诱导人胃癌细胞周期阻滞相关基因的差异表达 被引量:9 2009年 目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人胃癌MGC803细胞G2/M周期阻滞相关基因表达的变化。方法MTT法、流式细胞术分别分析DADS对MGC803细胞的抑制作用与细胞周期分布的影响;功能基因芯片检测周期相关差异表达基因;Western blot、RT-PCR验证周期相关基因的表达。结果MTT法、流式细胞术证明DADS可明显抑制MGC803细胞增殖并诱导G2/M期阻滞。基因芯片结果显示,30 mg.L-1DADS作用MGC803细胞4 h后,表达上调的基因有CDC45L、CDK5R1、p21、CUL4A、GADD45α、RAD17、TP53,下调的基因是ANAPC5、ATR、BRCA1、CCNA2、CCNB2、CCNE1、CCNE2、CDC16、CDC6、CDK5RAP1、GTF2H1、MCM5、RAD9A、RGC32。RT-PCR显示30 mg.L-1DADS处理MGC803细胞4、8、12 h后,p21、GADD45α时间依赖性的表达增强(P<0.05),CyclinB1呈时间依赖性的表达降低(P<0.05)。TP53在4、8、12 h后与对照组比较表达明显增强(P<0.05)。Western blot结果表明,30 mg.L-1DADS作用MGC803细胞6、12、24 h后,p53、GADD45α、p21蛋白表达上调,CyclinB1蛋白表达下调(P<0.01)。结论DADS诱导人胃癌MGC803细胞G2/M周期阻滞是由多基因协同作用的结果,可能通过两种途径共同调节完成的。 黄炎 姜浩 周建国 王莉 陆丽峰 石莺 唐海林 林敏 凌晖 苏琦关键词:二烯丙基二硫 人胃癌MGC803细胞 基因芯片 二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用性研究 苏琦1 何洁1 易岚1 谭晖1 凌晖1 黄卫国1 赵洁 吉晓霞 林敏 刘芳1 夏红 二烯丙基二硫诱导人白血病细胞分化与凋亡的应用研究首次发现:1.小剂量DADS可诱导人白血病HL-60细胞分化,效果与ATRA相同。2.DADS诱导HL-60细胞分化差异基因CD11b、P21WAF1、STAT1、Calm...关键词:关键词:白血病 细胞凋亡 基因表达 EMS1蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义 被引量:4 2008年 背景与目的:研究表明EMS1(chromosome eleven,band q13,mammarytumour and squamous cell carcinoma-associated gene1)与多种恶性肿瘤的发生、发展及转移相关。本研究旨在探讨EMS1蛋白在胃癌、胃上皮内瘤变和正常胃粘膜组织中的表达。方法:采用免疫组化SP法,分别检测20例正常胃粘膜、38例胃上皮内瘤变和146例胃癌组织中EMS1蛋白的表达。结果:EMS1蛋白表达定位于细胞浆;正常胃粘膜EMS1蛋白阳性率20.0%(4/20),胃上皮内瘤变中阳性率68.4%(26/38),胃癌中阳性率89.7%(131/146);EMS1蛋白在胃癌中的表达高于胃上皮内瘤变及正常胃粘膜(P<0.001),胃上皮内瘤变与正常胃粘膜差异亦具有显著性(P<0.001)。早期胃癌阳性率为60.9%(14/23),低于进展期胃癌的95.1%(117/123),差异有统计学意义(P<0.001);伴淋巴结转移组EMS1蛋白阳性率为96.8%(91/94),与无淋巴结转移组的77.0%(40/52)相比差异有显著性(P<0.001);而与患者性别、年龄以及肿瘤大小、分化无关。结论:EMS1蛋白高表达与胃癌发生、淋巴结转移及临床分期有关。 李晓杰 林敏 刘重元 谢海龙关键词:胃肿瘤 免疫组化 DADS诱导人白血病细胞HL-60凋亡的流式细胞术检测 2009年 目的运用流式细胞术检测二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞凋亡的作用。方法实验分对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养,进行细胞形态学观察,应用流式细胞术检测凋亡率、早期凋亡细胞以及caspase-3活性。结果DADS诱导前后,HL-60细胞形态学发生明显改变,PI单染法检测结果:随着不同浓度DADS作用HL-60细胞24 h,HL-60细胞出现明显亚二倍峰,细胞周期也发生了相应的改变;Annexin V/PI双染法检测结果:10 mg/L DADS作用HL-60细胞4、8、12和24 h后,早期凋亡细胞显著增加,具有明显的时间依赖性(P<0.05);间接免疫荧光流式细胞术结果显示在DADS诱导HL-60细胞凋亡过程中有caspase-3的活化,且与作用时间呈依赖关系。结论流式细胞术检测结果表明,DADS能有效诱导HL-60细胞凋亡。 易岚 林敏 吉小霞 贺庆芝 李国庆 唐国华 苏琦关键词:流式细胞术 人白血病细胞 DADS 凋亡 二烯丙基二硫对人白血病HL-60细胞凋亡启动过程的影响 被引量:5 2009年 背景与目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)作为一种抗肿瘤物质日益受到关注。本研究在建立DADS启动HL-60细胞凋亡模型的基础上,研究DADS启动人白血病HL-60细胞凋亡的相关蛋白。方法:提取未处理HL-60细胞和3.6mg/LDADS处理2d的HL-60细胞的总蛋白,双向电泳分离细胞总蛋白质,绘制图谱,PDQuest软件分析,切割差异蛋白质,进行质谱分析、生物信息学分析,Western blot以及RT-PCR验证部分差异蛋白。结果:对照组和处理组蛋白质表达量相差2倍以上的点有29个,其中22个上调,7个下调。质谱分析和数据库搜索鉴定了9个蛋白质点,其中7个蛋白质点有意义,这些蛋白功能分别与信号转导、基因转录及调控、细胞骨架、细胞新陈代谢等有关。Western blot结果显示DADS处理后Rac2(ras-related C3 botulinum toxin substrate2)蛋白表达明显上调,RT-PCR显示DADS处理后Rac2表达增强。结论:Rac2等蛋白参与了DADS诱导的HL-60细胞凋亡,但其具体机制还有待于进一步研究。 易岚 曾希 谭晖 葛玲 吉小霞 林敏 苏琦关键词:DADS 白血病 HL-60细胞 蛋白质组学 二烯丙基二硫作用于HL-60细胞后凋亡相关基因的差异表达 被引量:17 2007年 背景与目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对多种肿瘤细胞有促凋亡作用,白血病是儿童最常见的恶性肿瘤,近期研究提示DADS能够在体外诱导人白血病细胞发生凋亡,但其具体作用机制尚不清楚。本实验旨在研究DADS诱导人白血病细胞HL-60凋亡的生物学效应,并探讨其分子机制。方法:运用DNA含量分析、AnnexinⅤ/PI双标记流式细胞仪、DNA琼脂糖凝胶电泳以及透射电子显微镜形态学观察等方法来证实细胞凋亡。通过基因芯片检测60μmol/L DADS作用于HL-60细胞4h后凋亡相关基因的表达谱,采用RT-PCR技术验证上调基因Fas-L和下调基因Bag-1。结果:15、30、60和120μmol/L DADS作用于HL-60细胞24h后,DNA含量分析出现了明显的亚二倍体峰;60μmol/LDADS作用4、8、12、24h后,Annexin Ⅴ/PI双标流式细胞仪检测表明早期凋亡细胞显著增加。60μmol/LDADS作用24h后,在DNA琼脂糖凝胶上可见特征性的梯形条带。电子显微镜观察到细胞体积缩小,核浓缩和凋亡小体形成等典型的形态学改变。通过基因芯片检测发现,60μmol/L DADS作用4h后有8个凋亡相关基因表达差异显著,选择其中Fas-L和Bag-1两个基因运用RT-PCR技术进行验证,其结果与基因芯片结果一致。结论:DADS能够诱导人白血病细胞HL-60凋亡,这可能是多个基因和多条信号转导通路共同作用的结果。 林敏 谢海龙 苏琦 周建国 谭晖 易岚 唐海林 黄炎 石莺关键词:白血病 HL-60细胞 凋亡 基因芯片 无义介导的mRNA降解与肿瘤 被引量:2 2006年 无义介导的mRNA降解(nonsense-m ed iated mRNA decay,NMD)能够选择性降解含有翻译提前终止密码子(prem ature translation term ination condon,PTC)的mRNA,从而防止对机体有害的截短蛋白(truncated pro-te ins)的产生,它是真核生物中广泛存在的一种高度保守的有效的监督机制。NMD与肿瘤发生发展过程中的基因突变有密切关系。 林敏 谢海龙 苏琦关键词:肿瘤 EMS1基因与肿瘤 被引量:5 2005年 EMS1基因(chromosom e eleven,band q13,m amm ary tumour and squamous cell carc inom a-assoc iated gene1)定位于人类染色体11q13。该基因编码产物cortactin(cortical actin-b ind ing prote in)是一种位于细胞皮质区的肌动蛋白结合蛋白,参与细胞骨架系统的调控,细胞外信号转导以及细胞黏附等过程。研究表明EMS1基因与许多肿瘤的侵袭和转移有关。 林敏 谢海龙 苏琦关键词:肿瘤