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鸡OC-116基因编码区真核表达载体的筛选及其Real-time PCR检测体系的优化: 2014年; 实验旨在比较鸡OC-116基因编码区在不同载体上的表达差异,筛选表达量相对较高的重组质粒,同时优化OC-116基因编码区的Real-timePCR体系;制备OC116-GFP、OC116-pcDNA、OC116(M1)-pcDNA和OC116(M1)-GFP4种质粒,分别转染CHO细胞,瞬时表达后制备cDNA、提取总蛋白;然后优化OC-116基因编码区的Real-time PCR体系,并分别通过Real-time PCR、Western blotting鉴定表达水平相对更高的重组质粒。结果表明:优化PCR产物中GC碱基的分布可以排除Real-time PCR反应中熔解曲线双峰问题;更换其他实验空间可以有效解决Real-time PCR反应中的疑似气溶胶污染;pcDNA3.1/myc-His(-)A表达载体诱导OC-116基因编码区翻译表达的能力比pEGFP-N1强;在两类真核表达质粒中,Kozak序列的引入均能明显增强OC-116基因编码区的转录以及翻译水平。结果提示,Real-time PCR反应中双峰熔解曲线以及气溶胶污染可以通过引物设计、更换实验环境进行解决;携带Kozak序列的OC-116(M1)-pcDNA重组质粒目标基因转录、翻译表达水平相对更高,可用于后续研究。; 王利王淑红刘长国; 关键词：熔解曲线

常规粳稻种子成熟度对种子活力的影响研究: 水稻（Oryza sativa）是主要的粮食作物之一，其种子质量的高低对农业增产丰收具有重要的意义，种子活力作为全面衡量种子质量的重要指标，受到种子科研工作者的广泛关注。在繁制种过程中，水稻自身遗传因素和环境条件对种子活...; 王利; 关键词：常规粳稻成熟度种子活力生理生化指标最佳收获期

蛋鸡OC-116基因的克隆和序列分析被引量：1: 2014年; 参考原鸡(G.gallus)OC-116编码基因序列(登录号:NM_204569.1)设计3对引物,特异性地从仙居鸡子宫组织中克隆OC-116编码基因的N端、中段和C端,测序鉴定后通过酶切连接获得家鸡OC-116的全长编码基因。根据本研究的测序结果,初步发现突变概率较高的碱基有:第1233位(A→G)、1336位(C→G)、1358位(T→G)、1391位(T→G)、1491位(T→G)、1754位(G→T)、1841位(T→C)、1843位(C→T)、1983位(C→T)和2057位(T→C);其中第1358,1754,1841,1983和2057位的碱基突变均为同义突变,第1233、1336、1391、1491和1843位是错义突变。而且突变碱基主要属于T:G颠换类型,其次是T:C转换类型。另外根据同源性分析,家鸡的OC-116编码基因在进化过程中很保守。总之,本研究已经从仙居鸡子宫组织中克隆到OC-116编码基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础。; 王淑红王利刘长国; 关键词：克隆突变位点

鸡OC-116翻译后糖胺聚糖修饰相关酶的初步鉴定: OC-116蛋壳基质蛋白是蛋壳形成过程中重要的有机基质组分，OC-116蛋壳基质糖胺聚糖酶有多种功能，但是其在蛋壳形成过程中的具体表达机制尚无研究报道。本研究筛选鸡OC-116编码基因真核表达载体，使用真核细胞表达重组子...; 王利; 关键词：原代细胞培养

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王利