王德富
- 作品数：82 被引量：139H指数：7
- 供职机构：山西农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 草苁蓉酒发酵工艺研究
- 2019年
- 以大米、糯米、草苁蓉为原料,通过单因素试验和正交试验研究了草苁蓉粉用量、酒曲添加量和发酵时间对草苁蓉酒感官评分的影响。结果显示,用大米发酵时,当酒曲接种量为0.12%、草苁蓉粉末的添加量为0.2%、发酵时间为2.0 d时,所得发酵液感官评价最高;而以糯米发酵时,当酒曲接种量为0.12%、草苁蓉粉末的添加量为0.8%、发酵时间为2.0 d时,所得发酵液感官评价最高。由此得到的草苁蓉酒色泽呈亮黄色,澄清度高,甜度适宜。
- 龙丹丹王德富申少斐牛颜冰
- 关键词：草苁蓉发酵甜酒感官评价
- 一种牡丹玫瑰保健饮料及其制备方法
- 本发明公开了一种牡丹玫瑰保健饮料，由以下质量百分比的原料组分制成：中药混合提取液15～40％、白砂糖5～26％、柠檬酸0.2～0.6％、β环状糊精0.03％、余量为水。本发明还公开了上述牡丹玫瑰保健饮料的制备方法，包括以...
- 王德富龙丹丹牛颜冰申少斐崔丽艳王疆然王燕花
- 文献传递
- 一种响应面优化黄芪茎叶总黄酮的提取方法
- 本发明公开了一种响应面优化黄芪茎叶总黄酮的提取方法，包括以下步骤：S1、预处理；S2、混配；S3、超声波连续浸提：S3‑1：将步骤S2中得到的黄芪茎叶粗提溶液置于超声波反应器中，在100W的超声功率下、温度为40‑80℃...
- 王德富牛颜冰杨智明张学治崔丽艳杜江吴永娜贾彬良
- 文献传递
- 栽培黑果枸杞活性成分生物合成关键基因克隆及表达分析被引量：1
- 2020年
- [目的]本文旨在对不同生长期花色苷和原花青素含量及关键酶基因表达分析,为从分子生物学水平确定黑果枸杞最佳采收期提供理论依据,同时对生物合成途径中关键酶基因进行克隆,为揭示黑果枸杞花色苷和原花青素的生物合成机制以及利用基因工程技术进行黑果枸杞靶向育种奠定基础。[方法]分别利用pH示差法和香草醛-盐酸法测定不同时期黑果枸杞花色苷和原花青素含量;通过RT-PCR技术扩增4种关键酶基因LrDFR、LrANS、LrLAR和LrANR的cDNA全长序列,并进行生物信息学分析;利用qRT-PCR分析关键酶基因在黑果枸杞果实不同发育时期的表达情况。[结果]黑果枸杞果实花色苷在黑果成熟期含量最高(6.08 mg·g^-1 DW),原花青素在半紫半黑果期含量最高(22.3 mg·g^-1 DW);克隆得到4种关键酶基因的序列全长分别为1140 bp、1251 bp、1002 bp和1017 bp,分别编码379、416、333和338 aa的蛋白质,序列分析表明4种基因所编码氨基酸均具有所属蛋白家族的典型特征。[结论]花色苷在黑果成熟期含量最高,原花青素在半紫半黑果期含量最高,且随着果实发育和花色苷含量的增加,LrDFR和LrANS表达水平也逐渐上升,而LrLAR和LrANR则呈先上升后下降的表达模式;当黑果枸杞用于原花青素提取时,可适当提前采收期;研究结果为从分子生物学水平确定黑果枸杞最佳采收期提供理论依据,也为黑果枸杞花色苷与原花青素生物合成机制的揭示奠定基础。
- 王德富杨锋崔丽艳龙丹丹李玲玉申少斐牛颜冰
- 关键词：黑果枸杞花色苷原花青素基因克隆
- 菊花R病毒杭白菊分离株全基因组序列测定与分析被引量：4
- 2020年
- 杭白菊作为著名的中药"浙八味"之一,种植规模和产区不断扩大,但其病毒病的发生也日益严重,对其产量和品质造成严重影响。本研究利用双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)和非序列依赖PCR扩增(sequence-independent amplification,SIA)等方法,对感病杭白菊病原物进行鉴定,为杭白菊病毒病原的检测构建一套快速和简便的方法。结果表明,感病杭白菊被菊花R病毒(Chrysanthemum virus R,CVR)侵染,将其命名为CVR-TX。通过对其全基因组进行序列扩增与分析,获得其全长基因组为8872 bp,编码6个ORF,具有Carlavirus属病毒的典型特征。基于全基因组核酸序列以及复制酶、外壳蛋白氨基酸的序列比对发现,CVR-TX与CVR-BJ同源性最高,分别为85.5%、96.0%和96.3%;与Carlavirus属其他病毒同源性分别在48.2%~54.4%、46.9%~55.3%和36.8%~59.5%,因此CVR被确定为一种新的Carlavirus属病毒。系统进化分析表明,基于全长基因组、复制酶(replicase)基因和外壳蛋白(coat protein,CP)基因与CVR-BJ聚为一簇,亲缘性最近。本研究获得了CVR-TX的全长基因组,丰富了CVR的基因组信息,通过生物信息学分析明确其种属关系和区域变化情况,从而为建立CVR可靠灵敏的分子检测手段和有效的防控措施提供理论基础。
- 裴燕妮咸珅齐永红张丽王德富牛颜冰
- 关键词：杭白菊全基因组序列
- 一种三重浓度梯度微流控芯片装置及其应用
- 本发明公开了一种三重浓度梯度微流控芯片装置及其应用。属于微流控芯片技术领域。包括具体的三重浓度梯度微流控芯片装置结构。本发明证明了三重浓度梯度微流控芯片装置在宽流速范围内保持稳定有效的线性浓度，满足研究不同剂量的候选药物...
- 申少斐刘亚君王德富牛颜冰张芳娟
- 油菜花叶病毒山西地黄分离物的全基因组序列测定与分析被引量：6
- 2016年
- 采用双链RNA（double-stranded RNA,dsRNA）技术和非序列依赖PCR扩增（sequence-independent amplification,SIA）方法对感病地黄进行分子鉴定,并测定油菜花叶病毒（Youcai mosaic virus,YoMV）山西地黄分离物（YoMV-SX）的基因组全序列。序列测定及分析发现侵染地黄的病毒为油菜花叶病毒（Youcai mosaic virus,YoMV）。获得YoMV-SX（Gen Bank登录号JX422022）全长为6 304 nt,5＇UTR长度为68 nt,3＇UTR长度为236 nt,含有4个开放阅读框（open reading frame,ORF）。全序列核苷酸一致性分析显示Yo M V-SX与Tobamovirus亚组Ⅲ中分离物的一致性为90.7%-96.0%,与同属亚组Ⅰ和Ⅱ的一致性仅为50.2%-63.3%。全序列系统进化分析表明,YoMV-SX与YoMV-Wh形成一个独立分支,亲缘关系最近。这是YoMV侵染地黄的首次报道。
- 王德富张西梅杨锋牛颜冰
- 关键词：地黄
- 不同花色黄芩中dfr基因的克隆及时空表达分析被引量：5
- 2021年
- 二氢黄酮醇-4-还原酶(Dihydroflavonol-4-reductase,Dfr)是类黄酮生物合成途径中调控花青素和原花青素合成的关键酶。为探究dfr基因在同一生态环境下不同花色黄芩中的差异,以白色、紫红色和紫色3种花色的黄芩花瓣cDNA为模板,基于同源克隆和RACE技术从中克隆得到3个完整的dfr基因全长序列,分别命名为Sbdfr1、Sbdfr2、Sbdfr3,并采用生物信息学软件对其相关结构进行分析。结果表明,3个Dfr蛋白均存在高度保守的NADPH结合位点和底物特异性结合位点。系统进化分析表明,三者与已知粘毛黄芩(GenBank登录号:ACV49882.1)聚为一簇,亲缘关系最近;关键结构域和3D模型分析发现3个Dfr蛋白表面催化活性区域均存在差异,其独特的结构特性为研究Dfr底物特异性提供了有利条件。qRT-PCR分析显示,dfr在3种花色黄芩盛花期除根外的其他组织中均有不同程度的表达;在花瓣发育进程中,dfr基因在白花和紫花黄芩中的表达量均呈上升趋势,在紫红花黄芩中的表达量先缓慢上升后下降,之后再迅速上升至最大值。研究结果为进一步深入探究Dfr底物选择性的机理及功能提供一定的理论基础,对阐明黄芩花色差异变化的分子机理具有重要的科学研究价值。
- 王疆然王玉芬王舒婷张芳娟牛颜冰王德富
- 关键词：黄芩基因克隆
- 锦葵脉明病毒中国蜀葵分离物cp基因序列分析被引量：4
- 2017年
- 本研究利用双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)和非序列依赖性PCR扩增技术(sequence-independent amplification,SIA)对表现出条斑症状的感病蜀葵进行了病原鉴定,结果发现侵染蜀葵的病原为锦葵脉明病毒(Malva vein clearing virus,MVCV),这是锦葵脉明病毒在国内首次报道。为进一步明确锦葵脉明病毒中国蜀葵分离物(MVCV-AR)的来源及进化关系,克隆获得其外壳蛋白(coat protein,cp)基因(Gen Bank登录号为KX619649)。通过与其他MVCV分离物的核苷酸及氨基酸序列比对分析可知,MVCV-AR与Mexico的tomato分离物(FJ561293)的核苷酸同源性最高为90.5%;与来自Italy的DS-Ba-01分离物(FM 212972)的氨基酸同源性最高为98.3%。系统进化分析表明,MVCV-AR与DS-Ba-01分离物聚为一簇,形成独立的分支。
- 杨锋牛二波王德富牛颜冰
- 关键词：蜀葵病原鉴定
- 基于微流控芯片的牡丹籽粕低聚茋类化合物抗癌活性的研究被引量：4
- 2019年
- 为探究油用牡丹籽粕低聚茋类化合物对人源性乳腺癌细胞(MCF-7)活性的影响,通过设计制作一种浓度梯度微流控芯片,利用AO/PI双染鉴定细胞在不同质量浓度低聚茋类化合物诱导下的活性情况。结果表明:细胞在药液(低聚茋类化合物)诱导下,呈明显皱缩和裂解;在药液质量浓度梯度作用下,芯片每个培养腔内细胞活力不同;进行细胞计数可知,药液质量浓度为0. 5 mg/mL时,细胞活力约50%;药液质量浓度为0. 75 mg/mL时,细胞活力16. 17%;药液质量浓度达到1 mg/mL时,培养腔内几乎无正常细胞。该方法实现了对药液质量浓度梯度影响细胞活性的实时监测和观察,为微流控芯片技术与油用牡丹副产物抗癌活性研究的结合提供了一种新思路和新方法。
- 寇丽莎齐永红张璇申少斐王德富牛颜冰
- 关键词：微流控芯片浓度梯度细胞活性
