王晓波 作品数:18 被引量:63 H指数:5 供职机构: 北京中医药大学 更多>> 发文基金: 国际科技合作与交流专项项目 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
莪术油对体外培养A549细胞周期及组织蛋白酶水平的影响 目的:肺纤维化(PF)是由多种病因引起的具有相似病理过程的一类弥漫性肺疾病,其病理特征表现为早期肺泡结构破坏和弥漫性肺泡炎,继而出现细胞外基质(ECM)过度沉积,并逐渐发展为弥漫性肺间质纤维化,造成肺功能障碍,病人多死于... 王晓波关键词:肺腺肿瘤 生化药理 莪术油对人肺腺癌细胞A549增殖的影响 被引量:1 2011年 目的探讨莪术油对人肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用。方法体外培养肺腺癌细胞A549,MTT比色法测定莪术油对A549细胞作用24、48、72 h后抑制率;流式细胞术分析莪术油对A549细胞作用24 h后细胞周期的变化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测莪术油对A549细胞作用24 h后细胞凋亡与坏死情况。结果莪术油对A549细胞增殖的抑制率随时间延长明显升高,随药物浓度增加抑制作用增强;莪术油对A549细胞作用24 h后,细胞周期停滞在G0/G1期,阻止其进入S期;细胞的早期凋亡、晚期凋亡和坏死比例随着莪术油浓度的增加而增加,且坏死细胞的比例高于凋亡细胞。结论莪术油对A549细胞的增殖具有抑制作用,并呈时间、浓度依赖,其作用是通过阻滞细胞周期及诱导凋亡和坏死来实现的。 王晓波 牛建昭 崔巍 刘飒 杨长福 赵丕文 唐炳华关键词:莪术油 人肺腺癌细胞A549 增殖 细胞周期 莪术油对肺腺癌A549细胞周期及组织蛋白酶K表达的影响 被引量:19 2010年 目的:探讨莪术油对A549细胞增殖抑制作用及组织蛋白酶K表达的影响。方法:MTT法观察莪术油对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期阻滞;Western blot检测组织蛋白酶K的表达情况。结果:莪术油作用后①MTT法结果显示莪术油在60mg·L-1~200mg·L-1对A549细胞增殖有抑制作用,IC50随作用时间的延长显著前移。②流式细胞术结果出现凋亡峰,与未处理组细胞相比,给药组细胞G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低。③Western blot结果显示,莪术油处理细胞24h后,组织蛋白酶K表达明显上调,100mg·L-1达最大值。结论:莪术油能抑制肺腺癌A549细胞增殖,阻滞细胞周期的作用,其机制可能与上调组织蛋白酶K表达水平有关。 杨长福 李亚东 牛建昭 王晓波 黄春芳 唐炳华 赵丕文 刘霞 王继峰关键词:莪术油 A549细胞 细胞周期 组织蛋白酶K 姜黄素抗C_(57BL/6)小鼠肺纤维化与CathepsinK相关性研究 被引量:3 2012年 目的:探讨姜黄素抗C57BL/6小鼠肺纤维化分子机制。方法:博来霉素气管注射造小鼠肺纤维化模型,随机分组:对照组(气管内注入0.1mL生理盐水),模型组(气管内注入0.025U博来霉素),姜黄素组(气管内注入0.025U博来霉素);造模第2天,对照组和模型组给予生理盐水灌胃,姜黄素组给予200mg/kg/d姜黄素灌胃,分别于造模后第7、14、28天取材。采用Mallory染色观察肺组织胶原表达变化;应用免疫组化检测Cathepsin K蛋白的表达,经图像分析各组之间的差异;在免疫组化的基础上,Re-al Time RT-PCR,Western-blot进一步验证Cathepsin K mRNA及蛋白在各组之间表达的差异。结果:Mallory染色结果显示姜黄素组、模型组与对照组比较胶原表达都比对照组高,姜黄素组与模型组比较胶原表达减少;姜黄素组、模型组与对照组比较,Cathepsin K表达都有不同程度增加;但姜黄素组与模型组比较Cathepsin K蛋白表达显著增加,其中第14天(P=0.006);第7天(P=0.015);28天(P=0.027);Real Time RT-PCR分析CathepsinK mRNA表达,姜黄素组与模型组进行比较发现,姜黄素组比模型组明显增加,第7天(P=0.047),第14天(P=0.001),第28天增加不明显(P=0.053)。结论:姜黄素通过增加Cathepsin K的表达从而降解胶原而实现抗纤维化作用。 黄春芳 李亚东 沈俊辉 崔向清 李彧 王晓波 王继峰 牛建昭关键词:姜黄素 肺纤维化 CATHEPSIN 鹌鹑血清中脂类代谢相关生化指标正常参考值的测定 被引量:7 2012年 目的建立鹌鹑血清中脂类代谢相关生化指标的正常参考值。方法饲养40只鹌鹑(5周龄,体质量150~200 g,雌雄各半),动态观察其血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量变化,其中TG采用终点法/GPO-PAP Method检测,TC采用终点法检测,HDL和LDL采用直接测定法检测。结果雄性和雌性鹌鹑血清中TG、TC、HDL和LDL值存在差异,且差异有统计学意义;不同取血时间,雄性鹌鹑血清中脂类代谢指标比较稳定,确定其参考值范围,TG为1.15~1.55 mmol/L、TC为4.18~5.30 mmol/L、HDL为2.38~3.90 mmol/L、LDL为0.63~2.07 mmol/L。结论初步建立了雄性鹌鹑血清中脂类代谢相关生化指标的正常参考值。 刘珍清 王晓波 刘颖 朱文静关键词:鹌鹑 总胆固醇 高密度脂蛋白 清开灵注射液致RBL-2H3细胞脱颗粒过程与钙离子相关性研究 被引量:3 2013年 目的探讨清开灵注射液致RBL-2H3细胞脱颗粒与钙离子的相关性。方法选取RBL-2H3细胞系为研究对象,实验设正常组、阳性对照组和药物处理组,采用MTT比色法确定清开灵注射液IC50;配制一定浓度的清开灵注射液并与细胞孵育30 min后,采用流式细胞术测定细胞脱颗粒率和细胞内钙离子荧光强度的变化;采用激光扫描共聚焦显微镜技术检测细胞内钙离子荧光强度以及细胞骨架的变化。结果剂量为40 mL/L的清开灵注射液可引起RBL-2H3细胞脱颗粒,同时伴随细胞内钙离子荧光强度增加,细胞骨架发生变化。结论清开灵注射液致RBL-2H3细胞脱颗粒过程与钙离子相关。 王晓波 韩静 刘珍清 毛颖秋 卢建秋关键词:清开灵注射液 RBL-2H3细胞 钙离子 细胞骨架 组织蛋白酶与肺纤维化 肺纤维化是由多种病因引起的具有相似病理过程的一类弥漫性肺间质疾病。其发生机制复杂多样,且尚未完全阐明。近年来研究发现组织蛋白酶在肺纤维化的过程中起了非常重要的作用。鉴于此,本文就组织蛋白酶在肺纤维化过程中的作用以及调节等... 王晓波 牛建昭 王继峰 杨长福 唐炳华关键词:组织蛋白酶 肺纤维化 溶血对大鼠生化指标的影响及其结果校正关系的探讨 2014年 目的 探讨不同溶血程度对生化指标的影响,并对溶血与生化指标变化值的相关性进行回归分析.方法 用全自动生化分析仪测定大鼠的不同溶血度血清样本中磷(P)、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、总蛋白(TP)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)生化指标值.结果 轻度溶血对生化指标测定值影响不大;中度和重度溶血对P、UA、TC、TP、ALP、BUN、ALB的指标测定值有影响,中度和重度溶血血清与正常血清生化指标测定值之间的差异有统计学意义(P<0.05);重度溶血对TG的指标测定值有影响,重度溶血血清与正常血清生化指标测定值之间的差异有统计学意义(P<0.05);不同程度溶血对GLU的测定值影响不大,差异无统计学意义(P>0.05).结论 不同程度的溶血对生化常规指标值产生不同程度的影响,不同生化指标的检测结果可采用相关回归方程进行校正. 刘珍清 王晓波 刘颖关键词:溶血 生化指标 姜黄素上调博来霉素诱导肺纤维化C_(57BL/6)小鼠CathepsinK表达 被引量:5 2011年 目的:研究姜黄素对博来霉素诱导肺纤维化C57BL/6小鼠Cathepsin K表达的影响。方法:博来霉素气管注射造小鼠肺纤维化模型,随机分为对照组(气管内注入0.1mL生理盐水)、模型组(气管内注入0.025U博来霉素)、姜黄素组(气管内注入0.025U博来霉素);造模后第2d,对照组和模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠生理盐水灌胃,姜黄素组给予200 mg.kg-1.d-1姜黄素灌胃,分别于造模后第7、14、28d取材。采用H&E及Mallory染色观察肺组织病理学变化;应用免疫组学Cathepsin K蛋白的表达,经图像分析各组之间的差异。结果:姜黄素组、模型组与对照组比较都有不同程度的炎症及纤维化病灶,但是姜黄素组与对照组比较炎症及纤维化程度明显减轻;姜黄素组、模型组与对照组比较Cathepsin K表达都有不同程度增加,但是姜黄素组与对照组比较Cathep-sin K表达显著增加。结论:姜黄素可能是通过增加Cathepsin K的表达从而降解胶原而实现抗纤维化作用。 黄春芳 张东伟 王晓波 孙晓芳 刘霞 陈朝青 王继峰 牛建昭关键词:姜黄素 肺纤维化 流式细胞术检测细胞周期实验样品制备条件的研究 被引量:7 2013年 目的 优化细胞周期测定实验样品制备条件.方法 T47D细胞株经乙醇固定后,加入RNase A消化细胞内RNA,加入碘化丙啶(PI)标记DNA,用流式细胞仪检测细胞内DNA含量,ModFit软件分析细胞周期.采用此方法研究样品制备过程中固定时间(30 min,4 h,24 h,48 h,7天和14天)和RNase A对细胞周期检测结果的影响.结果 固定不同时间,G0/G1期、S期和G2/M期细胞比例变化范围分别为(57.79±0.90)%~(60.58±1.90)%,(20.16±1.55)%~(24.07±1.04)%和(17.32±0.62)%~(19.45±0.86)%,各组间差异无统计学意义(P>0.05);变异系数的变化范围为(5.77±0.24)%~(7.72±0.28)%,各组间差异无统计学意义(P>0.05);无RNase A组与有RNase A组相比,G0/G1期的细胞比例差异无统计学意义(t=1.59,P>0.05),S期、G2/M期的细胞比例和变异系数的差异有统计学意义(P值均小于0.01,t值分别为-9.46,12.78和-7.99),S期升高,G2/M期降低,变异系数增大.结论 ①细胞周期测定实验样品处理过程中,细胞固定30 min后即可上机测试,且细胞固定后的保存时间可长达两周;②RNase A对细胞周期测定实验结果影响较大. 王晓波 刘珍清 崔巍 刘颖关键词:细胞周期 RNASE