王瑞
- 作品数：35 被引量：82H指数：5
- 供职机构：广西水产研究所更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划国家科技支撑计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 重组罗非鱼Hsp70蛋白ATPase和抗原多肽结合活性研究被引量：1
- 2013年
- 热休克蛋白（Heat shock proteins,HSPs）是一类高度保守的蛋白,可被各种病理性和生理性应激诱导,保护组织免受应激带来的损伤。其中Hsp70为HSPs中最保守、最重要、家族成员最多的一族,在大多数生物中含量也最多,在应激反应中也最敏感。Hsp70具有分子伴侣、抑制细胞凋亡、调节细胞增殖、免疫功能、使生物获得耐热性、抗氧化等多种生物学功能,成为HSPs中最受关注、研究最深入的一类。
- 王瑞李莉萍黄婷梁万文甘西施金谷雷爱莹罗洪林黄维义李健陈明
- 关键词：罗非鱼免疫佐剂免疫增强剂
- 鱼用口服疫苗免疫佐剂研究进展被引量：4
- 2012年
- 免疫佐剂是一种先于或与抗原同时使用,能够增强机体的非特异性免疫能力及相应抗原的免疫原性,但其本身不具备抗原特性的物质。文章对鱼用口服疫苗免疫佐剂的作用机理以及霍乱毒素(CT)、大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)、细胞因子等几种主要鱼用口服疫苗免疫佐剂的应用情况进行综述,发现鱼用口服疫苗免疫佐剂的研究应用过程中仍存在作用机理研究相对滞后、忽略肠道黏膜免疫机理特殊性、使用成本过高、安全性等问题,建议今后加强对鱼类肠道黏膜免疫机理以及口服疫苗免疫佐剂作用机理的研究,优化口服疫苗免疫佐剂的免疫剂量和程序,降低生产成本,研发出更为广泛、廉价的口服疫苗免疫佐剂,提高其安全性等,以促进水产养殖业的健康发展。
- 黄钧施金谷陈明黄艳华温华成彭民毅王瑞梁万文
- 关键词：免疫佐剂霍乱毒素细胞因子
- 罗非鱼感染链球菌后hsp70基因表达研究被引量：9
- 2010年
- 采用实时荧光定量RT-PCR检测吉富罗非鱼感染链球菌后脑和脾脏中热休克蛋白70(hsp70)基因表达情况,并按2-△△CT分析方法、使用7500 Software v2.0.1进行分析。结果表明,罗非鱼感染链球菌48 h内,hsp70 mRNA在脑组织表达变化不明显,而在脾脏中表达升高,攻毒感染24 h后hsp70 mRNA表达量是正常脾脏组织的5.5倍多,说明hsp70在罗非鱼链球菌感染的免疫反应中具有重要作用。研究结果为进一步分析hsp70在罗非鱼感染链球菌过程中所行使的功能奠定基础。
- 王瑞黄艳华陈明梁万文黄钧
- 关键词：罗非鱼HSP70基因链球菌实时荧光定量RT-PCR基因表达
- 一种鱼类无乳链球菌疫苗候选菌株筛选方法
- 本发明公开了一种鱼类无乳链球菌疫苗候选菌株筛选方法，通过该方法对罗非鱼无乳链球菌病流行菌株分离与保种、流行菌株鉴定与病原库建立、流行菌株PFGE基因型分析、各PFGE基因型代表菌株毒力测定、各PFGE基因型代表菌株免疫原...
- 陈明王瑞李莉萍甘西梁万文黄婷雷爱莹罗永巨李健陈福艳
- 罗非鱼二联链球菌灭活疫苗的制备方法
- 本发明公开了一种罗非鱼二联链球菌灭活疫苗及其制备方法，该疫苗是将从发病罗非鱼体内分离出的海豚链球菌和无乳链球菌分离纯化、液体活化培养、生物反应器的扩大培养、培养物的灭活和洗涤，以及将灭活完全的菌体按等比例混合制成罗非鱼二...
- 陈明梁万文甘西王瑞雷爱莹李莉萍李超陈晓汉余晓丽徐增辉
- 罗非鱼热休克蛋白70在毕赤酵母中的表达与纯化被引量：3
- 2011年
- 以尼罗罗非鱼血液mRNA反转录获得编码罗非鱼Hsp70完整cDNA,重组构建罗非鱼真核表达载体pPIC9K/rtHsp70;在毕赤酵母Pichia pastoris KM71中表达重组罗非鱼的热休克蛋白70(rtHsp70),对表达上清液进行SDS-PAGE及Western blot分析;采用亲和层析、HiTrap Desalting预装柱脱盐纯化目的蛋白。结果表明:克隆至pMD载体上的基因与目的基因完整编码区序列完全一致;诱导表达上清液经SDS-PAGE及Western blot分析,上清液中蛋白条带大小与目的蛋白相对分子质量大小一致;每升诱导上清液可以获得约2 mg纯化蛋白。本研究中获得的rtHsp70毕赤酵母工程菌及纯化的rtHsp70为后期rtHsp70-肽疫苗研究奠定了基础。
- 陈明王秋华王瑞黄婷梁万文李超雷爱莹陈福艳余晓丽甘西
- 关键词：基因表达毕赤酵母
- 六须鲶暴发性败血症病原菌的分离与鉴定被引量：2
- 2011年
- 从患暴发性败血症的六须鲶Silurus soldatovi身上分离到致病菌株(FY-024),用常规细菌培养方法对其观察,并进行生理生化特性测试。结果表明,该致病菌均符合鲶爱德华氏菌Edwardsiella ictaluri特征。为了进一步确认该致病菌的分类地位,对其进行了16S rRNA基因序列分析、遗传距离距阵及系统发育树分析,共扩增出1 417 bp基因片段(GenBank登录号为GQ924477)。系统发育结果显示,菌株FY-024与鲶爱德华氏菌的16S rRNA基因同源性达99.6%～99.9%,聚为同一分支,进一步确认致病菌是鲶爱德华氏菌。药敏试验和毒力试验结果显示,菌株FY-024对环丙沙星、恩诺沙星药物高度敏感,按Reed和Muench氏法计算LD50=1.08×106 cfu/尾。
- 陈福艳陈明黄婷张彬杨家坚雷爱莹王瑞梁万文
- 关键词：六须鲶暴发性败血症
- 我所罗非鱼链球菌病疫苗喜获“中国水产风云榜年度技术奖”
- 2011年
- 12月23日“中国水产业年度风云榜”颁奖大会在广州举行。我所罗非鱼链球菌病疫苗喜获“中国水产风云榜年度技术奖”。
- 王瑞
- 关键词：链球菌病水产业罗非鱼疫苗
- 尼罗罗非鱼外周血白细胞总RNA的分离及反转录验证
- 2010年
- 应用Trizol一步法对尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）外周血白细胞总RNA提取方法进行优化,通过β-ac-tin基因反转录对所分离到的总RNA进行质量验证,并对mRNA的冻干浓缩进行了探讨,确定了一套快速、高效的尼罗罗非鱼外周血白细胞总RNA分离和mRNA浓缩体系。结果显示：获得的总RNA纯度较高,OD260/OD280均在1.9-2.0之间;甲醛变性电泳显示,总RNA完整性良好,28S与18S比值为2∶1;总RNA的分离量与起始白细胞量成正比,每毫升Trizol最大裂解量为1×10^8个白细胞,可得到总RNA量约为90μg;总RNA的分离量在前四个小时随着沉淀时间的增长而增加,并成功进行了β-actin基因的反转录。mRNA的分离率为1.08%,通过冻干浓缩成功使其浓度提高9倍。结果表明：分离到的总RNA质量可充分满足下游分子生物学实验要求,所建立的mRNA浓缩方法简单易行,可完全解决mRNA起始浓度低的难题。
- 李超陈明黄维义王瑞余晓丽黄婷雷爱莹梁万文
- 关键词：外周血白细胞总RNA
- 奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离与血细胞指数研究
- 2008年
- 鱼类外周血白细胞分离一直是一项技术难题，为探讨一种便捷、高效的奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离方法，本实验使用76％泛影葡胺（Urografin）调整标准人淋巴细胞分离液比重，通过梯度密度离心筛选最佳奥利亚罗非鱼白细胞分离液比重，并对分离前后的细胞进行分类计数与形态观察。结果发现分离前奥利亚罗非鱼外周血细胞总数为1．5×10^9个／ml，白细胞占35％，最佳奥利亚罗非鱼白细胞分离液比重为1．082，每毫升外周血可分离得到6×10^6～8×10^6个细胞，其中白细胞可达90％以上。对分离前后的细胞进行瑞氏染色分析可明显区分出单核细胞、大淋巴细胞、小淋巴细胞和嗜中性粒细胞，且各类白细胞之间的比例分离前后基本一致。本研究成功建立了奥利亚罗非鱼外周血白细胞分离技术，测定奥利亚罗非鱼血细胞指数，并对血细胞进行了形态学观察与鉴定，这对罗非鱼细胞免疫学研究具有一定的实际意义。
- 李超陈明黄维义余晓丽王瑞雷爱莹黄婷秦春香梁万文
- 关键词：奥利亚罗非鱼外周血白细胞
