田艳丽
- 作品数：6 被引量：18H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用细胞内PCR技术构建及筛选白癜风噬菌体抗体库
- 2006年
- 目的克隆白癜风患者淋巴细胞中原始配对的自身抗体基因,构建噬菌体抗体库并筛选针对黑素细胞膜抗原的特异性抗体.方法细胞内PCR法扩增人免疫球蛋白轻链和重链可变区基因,Cre重组酶介导下完成单个细胞内的轻重链连接,获得反映体内原始配对信息的单链抗体可变区基因,构建噬菌体抗体库,筛选针对黑素细胞膜抗原的自身抗体.结果构建完成库容量约为3×l06的噬菌体抗体库,筛选得到1株针对黑素细胞膜抗原的自身抗体.结论利用细胞内PCR技术和噬菌体抗体库技术成功构建免疫文库,为进一步研究自身抗体在白癜风发生发展过程中的作用奠定了基础.
- 刘玲田艳丽李春英高天文
- 关键词：白癜风聚合酶链反应噬菌体抗体库自身抗体
- 从大容量人源噬菌体抗体库中筛选抗黑素瘤特异性抗体被引量：9
- 2005年
- 目的:用黑素瘤(MM)细胞系筛选大容量人源噬菌体抗体库,获得能与MM细胞特异性结合的人源性单链抗体(scFv)。方法:用完整的MM细胞对大容量人源噬菌体抗体库进行4轮“吸附-洗脱-扩增”筛选,并通过细胞ELISA法对随机挑选的克隆进行抗原结合活性测定,得到的阳性克隆进一步做DNA序列测定和免疫组化染色鉴定。结果:从80个随机挑选的克隆中,筛得1株抗MM细胞的抗体,该抗体对人的鳞癌细胞、角质形成细胞、黑素细胞、角蛋白、胰蛋白酶、转铁蛋白及小鼠IgG等细胞或抗原的结合反应均呈阴性。免疫组化染色显示,该抗体与MM细胞系Libr的染色呈阳性,对黑素细胞和痣细胞的染色呈阴性。DNA测序结果表明,该抗体VH属于人IgGVH5亚群,VL属于人Vκ亚型。结论:通过筛选噬菌体抗体库获得到1株抗MM细胞的特异性抗体,为MM的靶向治疗研究奠定了基础。
- 李淼陈宇萍王刚李春英殷河慧田艳丽高天文
- 关键词：噬菌体抗体库恶性黑素瘤单链抗体
- 人源性表皮黑素细胞膜蛋白双向电泳技术初步建立及优化设计
- 2007年
- 目的:初步建立人源性表皮黑素细胞膜蛋白质组学研究中的双向电泳分离技术,优化膜蛋白提纯方法,以提高细胞膜蛋白的分辨率、敏感度和可重复性。方法:采用固相pH梯度(IPG)等电聚焦(IEF)为第一向、SDS-PAGE垂直电泳为第二向的双向电泳技术,对样品处理、水化等提取膜蛋白步骤进行了优化,与常规的提取膜蛋白的方法进行了比较。结果:经优化提纯方法所得样品经3次重复实验,获得了高分辨率的双向电泳图,可分离蛋白质斑点数达500多个,蛋白分布比较均匀、范围广,蛋白点没有脱尾现象,与常规提取膜蛋白的方法比较具有显著优势。结论:优化的蛋白提纯方法更适合细胞膜蛋白的蛋白组学研究。
- 李强焦彬高天文于晓云阮禹松李春英王刚田艳丽刘玲
- 关键词：双向电泳膜蛋白黑素细胞
- 活化诱导的细胞死亡与皮肤病
- 2004年
- 活化诱导的细胞死亡是机体通过一系列复杂的分子事件在细胞被活化的同时而启动的一种有序并适度的细胞凋亡机制 ,是维持生理状态稳定的一种重要调节方式。活化诱导的细胞死亡的缺陷与免疫和多种生理机能的紊乱密切相关 ,也是某些炎症性皮肤病。
- 田艳丽王刚
- 关键词：细胞死亡皮肤病AICDT淋巴细胞
- In-cellPCR技术扩增白癜风自身抗体基因被引量：7
- 2006年
- 目的从白癜风患者外周血B淋巴细胞中扩增获得原始亲本配对的抗体基因。方法以正常人的黑素细胞为抗原,用活细胞ELISA法筛选50例白癜风血清,选择其中7例抗黑素细胞膜抗体强阳性的患者外周血分离得到CD19+B淋巴细胞,以10%甲醛溶液固定,蛋白酶K溶液通透化处理,进行in-cellPCR。用特异性引物进行in-cellRT-PCR扩增人免疫球蛋白轻链和重链可变区基因,采用Cre/loxP系统在细胞内完成轻重链的连接,然后经巢式PCR扩增获得具有细胞内原始亲本配对特性的单链抗体基因。结果经in-cellPCR扩增,获得了与预期单链抗体大小一致的单一800bp产物。结论利用in-cellPCR技术可以扩增白癜风原始亲本配对的自身抗体基因。
- 田艳丽李春英王刚高天文卢涛李淼
- 关键词：白癜风聚合酶链反应自身抗体
- 咪唑斯汀治疗寻常性银屑病临床疗效观察被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨咪唑斯汀治疗寻常性银屑病的疗效及安全性。方法:采用随机、双盲、安慰剂对照的办法,观察咪唑斯汀治疗60例寻常性银屑病患者的疗效。试验组口服咪唑斯汀10mg/d,对照组服用安慰剂,两组患者均同时给予20%尿素霜外用,每日2次。结果:连续用药4周,试验组和对照组患者的银屑病皮损面积及严重度指数(PASI)评分均有不同程度的下降,治疗前、后PASI的差值试验组为(6.22±9.66)分(P<0.01),对照组为(1.78±3.48)分(P<0.05),试验组与对照组之间的差异有统计学意义(U=249.5,P=0.003);瘙痒程度视觉模拟尺法(VAS)积分治疗组显著降低(P<0.01),对照组改善不明显,两组之间的差异有统计学意义(U=165.0,P=0.000)。所有患者均未出现严重不良反应。结论:咪唑斯汀治疗寻常性银屑病在改善其病情和减轻瘙痒症状等方面具有一定的疗效,可以作为一种安全有效的辅助治疗药物。
- 王刚王岩田艳丽李春英沈柱夏汝山樊建勇高天文刘玉峰
- 关键词：银屑病咪唑斯汀
