米荣升
- 作品数:120 被引量:136H指数:6
- 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金:上海市科技兴农重点攻关项目国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学交通运输工程更多>>
- 弓形虫表面抗原糖蛋白相关序列SRS47D基因的原核表达及蛋白定位研究
- 2020年
- 为表达弓形虫表面抗原糖蛋白相关序列(surface antigen glycoprotein 1-related sequences,SRS47D)并确定其在弓形虫中的定位,本研究将SRS47D基因序列插入原核表达载体pColdⅠ,构建原核表达质粒pColdⅠ-SRS47D,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析重组蛋白表达情况,Western blot分析重组蛋白的反应原性;利用His柱纯化重组蛋白,免疫新西兰兔,制备抗血清,通过间接ELISA检测血清效价;利用免疫荧光法检测蛋白在弓形虫速殖子中的定位。结果显示:成功构建了原核表达质粒pColdⅠ-SRS47D,在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体形式表达,表达产物约为55 kDa;重组蛋白能与感染弓形虫的小鼠血清发生特异性反应,免疫兔血清效价达到1∶51 200;免疫荧光检测结果显示,SRS47D蛋白分布在弓形虫速殖子表面,尤其前部和后部表膜。上述结果为进一步深入研究弓形虫SRS47D的特性和功能奠定了基础。
- 刘辉米荣升贾海燕王旭黄燕张烨华张晓丽杨衡韩先干陈兆国
- 关键词:刚地弓形虫原核表达
- 一种弓形虫病间接ELISA诊断试剂盒
- 本发明公开了一种弓形虫病间接ELISA诊断试剂盒;所述诊断试剂盒中所用的检测抗原为核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的弓形虫TgPP1基因原核表达获得的重组蛋白rTgPP1。本发明的试剂盒的包被抗原是原核表达的rTg...
- 陈兆国程龙黄燕米荣升韩先干陆珂
- 文献传递
- 微小隐孢子虫棒状体蛋白CpPRP1 sushi结构域的定位及其重组蛋白对小鼠隐孢子虫感染的免疫保护效果研究
- 微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)是严重危害人和动物健康的寄生原虫,目前,隐孢子虫病尚无有效的治疗药物和预防疫苗.棒状体蛋白在隐孢子虫入侵宿主细胞过程中发挥重要作用,微小隐孢子虫假定棒状体蛋白1...
- 黄燕石凯米荣升刘宇轩胡盼詹婷婷宋悦贾海燕陈兆国
- 贝氏隐孢子虫及其与大肠杆菌共感染对雏鸡肠道菌群的影响被引量:2
- 2021年
- 为调查贝氏隐孢子虫单独以及与禽致病性大肠杆菌合并感染对雏鸡肠道菌群的影响,将1日龄SPF级雏鸡分为隐孢子虫单独感染组(灌胃隐孢子虫1×10^(6)个/只)、隐孢子虫和大肠杆菌共感染组(肌注大肠杆菌2×106 CFU/只,同时灌胃隐孢子虫1×10^(6)个/只)与健康对照组,分别于接种后第3、9、15、21和27天采集新鲜粪便,提取DNA后进行16S rRNA高通量测序及生物信息学分析。结果显示,3组雏鸡肠道微生物相对丰度最高的门为厚壁菌门,其次为拟杆菌门和变形菌门。多样性分析表明,2组感染雏鸡的肠道菌群多样性降低,但隐孢子虫单独感染组较共感染组先恢复。从属水平分析发现,与健康对照组比较,共感染组的乳杆菌属丰度明显降低(P<0.05),而大肠/志贺菌属则显著升高(P<0.05),两者此消彼长。2感染组雏鸡肠道中的布劳特菌属和瘤胃球菌属伴随雏鸡日龄增长呈上升趋势,但相比健康对照组绝对丰度较低。以上结果表明,大肠杆菌的共感染可加剧隐孢子虫感染造成的雏鸡肠道微生物多样性和菌群结构的变化,这可能与采食量的改变以及对免疫力和代谢功能的影响有关。
- 黄燕黄燕米荣升米荣升王志豪韩先干韩先干刘永杰
- 关键词:贝氏隐孢子虫禽致病性大肠杆菌肠道菌群
- 禽致病性大肠杆菌luxS和rbsC双基因缺失株的构建及其生物特性分析被引量:1
- 2021年
- 禽致病性大肠杆菌(APEC)能引起家禽严重的呼吸系统和全身性疾病,由于APEC耐药菌株的不断出现迫使新型抗菌方式的研发迫在眉睫。本研究旨在评价APEC的luxS和rbsC双缺失的突变株作为减毒疫苗候选株的潜力,通过在APEC分离株DE17的单基因缺失株DE17ΔluxS的基础上,利用Red重组系统构建双基因缺失株DE17ΔluxSΔrbsC,并对其生物学特性进行了分析。结果显示:rbsC的缺失不影响DE17ΔluxS的生长特性和生物被膜形成能力,但运动性显著降低;与DE17ΔluxS相比,DE17ΔluxSΔrbsC的黏附能力和入侵能力分别降至46.92%和28.78%;半数致死量(LD50)结果显示,毒力下降了115.5倍;肝脏、脾脏和血液中的载菌量分别下降了3.63倍、79.20倍和2124.41倍。根据以上结果推测,rbsC基因的缺失会进一步降低DE17ΔluxS的毒力,本文为评价DE17ΔluxSΔrbsC株减毒机制提供参考。
- 涂春田左佳坤蒋蔚陈兆国米荣升黄燕韩先干汪洋
- 关键词:禽致病性大肠杆菌RED重组半数致死量
- 小附红细胞体mpg1基因的克隆及序列分析
- 根据猪附红细胞体(Mycoplasma suis)3:磷酸甘油醛脱氢酶样蛋白1基因(msgl)序列设计引物,对上海地区分离的小附红细胞体(M.Parvum)阳性猪全血DNA进行PCR扩增,获得小附红细胞体3:磷酸甘油醛脱...
- 曹薇陈兆国周鹏米荣升黄燕秦培兰杨晓娇王向佩王晓娟石凯
- 关键词:克隆
- 猪源附红细胞体荧光定量PCR检测试剂盒及其应用
- 本发明公开一种猪源附红细胞体荧光定量PCR检测试剂盒,该试剂盒包括:针对SEQ ID NO:1所示猪附红细胞体a1基因序列设计的TaqMan探针;针对SEQ ID NO:1所示猪附红细胞体a1基因序列设计的引物对。本发明...
- 陈兆国王向佩周鹏米荣升黄燕
- 文献传递
- 上海地区不同动物源隐孢子虫种型鉴定及微小隐孢子虫CP15和P23基因的克隆和表达
- 隐孢子虫是一种严重危害人和动物健康的寄生原虫,广泛寄生于人、哺乳动物、鸟类、两栖类和鱼类的消化道和呼吸道中,引起腹泻等症状。对免疫功能正常的动物,腹泻可自限,但免疫功能缺陷时,常表现水泻不止甚至死亡。
...
- 米荣升
- 关键词:隐孢子虫
- 文献传递
- 伊犁河谷新疆褐牛隐孢子虫感染情况调查被引量:1
- 2021年
- 为了解伊犁河谷区域新疆褐牛隐孢子虫病流行情况,从该地区的伊宁市和察布查尔锡伯自治县的4个养殖场采集356份粪便样品,提取基因组DNA,以隐孢子虫小亚基核糖体DNA(SSU rDNA)为靶基因,进行套式PCR扩增,并对阳性样品进行序列分析。结果显示:伊宁市和察布查尔锡伯自治县各有1个养殖场的新疆褐牛发现隐孢子虫感染,总的感染率为3.37%,其中伊宁市褐牛的感染率为4.10%,察布查尔锡伯自治县褐牛的感染率为2.48%;序列比对结果显示,存在2种隐孢子虫感染,分别为安氏隐孢子虫(C.andersoni)和瑞氏隐孢子虫(C.ryanae),其中C.andersoni是优势种(91.67%);成年牛的感染率最高(5.59%),而断奶前犊牛未发现隐孢子虫感染;冬季感染率(5.68%)显著高于春季(1.11%)(P<0.05)。本研究首次对伊犁河谷区域新疆褐牛感染的隐孢子虫进行了分子鉴定,发现褐牛的隐孢子虫感染率显著低于我国其他品种牛的感染率。该研究结果为深入了解新疆褐牛隐孢子虫的流行情况,制定有效的防控措施提供了数据支持。
- 阿曼古丽·斯拉依赵卫东王进香赵建国黄燕韩先干王旭龚海燕米荣升陈兆国
- 关键词:隐孢子虫新疆褐牛伊犁河谷
- 一例山羊暴发多种寄生虫混合感染及其防控思考
- 2011年
- 近年来,上海某羊场饲养的山羊先后暴发疾病,造成较严重的死亡和较大的经济损失,其中成年山羊的死亡率达8.67%~13.23%,羔羊的死亡率高达27.52%~48.13%。经流行病学调查、临床症状观察、病理学检测和实验室病原学诊断,确诊为多种寄生虫混合感染。通过采取综合防控措施,控制了病情,取得了良好效果,现报道如下。
- 陈兆国米荣升林矫矫
- 关键词:防控措施寄生虫山羊流行病学调查病原学诊断死亡率