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大鼠肝类固醇激素和异质素受体基因Nrli2过表达载体的构建和表达被引量：1: 2013年; 目的构建类固醇激素和异质素受体（SXR）基因Nrli2过表达质粒，并通过HEK-293细胞系验证其表达。方法大鼠肝组织中的总RNA逆转录后将含相应酶切位点的引物扩增到Nrli2编码框，并将Nrli2片段亚克隆至pcDNA3．1（＋），同时对其进行酶切和测序鉴定，挑选pcDNA3．1（＋）．Nrli2转染至293细胞系中，48h收集细胞进行荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR），72h后Westernblot法检测。结果成功扩增Nrli2编码区，并将其克隆至载体pcDNA3．1中。HEK-293细胞系、pcDNA-3．1（＋）、pcDNA3．1（＋）-Nrli2中SXR的FQ—PCR结果分别为1．00±0．09、4．88±0．94、473274．04±28784．24，后者分别与前两者比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论成功构建Nrli2过表达载体，并在HEK-293细胞中成功表达。; 徐浩李明意胡敏张谷裕; 关键词：类固醇激素基因克隆

组织薄片法在人原代肝癌细胞培养中的应用被引量：2: 2014年; 目的探讨组织薄片法在人原代肝癌细胞培养中的应用。方法分别运用组织薄片法和组织块法从人肝癌组织标本中分离培养原代肝癌细胞,分析两种方法培养成功率、细胞爬出时间、形态及GPC3的表达。结果薄片法培养成功率为66.67%,爬出细胞时间为(7.89±0.78)d,在培养第一代就能观察到形态规则的细胞且周围培养环境洁净;组织块法培养成功率为61.11%,爬出细胞时间为(7.56±0.73)d,在培养第二代能观察到形态规则的细胞。同时原代肝癌细胞和HepG2均能稳定表达GPC3。结论两种方法均能成功培养出原代肝癌细胞,但薄片法培养的细胞在形态及洁净程度上较组织块好,同时能稳定表达GPC3。; 林满洲胡敏吴桂林缪辉来朱润芝黄海丽李明意; 关键词：人肝癌组织 GPC3

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胡敏