臧晓南
- 作品数:80 被引量:280H指数:10
- 供职机构:中国海洋大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 龙须菜血红素加氧酶138位亮氨酸突变对藻红胆素合成的影响被引量:1
- 2021年
- 藻红胆素是一个开链四吡咯结构的发色团,其与脱辅基藻红蛋白结合使藻红蛋白具有光学活性,而血红素加氧酶基因ho对于藻红胆素的合成是至关重要的。本研究对实验室前期已获得的龙须菜中的血红素加氧酶基因ho-1的基因序列进行分析发现,其在藻类中比较保守,存在6个高度保守结构域;结构功能分析显示其具有15个可能的血红素(Heme)结合位点,其中第138位亮氨酸(L)既位于118~145位HemeO的扭结螺旋结构内,又在115~142位的高度保守的结构域内,而且经预测是可能的血红素(Heme)结合位点之一。为了进一步验证该位点的作用,我们拟对其进行定点突变,将第413位碱基由T突变成C,得到ho(M)基因,碱基突变后所对应编码的第138位氨基酸由亮氨酸(L,非极性氨基酸)突变为丝氨酸(S,极性氨基酸)。在此基础上,我们构建了重组质粒pET-ho-1、pET-ho-1-pebS、pET-ho-1-pebA-pebB及pET-ho(M)、pET-ho(M)-pebS、pET-ho(M)-pebA-pebB,将其转化到E.coli BL21中构建重组菌株E.coli ph、E.coli phS、E.coli phAB、E.coli ph(M)、E.coli ph(M)S和E.coli ph(M)AB进行表达,检测重组菌株的荧光发射光谱。结果表明,E.coli phAB和E.coli phS在595 nm处检测到藻红胆素的荧光特征峰,表明ho-1基因编码的血红素加氧酶可以参与催化藻红胆素的合成;E.coli ph(M)、E.coli ph(M)S和E.coli ph(M)AB与E.coli BL21一样无任何特征峰出现,这表明ho(M)中第413位碱基对应编码的第138位亮氨酸是血红素的结合位点,直接影响藻红胆素的合成,该位点的突变使得PebS和PebB/A两条催化途径均无法合成藻红胆素。本研究为阐明血红素加氧酶基因在合成藻红胆素过程中的重要性及龙须菜中藻红蛋白的合成机制,进而进行藻红蛋白的重组表达奠定了基础。
- 李瑞黄小云臧晓南尚孟慧毕莹徐晓婷
- 关键词:龙须菜血红素加氧酶荧光检测点突变
- 节旋藻和螺旋藻转基因选择标记的研究
- <正> 从节旋藻属和螺旋藻属中各选择了一株品系为实验材料,分别为钝顶节旋藻(Arthrospiraplatensis FACHB341)和盐泽螺旋藻(Spirulina subsulsa FACHB351)。系统研究了这...
- 臧晓南王高歌张学成
- 文献传递
- 一种藻红蛋白β和α亚基基因启动子及其制备方法和应用
- 一种藻红蛋白β和α亚基基因启动子,其特征是它用核酸序列表征:制备时将引物P1:TCAAATCGGGCTTCAAC和P2:AGAGCTCTCCTTAAATT,用聚合酶链式反应,以龙须菜基因组DNA为模板,进行扩增。本发明的...
- 隋正红张学成任雪莹臧晓南茅云翔
- 文献传递
- 7种鲽形目鱼类生长激素基因cDNA序列的克隆及系统分析被引量:11
- 2008年
- 从7种重要鲽形目经济鱼类——高眼鲽(Cleisthenes herzensteini)、黄盖鲽(Limanda yokohamae)、木叶鲽(Pleuronichthys Cornutus)、宽体舌鳎(Cynoglossus robustus)、石鲽(Platichthys bicoloratus)和条鳎(Zebrias zebra)、夏鲆(Paralichthys dentatus)的脑垂体中提取mRNA,通过RTPCR方法,克隆了含开放阅读框的生长激素(growth hormone,GH)cDNA序列,与本实验室已克隆的大菱鲆和漠斑牙鲆、已报道的鲆鲽鱼类及外群鱼类共22条生长激素基因cDNA进行了序列比对和同源性分析.测序结果显示,高眼鲽、黄盖鲽、木叶鲽、宽体舌鳎、石鲽、条鳎和夏鲆的GHeDNA长度依次为479,564,519,440,564,440,522bp,编码140~170个氨基酸的成熟GH多肽片段.通过序列比对,这7种蛋白序列与其他已知的鲆鲽鱼类GH序列具有较高的同源性,同科的鱼类之间同源性更高.运用PAUP软件对15种鲽形目鱼类与另外7种不同种属鱼类进行了分子系统进化树分析,结果与根据传统的形态学和生化特征分类进化地位基本一致,大菱鲆和塞内加尔鳎各自单独形成一个分支且与鲆科和鲽科鱼类相距较远,其中寒内加尔鳎等种类的分类地位与根据线粒体DNA序列分析的系统发生模式基本吻合.说明生长激素基因可以有效地用于研究鲽形目等硬骨鱼类的亲缘关系及分类地位.
- 刘滨臧晓南刘顺梅张学成雷霁霖
- 关键词:鲽形目生长激素CDNA
- 青岛崂山北九水小区森林植物资源调查报告
- 2002年
- 主要叙述青岛崂山北九水小区植被、植物区系成分及主要经济植物资源概况,为保护和发展该地区的森林植物资源提供科学依据。
- 李宝华臧晓南
- 关键词:森林植物资源经济植物植被
- 一种无抗生素标记的裂殖壶菌及其遗传转化方法
- 本发明公开了一种无抗生素标记的转基因裂殖壶菌,是利用Cre/<I>loxP</I>位点特异性重组系统,第一步将载体p18SCPGC质粒转入到宿主菌裂殖壶菌中,第二步将pSH65质粒转入到第一步的阳性克隆中,pSH65质粒...
- 臧晓南张学成陈浩孙恒一徐涤
- 文献传递
- 聚球藻hox1基因的克隆和序列分析被引量:1
- 2010年
- 本实验应用降落PCR方法从聚球藻Synechococcus cedrorum中扩增出717bp的hox1基因全序列,并与从Gen-Bank下载13个蓝藻hox1基因序列比较,用MEGA4.0进行序列同源性分析及蛋白结构特性分析。结果表明,Synecho-coccus cedrorum的hox1基因与聚球藻Synechococcus PCC7942和钝顶节旋藻Arthrospira platensis的hox1基因序列同源性分别为99.9%和99.2%,氨基酸序列同源性分别为99.6%和97.9%。还用邻接法和最大简约法构建了系统树并进行了聚类分析。
- 张茜臧晓南张学成赵炳然袁定阳唐俐
- 关键词:聚球藻聚类分析
- 转牙鲆生长激素基因酵母及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种转牙鲆生长激素基因酵母及其制备方法和应用,所述的转基因酵母是将牙鲆生长激素基因转入酿酒酵母中获得的,得到的酿酒酵母表达牙鲆生长激素。酿酒酵母发酵技术成熟,表达量较高,而且安全无毒,得到的表达牙鲆生长激素的...
- 张学成刘滨臧晓南刘顺梅
- 文献传递
- 转人-鲑嵌合降钙素串联基因酵母YS-5hsCT及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种转人-鲑嵌合降钙素串联基因酵母YS?-5hsCT及其制备方法和应用,本发明构建含5拷贝人-鲑嵌合降钙素串联基因的质粒,酶切获得线性DNA片段rDNA2-ura3-P<Sub>pgk</Sub>-5hsCT...
- 臧晓南孙恒一张学成徐涤李清王玉梅孙平楠姜勇
- 文献传递
- 摄食转基因集胞藻牙鲆的安全性评价
- <正>为评价转牙鲆生长因子基因集胞藻作为鱼类饲料添加剂的安全性,将摄食转基因集胞藻的牙鲆肌肉以10.Dg/kg·BW·d 剂量给小鼠连续灌喂8周,对试验鼠的摄食量、体重、血液常规和血生化指标、脏体系数以及生殖机能进行了检...
- 刘顺梅臧晓南张学成刘滨张维芬孙平楠况成宏
- 文献传递