范昌发
- 作品数：130 被引量：274H指数：10
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项国家自然科学基金中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 人源化CSF-1R 基因敲入小鼠模型的构建
- 2022年
- 目的利用CRISPR-Cas9技术构建CSF-1R基因敲入小鼠模型。方法将人CSF-1R基因的3到11外显子cDNA的部分序列,加上TGA密码子及WPRE-PolyA原件,插入到了小鼠CSF-1R基因外显子3的第20位丙氨酸下游。在鉴定获得阳性模型后,进一步通过RT-qPCR分析基因的表达特征并进行精子冷冻保种繁殖。结果该基因正确插入设计位点,转录水平显示转入基因能在小鼠模型心脏、肝、脾、肺、肾、脑等脏器中表达,冷冻精子复苏后体外受精的平均受精率达67.74%,平均产仔率16.06%,并经过PCR检测得到阳性小鼠。结论成功构建了人源化CSF-1R基因敲入小鼠模型,为评价肿瘤免疫抗体药效及相关靶向抗肿瘤药物筛选提供了动物模型。
- 刘甦苏吴勇谷文达曹愿翟世杰赵皓阳范昌发
- 关键词：抗体药物
- SNP与Hbb基因多态性的关联性
- 2007年
- 目的从单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)水平探索小鼠生化标记基因Hbb多态性的形成机理。方法从DNA、RNA和蛋白多肽3个方面分析研究Hbb基因的多态性。结果基因组DNA中有4个SNP位点与Hbbd/s多态性相关:分别为外显子1中的2个T(G),外显子2中的G(A)和外显子3中的A(G);RNA水平有4个SNP位点与Hbbd/s多态性相关:分别对应为外显子1中的2个T(G),外显子2中的G(A)和外显子3中的A(G);蛋白多肽水平第13、20和139位氨基酸残基,即Cys/Gly、Ser/Ala和Thr/Ala间的转换与Hbb/s多态性相关,分别对应于外显子1中的2个T(G)和外显子3中的A(G)。结论第13、20和139位氨基酸残基,即Cys/Gly、Ser/Ala和Thr/Ala间的转换可能是Hbbd/s多态性的形成原因。
- 胡培丽范昌发岳秉飞
- 关键词：单核苷酸多态性小鼠近交系
- 大小鼠模型命名方法与规则简介
- 2020年
- 近年来,随着生命科学以及生物医药工程技术的迅猛发展、基因编辑技术的突破,建立了越来越多的大小鼠模型动物,并广泛应用于基础研究中,如肿瘤学、传染病学、免疫等的研究。模型动物资源总量不断增加,模型动物命名不规范统一,给模型动物管理、国际交流和知识产权的保护带来一些困扰。本文以美国JAX实验室命名规则为基础,较详细的介绍了常见的模型动物(如大鼠、小鼠)的命名方法,并对不同类型模型的命名方法进行了举例说明,以期建立符合国际规范、便于国际交流的模型动物命名方法。
- 曹愿岳秉飞柳全明范昌发
- 关键词：小鼠动物模型命名法
- 一种经济实用的目标DNA片段回收法被引量：7
- 2002年
- 介绍了一种经济、实用 ,不需任何特殊设备和试剂的从普通琼脂糖胶中回收目标DNA的新方法。首先用普通琼脂糖电泳使PCR产物分离 ,在长波长紫外灯下切割目标带胶块 ,然后制备一块新胶 ,插上两把相同的大齿梳子 ,形成“加样孔”和“回收孔”。将胶块置于“加样孔”后 ,进行二次电泳 ,并在紫外下时时监测 ,待目标带进入“回收孔”时 ,吸出DNA溶液 ,经无水乙醇沉淀后 ,可用于PCR扩增。
- 孙春昀范昌发牛天堂孙毅何军贤郭骁才
- 关键词：DNA片断回收技术PCR
- 4个近交系小鼠SNP位点的测定被引量：12
- 2006年
- 目的将新近建立的单管双向等位基因专一性扩增(single_tube bi_directional allele specific amplification,SB_ASA)方法用于分析国内近交系小鼠基因组中的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)。方法以国内4个近交系小鼠为研究对象,采用SB_ASA方法对其16个SNP位点进行检测,并通过测序进行验证。结果16个SNP位点,SB_ASA都成功地对4个品系小鼠进行了分型,与测序结果完全一致。结论SB_ASA方法可以准确地检测国内近交系小鼠SNP位点等位基因型。
- 胡培丽范昌发岳秉飞邢瑞昌
- 关键词：单核苷酸多态性小鼠近交系
- 转基因动物模型的构建及在药物致癌性实验中的应用
- 药物临床前安全性评价直接关系到公众的用药安全,药物潜在致癌性评价是临床前安全评价的重要内容。2001年至今,我国已经批准了66家开展药物临床前安全性评价的GLP中心,建立了日趋完善一般药理、毒理等的药物临床前安全评价体系...
- 范昌发吕建军王三龙刘甦苏杨艳伟岳秉飞柳全明
- 文献传递
- hACE2-KI/NIFDC小鼠主要生物学特性指标测定被引量：1
- 2021年
- 目的测定自培育hACE2-KI/NIFDC转基因小鼠的生物学特性指标。方法分别测定4周龄和8周龄各10只雌性hACE2-KI/NIFDC小鼠的11项脏器系数、22项血液生理指标和13项血液生化指标,利用统计学方法分析组间差异。结果 4周龄组的5项脏器系数(脾、肺、胸腺、左肾、右肾,P<0.01)和3项血液生理指标(MCV、MCH、EOS,P<0.05)高于8周龄组,5项指标(MON%、ALP,P<0.05;心脏脏器系数、AST、P,P<0.01)低于8周龄组。结论 hACE2-KI/NIFDC小鼠生物学特性指标的测定为其应用研究提供了基础数据。
- 魏杰王洪刘甦苏光姣娜周佳琪冯育芳秦骁王莎莎范昌发付瑞岳秉飞
- 关键词：血管紧张素转化酶2转基因小鼠脏器系数血液生理生化指标
- 不同小鼠品系囊胚受体对C57BL/6胚胎干细胞种系嵌合效率的影响被引量：2
- 2015年
- 目的考察不同品系的小鼠囊胚对C57BL/6胚胎干细胞种系嵌合效率的影响,进而提高通过在C57BL/6胚胎干细胞中同源重组制作基因打靶小鼠的效率。方法选取近交系B6(Cg)-Tyrc-2J和BALB/c品系及封闭群ICR作为囊胚供体鼠,通过在TLX3、Ai3K和SL三个不同基因修饰ES细胞的种系嵌合实验中,平行比较三者的囊胚利用率、嵌合鼠获得效率以及种系遗传效率等三个方面,并进一步针对囊胚来源这一因素对效率的影响进行统计学分析。结果三种ES细胞均未能通过B6(Cg)-Tyrc-2J品系囊胚的注射获得种系遗传。而BALB/c品系与ICR品系相比,囊胚利用率明显低于ICR品系(P<0.05);嵌合鼠获得效率方面,BALB/c与ICR相当(P=0.115);而种系遗传效率方面,BALB/c品系显著高于其他品系(P<0.01)。结论 BALB/c品系在C57BL/6胚胎干细胞种系嵌合效率方面确实具有优势,然而,由于BALB/c囊胚较难获得,并且存在发育延迟和透明带脆性高等问题,而ICR品系在囊胚获得和利用方面的效率明显高于BABL/c,并且也可以支持C57BL/6胚胎干细胞的种系遗传,因此也是C57BL/6胚胎干细胞囊胚注射中较好的选择。
- 周舒雅左琴刘甦苏王辰飞李保文贺争鸣范昌发
- 呼吸道合胞病毒G蛋白基因片段的克隆及高效表达被引量：2
- 2004年
- 呼吸道合胞病毒 (RSV)感染遍布全球,并可导致严重的疾病,但目前尚无成功的疫苗问世。为寻求可能用于 RSV 疫苗研制的重组蛋白抗原,我们在克隆 RSV-A 全长 G 蛋白基因的基础上,构建了多种共表达载体蛋白和G 蛋白片段的表达载体,并从中筛选出能以可溶形式高效表达抗原蛋白的原核表达体系。通过亲和层析纯化了重组蛋白抗原 DsbA-G101,将其免疫 Balb/c 小鼠后获得了相应的抗血清。经 ELISA 检测表明 DsbA-G101 具有良好的免疫原性。基于本研究所构建的系列表达载体,可以比较不同的 G 蛋白片段免疫原性的强弱及载体蛋白的优劣,从中发现最佳的 RSV 抗原蛋白。
- 范昌发龚伟梅兴国刘燕
- 关键词：RSVG蛋白载体蛋白疫苗
- 致癌性小鼠模型及其建立方法和应用
- 本发明涉及一种致癌性小鼠模型及其建立方法和应用，属于动物模型技术领域。所述小鼠模型通过将包含人原癌基因c‑Ha‑ras(HRAS)基因序列片段的载体转入C57BL/6小鼠胚胎干细胞，经过囊胚注射，移植入受体鼠，经过筛选获...
- 范昌发刘甦苏霍桂桃杨艳伟赵皓阳王三龙耿兴超孙晓炜谷文达翟世杰李琳丽吴勇曹愿
