通过PCR方法从水稻(O ry za sa tiva)染色体基因组中扩增一个编码非特异性脂质转移蛋白(nonspec ific lip id transfer prote in,nsLTP)类似蛋白的基因(OSd ir),将该基因片段克隆到硫氧还蛋白融合表达载体pET 32a(+)中后,在BL 21(DE 3)trxB-宿主菌中实现了融合蛋白的高表达,表达产物为包涵体。利用尿素溶解包涵体并复性后,再通过Sepharose N i2+-che lating fast flow柱亲和纯化融合蛋白,得到重组O SD IR蛋白。
非生物胁迫是影响农作物生长的重要因素,常常导致作物减产。挖掘非生物胁迫应答基因,培育抗逆性增强的作物新品种具有重要的现实意义。OsPM1(水稻Plasma Membrane protein 1基因)编码一种ABA转运蛋白,在水稻中过表达能够提高水稻的耐旱性。在本研究中我们进一步发现,OsPM1还受渗透、高盐、高温胁迫的诱导,同时其转录受到水稻热休克转录因子(Hsfs)的激活。过表达OsPM1的转基因水稻除耐旱性增强外,还具有更强的抵御渗透、高盐及高温胁迫的能力。将OsPM1的胁迫诱导型启动子与高粱的热休克转录因子SbHsf03的编码区融合成为重组基因,转化到粳稻日本晴中,经耐热性检测,发现日本晴叶片的耐热性增强,但其正常生长没有受到影响。研究结果提示OsPM1基因及其启动子在提高水稻抗多种非生物胁迫能力上具有重要的应用价值。
