谢万华
- 作品数：8 被引量：5H指数：1
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 小型猪体细胞克隆试验被引量：1
- 2010年
- [目的]建立体细胞克隆小型猪的技术平台并了解克隆效率。[方法]运用体细胞核移植技术,以小型猪胎儿成纤维细胞作为核移植供体细胞,以体外成熟卵母细胞作为核移植受体细胞进行体细胞克隆猪生产,并利用STR序列对所出生的克隆猪进行个体识别。[结果]将重构胚胎移植到5头代孕母猪体内,其中一头代孕母猪成功产下2头克隆小型猪。经过个体识别试验证实克隆小型猪来自供核细胞,与代孕母猪无直接亲缘关系。[结论]克隆小型猪的成功出生表明所建立的技术平台适于小型猪的克隆。
- 黄永业李小平周焱谢万华段新平谭广云李栋袁婷高飞谢光洪赖良学欧阳红生逄大欣
- 关键词：体细胞核移植小型猪克隆猪性别鉴定
- 猪体外受精、体细胞核移植和再克隆胚胎体外发育潜力的研究
- 动物再克隆已经在不同物种中取得了成功，其在物种改良、异种克隆、生命科学研究等领域具有巨大价值。然而，由于实验方法和物种的不同，再克隆效率存在很大的差异。本研究的目的是检测了猪再克隆效率和猪再克隆胚胎早期发育潜力，并用所建...
- 谢万华
- 关键词：基因表达发育潜力
- 文献传递
- Fat-1转基因克隆猪的制备研究
- ＜正＞ω-3不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acids,PUFAs）是一类被广泛研究和关注的脂肪酸,越来越多的研究证明ω-3 PUFAs是人类及其他哺乳动物的生长和健康所必须的物质,对维持其正常...
- 袁婷谢万华谭广云周炎黄永业逄大欣赖良学欧阳红生
- 文献传递
- 肌生成抑制素及其相关因子在猪非横纹肌中表达的研究
- ＜正＞肌生成抑制素（Myostatin）是肌细胞生长和分化的抑制子,人们曾经认为其只在肌肉细胞中表达,但越来越多的证据表明,它可能是一种广泛表达的因子。为了研究肌生成抑制素及其相关调控因子在猪不同组织中是否表达,以及它们...
- 矫继峰周炎谢万华张明军逄大欣欧阳红生
- 文献传递
- 绿色荧光小鼠胚胎干细胞的分离与培养
- 2010年
- 目的:建立绿色荧光小鼠胚胎干细胞系。方法:以ICR及GFP转基因小鼠为实验动物,冲取交配后3.5天小鼠GFP-/+囊胚,去透明带后进行完全培养,以13.5天鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,并对细胞克隆用亚克隆的方法分离扩大培养。结果:获得了边缘清晰,表面平滑,结构致密,隆起生长的鸟巢状克隆,碱性磷酸酶染色呈强阳性,干细胞特异性的多能因子OCT4及Nanog表达呈阳性,且能稳定表达绿色荧光的雄性干细胞系。结论:本文为小鼠ES细胞系的建立提供了一种稳定而可靠的方法。
- 谭广云谢万华周焱黄永业宋红肖李栋宋娜袁婷段新平逄大欣欧阳红生
- 关键词：EGFP胚胎干细胞小鼠
- 规模化体细胞克隆猪生产的探讨
- ＜正＞目前体细胞核移植技术已经成为转基因动物生产的一种最为有效的手段。猪与人类具有许多生物学相似性,能够更真实地模拟人类基因功能和疾病进程,同时猪的器官被认为是最适合人类器官异种移植的来源,因而转基因猪将成为一种重要的生...
- 黄永业谭广云谢万华周炎李栋赖良学逄大欣欧阳红生
- 文献传递
- 单胚胎RT-qPCR对猪体细胞核移植囊胚全能性的分析被引量：1
- 2012年
- 为了检测猪体细胞核移植囊胚的质量和全能性基因表达量,采用体细胞核移植技术制备克隆胚胎并于体外培养5 d后获得囊胚,对照组为从人工授精5 d后的长白母猪体内获取的体内囊胚。在高倍镜下检测两组囊胚的形态,用Hoechest 33342染色细胞核DNA,记录囊胚细胞总数;建立单胚胎cDNA的制备方法,并用qPCR检测囊胚中全能性基因(Oct4、Nanog、Sox2)的表达量。结果表明,与体内囊胚相比,猪体细胞核移植囊胚质量较差,细胞数目显著降低(分别为110±10.3和54±12.6);并且全能性基因表达量显著下降(P<0.05)。由此可见,全能性基因表达量偏低是影响猪体细胞核移植囊胚发育能力的因素之一。
- 谢万华陈仙菊姚朝刚韩阳逄大欣唐晓春
- 关键词：猪体细胞核移植基因表达
- 双温多重PCR鉴定猪早期胚胎性别的研究被引量：3
- 2010年
- 通过PCR扩增哺乳动物雄性决定基因SRY来鉴定胚胎的性别在畜牧业生产上已经得到广泛应用,优化技术路线,缩短鉴定时间对后期实验的成功有非常重要的意义。根据猪的SRY基因和GAPDH(内标)基因序列,分别设计并合成两对引物,通过双温PCR反应实现对猪早期胚胎性别的快速鉴定,结果表明:母猪只能扩增出404bp的GAPDH基因片段,而公猪能同时扩增出309bp的SRY基因片段和404bp的GAPDH基因片段。阳性率为100%,鉴定时间较常规时间缩短2h时。表明该检测方法快速、准确。该方法为在转基因克隆动物研究中快速鉴定胎儿成纤维细胞系的性别提供了可靠的技术保证。
- 李小平袁婷高飞武蓉黄永业段新平谢万华逄大欣
- 关键词：SRY基因多重PCR性别鉴定
