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郑惠惠
作品数:
4
被引量:5
H指数:1
供职机构:
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
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发文基金:
国家自然科学基金
国家科技重大专项
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
毕胜利
中国疾病预防控制中心病毒病预防...
曹经瑗
中国疾病预防控制中心病毒病预防...
邱丰
中国疾病预防控制中心病毒病预防...
李德新
中国疾病预防控制中心病毒病预防...
李建东
中国疾病预防控制中心病毒病预防...
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用噬菌体展示肽库技术筛选甲肝病毒抗原模拟表位
2012年
目的用噬菌体展示肽库技术筛选甲型肝炎(甲肝)病毒抗原模拟表位,为病毒抗原决定簇定位探索可行方法。方法用纯化的抗甲肝病毒单克隆抗体,对噬菌体展示12肽库进行3轮“吸附一洗脱一扩增”筛选,随机挑取10个克隆,用酶联免疫吸附法(ELISA)对噬菌体克隆进行抗原性鉴定、竞争抑制鉴定及DNA序列测定分析,推导出展示肽氨基酸序列并与甲肝病毒(HAV)代表株结构蛋白氨基酸序列比较。结果lO个噬菌体克隆ELISA检测全为阳性,9个具有一致序列,与HAVHMl75株结构蛋白中和活性表位之一:VPl157—171区具有类似序列,另一株噬菌体克隆在HAVHMl75中未发现类似序列,结果表明这些展示肽可能是HAV抗原模拟表位。结论用噬菌体展示肽库技术筛选得到了HAV模拟表位,为开展病毒模拟表位研究打下了基础。
曹经瑗
李建东
郑惠惠
毕胜利
李德新
关键词:
肽库
表位
中国部分甲肝病毒流行株结构蛋白VP3-VPl区基因特点分析
被引量:1
2011年
目的分析中国部分甲肝病毒流行株结构蛋白VP3-VPl区基因特点。方法收集42份甲肝患者急性期血清标本,经核酸提取、逆转录及巢氏PCR,测得结构一非结构蛋白VP3-VPl-2A区序列,进行序列同源性比较并分析其基因特点。结果42株HAV病毒株在VPl-2A连接处核苷酸和氨基酸序列同源性分别为89.1%~100%和97.3%~100%;在全长结构蛋白VP3-VPl区的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为87.6%~100%和98.8%~100%。VPl-2A连接处序列相同的病毒株在全长结构蛋白VP3.VPl区的核苷酸同源性为98.4%~100%,0~2个氨基酸位点不同。本实验所得序列在中和抗原位点处氨基酸序列均未变异。结论42株病毒株均属于I型,40株是IA亚型,2株IB亚型。本实验所用HAV流行株在结构蛋白VP3.VPl区的核苷酸存在差异但是氨基酸序列高度保守且没有中和抗原位点处的变异。VPl-2A结合处核苷酸序列相同的分离株在全长结构蛋白VP3-VPl区核苷酸序列相同或相近,氨基酸序列保守。
郑惠惠
曹经瑗
毕胜利
关键词:
肝炎病毒
甲型
基因型
中国部分甲肝病毒流行株结构蛋白VP3-VP1区基因特点分析及TaqMan Realtime PCR法定量检测甲型肝炎病毒核酸
甲型肝炎是由甲型肝炎病毒(HAV)引起的急性传染病。甲肝的流行与社会、经济和卫生情况有很大关系。通过卫生条件的改善及疫苗的使用,中国的甲型肝炎暴发近年来有所下降,但甲型肝炎病毒仍然是导致急性病毒性肝炎的主要原因之一。 ...
郑惠惠
关键词:
甲型肝炎病毒
逆转录聚合酶链式反应
文献传递
甲肝病毒特异性TaqMan荧光定量PCR法检测甲肝病毒核酸的研究
被引量:3
2012年
目的建立甲肝病毒(HAV)特异性TaqMan荧光定量PCR检测方法,并对血清等样品中的HAV进行检测。方法根据参考文献,选取HAV基因组保守区5’-NCR区引物和探针,建立特异性强、敏感度高、稳定性好的TaqManHAVReal—timeRT-PCR检测体系并应用于甲肝患者血清等病毒核酸的检测。结果本研究建立的方法能够特异检测出样品中的甲肝病毒,其灵敏度介于每反应0.1CCID50至0.01CCID50之间。同一样本重复检测3次,批内样本Ct值的变异系数最大2.O%,批间样本D值的变异系数最大2.6%。急性期甲型肝炎患者血清中甲肝病毒为5.18×102~4.93×107拷贝/ml。结论本实验建立的HAVReal—timeRT—PCR检测方法具有特异、灵敏、快速等优点,可成功应用于临床样本等甲肝病毒的病原学检测。
郑惠惠
邱丰
曹经瑗
毕胜利
关键词:
逆转录聚合酶链反应
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