郑晓璇
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：汕头大学医学院炎症与免疫性疾病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠白细胞介素-33基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2008年
- 目的:克隆小鼠IL-33基因全长编码区cDNA,并对其进行序列分析。方法:从BALB/c小鼠的脊髓组织中提取总RNA,逆转录为cDNA,用热启动PCR技术,扩增小鼠IL-33基因全长编码区cDNA,经双酶切后,克隆入pcDNA3.1(+)载体中,构建真核表达载体pcDNA3.1-mIL-33,然后进行酶切鉴定与序列分析。结果:小鼠IL-33基因的PCR产物和重组载体经凝胶电泳和酶切鉴定、测序分析证实,其序列与GenBank中数据一致。小鼠IL-33基因的全长编码序列为801 bp,编码266个氨基酸。结论:小鼠IL-33基因成功的克隆并构建了其真核表达载体,为进一步进行IL-33的表达与功能研究奠定了基础。
- 李明才柳晓金郑晓璇苏绍波
- 关键词：基因克隆小鼠
- 小鼠IL-33的原核表达、纯化及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:在大肠杆菌中表达具有生物学活性的白细胞介素-33(mIL-33)。方法:用PCR技术扩增小鼠IL-33成熟蛋白的编码区,与原核表达载体pET-44连接,构建pET-44-mIL-33表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,SDS-PAGE分析表达产物,MTT法测定纯化IL-33的生物学活性。结果:成功构建了pET-44-mIL-33原核表达载体,并在大肠杆菌中表达出可溶性mIL-33,SDS-PAGE分析纯化产物纯度为95%,表达产量为95mg/L。细胞增殖实验表明IL-33有抑制P815细胞增殖的活性。结论:获得了有活性的重组IL-33蛋白纯品,为后续功能研究奠定了基础。
- 柳晓金李明才郑晓璇武燕曾俍铭苏绍波
- 关键词：白细胞介素-33原核表达
- 干扰素-λ对树突状细胞分化发育和功能的影响
- 干扰素-λ(IFN-λ)是最近才发现的新型Ⅲ型干扰素家族,由 IFN-λ1、IFN-λ2和 IFN-λ3组成。它们同Ⅰ型干扰素类似,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等功能。但 IFN-λ对树突状细胞(DC)的作用报道甚
- 李明才郑晓璇柳晓金苏中静苏绍波
- 关键词：树突状细胞分化发育
- 文献传递
- 人肥大细胞羧基肽酶的单抗2A9识别表位的预测和鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的：分析人肥大细胞羧基肽酶（hMC-CP）的单克隆抗体（mAb）2A9识别表位所在区域．方法：根据肥大细胞hMC-CP的二级结构、亲水性、表面可能性和抗原性指数，对hMC-CP的B细胞表位进行预测．依据预测结果，采用缺失突变的方法，分别扩增编码hMC-CPN端第1～111（P1P2），97～202（P3P4）和1～202（P1P4）位氨基酸的cDNA，并构建重组原核表达载体pET-44／P1P2、pET-44／P3P4和pET-44／P1P4．用IPTG诱导表达融合蛋白，并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析．结果：B细胞表位预测结果显示，hMC-CP的N端第1～202位氨基酸含有多个潜在的B细胞表位．PCR扩增出的3个目的片段，其DNA序列同NCBI公布的序列完全一致．Western blot结果显示：E．coli BI21（DE3）表达的融合蛋白P3P4和P1P4均与mAb2A9反应；而融合蛋白P1P2与mAb 2A9不发生反应、结论：用多参数综合测评的方法，可获得满意的hMC-CPB细胞表位预测结果，本研究中mAb 2A9识别的表位位于hMC-CP的112-202位氨基酸区域．
- 周艳春侯一峰陈霖霏郑晓璇何韶衡
- 关键词：基因表达
- 组胺对肺上皮细胞Toll样受体表达的上调作用被引量：1
- 2006年
- 目的：观察组胺对肺上皮细胞中Toll样受体（TLR）表达的影响．方法：体外培养人肺上皮细胞株A549，用RT-PCR和实时定量PCR检测静息状态或组胺作用下的A549细胞中TLR1～TLR10mRNA的变化，并用流式细胞术进一步确定组胺对TLR3表达的调节作用．结果：A549细胞有TLR1～TLR10 mRNA的组成型表达，组胺对TLR3 mRNA和蛋白的上调作用具有时间和剂量依赖性，并且H1受体阻断剂可抑制组胺对TLR3的上调作用．结论：组胺可上调肺上皮细胞中TLR3的表达，提示当呼吸道存在变态反应性病变时，增多的组胺可能会增加肺上皮细胞对病毒感染的敏感性．
- 侯一峰周艳春郑晓璇王海燕傅意玲方泽曼何韶衡
- 关键词：组胺上皮细胞TOLL样受体
- 流体力学注射介导的重组pcDNA-IFN-λ3-EGFP质粒在小鼠体内的表达被引量：2
- 2009年
- 目的研究流体力学尾静脉注射对目的基因器官靶向性的影响。方法将BALB/c小鼠按随机数字表分组法分为流体力学注射组和空质粒对照组。流体力学注射组将100μg/只带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的表达质粒pcDNA-IFN-λ3-EGFP溶液2ml在5s内快速注入尾静脉,对照组在5s内注入空质粒pcDNA3.1的生理盐水2ml。注射后在不同时间内用过量麻醉剂处死小鼠,取肝、肺、肾、心、脑等组织作冰冻切片,于荧光显微镜下观察。结果流体力学注射pcDNA-IFN-λ3-EGFP质粒在肝组织中表达IFN-λ3-EGFP融合蛋白,注射8h后即有较强的表达,24h后表达最强,2d后明显减弱,1周后消失。其他组织及对照组未检测到绿色荧光蛋白表达。结论流体力学注射方法是肝靶向性的活体基因转移方法,绿色荧光蛋白可作为该方法进行目的基因研究的一个可靠和方便的示踪剂。
- 郑坚郑晓璇李明才柳晓金武燕
- 关键词：绿色荧光蛋白质粒
- B16黑色素瘤皮内移植瘤模型的建立被引量：2
- 2009年
- 背景与目的:建立B16黑色素瘤细胞(简称B16细胞)皮内移植瘤模型。材料与方法:制备商品源B16细胞悬液,按每只C57BL鼠接种0.1 ml(3×105个)B16细胞于后肢外侧皮内;分离、培养移植瘤源B16细胞,倒置显微镜下观察细胞形态。结果:移植瘤出现时间为(9.6±1.2)d,致瘤率为100%;皮内注射B16细胞18 d内,肿瘤形态呈圆形或类圆形,边缘清楚;移植瘤源原代B16细胞多为圆形、类圆形或短梭形,商品源B16细胞为梭形或不规则形;HE染色表明移植瘤内有大量B16细胞。结论:B16细胞皮内移植瘤模型易于对肿瘤生长的观察和测量,是早、中期肿瘤研究的合适模型之一。
- 牛青霞周艳春许燕璇谢燕飞陈少英郑晓璇
- 关键词：C57BL小鼠移植瘤模型
- 小鼠可溶性ST2基因的克隆及其真核表达载体的构建
- 2008年
- 目的:克隆小鼠可溶性ST2基因并构建其真核表达载体。方法:从小鼠肥大细胞株P815中提取总RNA,逆转录为cDNA,用热启动PCR技术,扩增小鼠可溶性ST2基因全长编码区,经双酶切后,克隆入pcDNA3.1载体中,构建真核表达载体pcDNA3.1-mST2,然后进行酶切鉴定和序列分析。结果:小鼠可溶性ST2基因的PCR产物和重组载体经凝胶电泳和酶切鉴定、测序分析证实,其序列与GenBank中数据一致。小鼠可溶性ST2基因的全长编码序列为1 011 bp,编码336个氨基酸。结论:用热启动PCR技术能方便、准确地获得目的基因片段。成功地克隆小鼠可溶性ST2基因并构建了其真核表达载体,为进一步进行小鼠可溶性ST2蛋白的表达和功能研究奠定了基础。
- 李明才柳晓金郑晓璇周艳春苏绍波
- 关键词：基因克隆
