郭川
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中南林业科技大学更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 云南萝芙木酶PNAE基因全长克隆及其序列分析
- 萝芙木属植物是一类重要的药用植物,在其中已发现多达200种吲哚生物碱,吲哚生物碱被用来治疗多种疾病。吲哚生物碱阿吗灵就是其中最复杂的一个药用生物碱,它包含了一个含有九个手性碳原子的高度复杂的六元环,阿吗灵代谢包含超过10...
- 郭川
- 关键词：RT-PCRRACE
- 文献传递
- 云南萝芙木酶PNAE基因全长斋克隆及其序列分析
- 萝芙木属植物是一类重要的药用植物，在其中已发现多达200种吲哚生物碱，吲哚生物碱被用来治疗多种疾病。吲哚生物碱阿吗灵就是其中最复杂的一个药用生物碱，它包含了一个含有九个手性碳原子的高度复杂的六元环，阿吗灵代谢包含超过10...
- 郭川
- 关键词：RT-PCR技术
- 文献传递
- 云南萝芙木pnae基因全长克隆及其序列分析被引量：4
- 2013年
- 根据已知的其他物种PNAE酶cDNA序列设计引物,采用RT-PCR技术从云南萝芙木叶片中扩增获得pnae基因部分cDNA序列即PNAE酶基因中间大片段,再用RACE技术获得其两端序列。序列拼接得到完整的1 004 bp的PNAE酶基因,根据获得的序列,分析得到795 bp的开放阅读框,编码264个氨基酸。序列分析显示,云南萝芙木中PNAE酶氨基酸序列与蛇根木中的该酶氨基酸序列同源性高达90%,但和其他植物物种中的PNAE酶氨基酸序列,以及其他物种间的PNAE酶氨基酸序列同源性都不高,在40%-60%之间,表明不同物种中PNAE酶氨基酸序列不具有全序列的高度同源性。进一步序列分析发现,在各植物的PNAE酶氨基酸序列中都存在两个高度保守的氨基酸区域,表明不同物种中PNAE酶存在共同的高度保守区段。
- 郭川曹福祥刘继科冯延芝李猛
- 关键词：RACE
- 基质金属蛋白酶-7的基因克隆和原核表达
- 2013年
- 研究构建人基质金属蛋白酶7(MMP-7)的原核表达载体,并进行原核表达获得重组蛋白MMP-7。以人肾肿瘤组织总RNA为模板,PCR方法获得MMP-7成熟蛋白的基因序列,构建含10xhis标签的原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得重组蛋白,并经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),检测其表达情况。最终得到pET24a(+)-MMP-7-10his重组质粒,诱导表达后重组蛋白占总蛋白的41%左右,获得21.2kD大小蛋白,与目的蛋白大小一致,纯度大于90%,为进一步研究奠定基础。
- 刘继科曹福祥郭川彭继庆冯延芝
- 关键词：基质金属蛋白酶-7基因克隆原核表达
