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阮柏: 作品数：19 被引量：47H指数：4; 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目陕西省自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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MicroRNA-200a在肝癌组织中的表达及临床意义被引量：8: 2014年; 目的探讨microRNA-200a（miR-200a）在肝癌组织中的表达，分析其与临床病理参数及肝癌预后的关系。方法采用实时PCR检测肝癌细胞系和58例肝癌标本及其癌旁组织中miR-200a的表达水平，分析miR-200a表达与临床病理和肝癌患者预后的关系。结果miR-200a在四种肝癌细胞系中表达均低于正常肝脏细胞系，在肝癌组织中表达水平（0．593±0．107）比癌旁组织（1．652±0．135）显著降低（P〈0．05）；miR-200a的表达与肝癌的侵袭转移有关。有肝癌侵袭转移患者组明显低于无侵袭转移组（P=0．026）。而miR-200a的表达与性别、年龄、肝炎病史、肿瘤大小、TNM分期及AFP值无关（均P〉0．05）。低表达miR-200a的肝癌患者预后较差。结论miR-200a在肝癌组织中呈低表达，并与肝癌的侵袭转移和不良预后有关。; 杨西胜汪建林李小磊阮柏马奔高远郭欣王璟段涛李海民; 关键词：肝癌组织

内皮细胞特异性Notch信号对肿瘤血管新生的作用与机制研究: 肿瘤新生血管形成是肿瘤生长的前提,因此是治疗肿瘤的重要靶标之一。肿瘤新生血管不仅完成运输营养和氧气、带走代谢物的作用,还由于其特殊的异常结构,可为肿瘤生长提供特殊的微环境。所以,促使“肿瘤血管正常化”,即促进肿瘤血管结构...; 晏贤春杨子岩梁亮张娟刘瑗段娟丽阮柏常天芳韩骅; 关键词：NOTCH 肿瘤血管新生 MIRNA

CD27/CD27L蛋白在胰腺癌组织中的表达及临床意义: 目的观察CD27和CD27L蛋白在胰腺癌和正常胰腺组织中的含量,探讨其与肿瘤发生、增殖、转移及临床病理特征和临床分期的关系.方法采用ELISA法和Western blot试验对39例胰腺癌组织和35例正常胰腺组织中C...; 于泳窦科峰王德盛李霄李侠党立力张卓超阮柏黄启科刘广欣

MicroRNA-34a、Notch1在肝细胞肝癌组织中的表达及临床意义被引量：4: 2014年; 目的:观察microRNA-34a、Notch1在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织的表达,探讨其与HCC发生、发展、临床病理特征的关系及可能的临床意义.方法:在132例HCC组织及癌旁组织、49例正常肝脏组织中应用实时荧光定量PCR法检测microRNA-34a的表达和免疫组织化学染色检测Notch 1表达.结果:HCC组织中microRNA-34a表达水平明显低于癌旁组织(2.57±0.71,P=0.003)及正常肝组织(8.65±0.21,P<0.001),在转移性癌组织中microRNA-34a表达水平明显低于非转移性癌组织(1.34±0.13,P=0.014),差异均有统计学意义.Notch1的免疫组织化学染色结果:HCC组织中Notch1表达水平明显高于癌旁组织(3.12±0.67,P=0.001)及正常肝组织(4.65±0.14,P<0.001),转移性癌组织高于非转移性癌组织(2.14±0.37,P=0.008),差异有统计学意义.MicroRNA-34a与Notch1在HCC及癌旁组织中均成负相关,相关系数分别为(r=-0.259,P=0.003)、(r=-0.274,P=0.002),两者在HCC组织中的表达与患者年龄、性别、肝功能、肿瘤部位、是否合并肝硬变、是否伴随肝炎病毒感染及甲胎蛋白(α-fetoprotein,αFP或AFP)含量无相关性(P>0.05),而与肿瘤恶性程度、肿瘤个数、肿瘤体积、淋巴结转移、浸润深度、TNM分期密切相关(P<0.05).Kaplan-Meier分析显示:microRNA-34a低表达、Notch1高表达组患者术后3年生存率(11.3%),明显低于microRNA-34a高表达、Notch1低表达组(34.7%),差异具有统计学意义(χ2=38.163,P=0.011).结论:MicroRNA-34a在HCC组织中较癌旁和正常肝脏组织明显减低,其通过逆向调节靶蛋白Notch1参与肿瘤肿瘤恶性行为;检测microRNA-34a及Notch1在HCC组织中的表达情况,对HCC的临床诊断、治疗及预后判断有潜在的重要意义.; 于泳李霄周亮窦科峰李小磊阮柏张卓超戴斌汪建林杨西胜王德盛; 关键词：肝脏肿瘤肝细胞肝癌癌旁组织 NOTCH1

Tg737基因参与胎肝干细胞正常分化的机制研究被引量：1: 2014年; 目的探讨Tg737基因对胎肝干细胞(Fetal liver stem cells,FLSCs)正常分化的影响及相关机制。方法三步分离法富集FLSCs;在HGF诱导FLSCs的不同时间点,RT-PCR检测AFP、ALB、Tg737及HNF4α的mRNA表达,Western blot检测Tg737和HNF4α的mRNA和蛋白表达;慢病毒Tg737-shRNA转染FLSCs,观察转染后Tg737的抑制效果;Tg737抑制后,RTPCR检测不同诱导时间AFP和ALB的mRNA表达;Western blot检测Tg737抑制后HNF4α的蛋白表达。结果三步分离法能有效富集FLSCs;在HGF诱导FLSCs的过程中,AFP的mRNA表达呈逐渐降低的趋势,ALB的mRNA表达逐渐升高,Tg737及HNF4α的mRNA和蛋白表达均呈逐渐升高的趋势;shRNA能有效下调Tg737的mRNA和蛋白表达;在HGF诱导过程中,Tg737抑制组AFP和ALB的mRNA水平均无明显变化;Tg737抑制后HNF4α的蛋白表达显著下调。结论 Tg737和HNF4α参与了FLSCs的正常分化,Tg737的表达缺失会抑制FLSCs的正常分化,其抑分化机制可能是通过下调HNF4α来实现的。; 党立力黄启科周亮阮柏刘广欣段涛李伟强张卓超窦科峰陶开山; 关键词：RNA干扰胎肝干细胞分化

miR-200a在肝癌干细胞中的差异表达及其作用: 2014年; 目的:分离肝癌细胞系MHCC97-H中肝癌干细胞并分析miR-200a在肝癌干细胞和非肝癌干细胞亚群中的表达差异,探讨miR-200a的表达水平与肝癌干细胞之间的关系。方法:利用流式细胞荧光激活分选法从MHCC97-H中分选出肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSCs)和非肝癌干细胞(non-liver cancer stem cells,non-LCSCs)两个亚群;采用real-time PCR检测miR-200a在两个亚群中的表达差异;在MHCC97-H中瞬时转染miR-200a-mimic,检测LCSCs亚群比例的变化。结果:LCSCs亚群占总体细胞的百分比为3.56%;LCSCs亚群细胞中miR-200a的表达明显低于non-LCSCs亚群(P<0.05);上调miR-200a后LCSCs亚群细胞比例为1.24%。结论:miR-200a在LCSCs亚群细胞中明显低表达,上调miR-200a后LCSCs亚群细胞比例明显降低,提示miR-200a能够调控肝癌干细胞的比例。通过调控miR-200a的表达,可以降低LCSCs亚群细胞比例,从而为肝癌的治疗提供新的思路。; 汪建林杨西胜王兴戴斌阮柏高远李海民; 关键词：肝癌肝癌干细胞

肝癌干细胞研究进展: 2013年; 肝癌是占全球发病率第5、致死率第3的恶性肿瘤。在我国,每年新发现的肝癌患者人数占全球的一半以上。虽然在早期诊断和治疗措施方面已有很大的进步,但是大部分肝癌患者被发现时已属晚期,而且针对肝癌的以手术为主的综合治疗疗效仍有限。近十多年的研究使肿瘤干细胞的概念深入人心,越来越多的证据表明肿瘤干细胞与肿瘤的生长、耐药、转移和复发等密切相关,使人们对肝癌的发生和发展有了新的认识,为肝癌的治疗提供了新的方向。; 阮柏陶开山高远党立力刘卫辉窦科峰; 关键词：肝肿瘤肿瘤干细胞

肝癌患者血清中miR-200a的表达及其临床意义被引量：3: 2013年; 目的探讨肝癌患者血清miR-200a表达及其临床病理特征之间的关系。方法运用实时定量PCR技术检测36例肝癌患者和21例健康人血清标本中miR-200a的表达情况,分析血清miR-200a的表达水平与肝癌患者临床病理参数之间的关系。血清中AFP值从临床资料中获取。结果 36例肝癌患者miR-200a的表达水平为4.63±1.31,21例健康人对照为6.05±0.51,两者差异有统计学意义(P<0.05)。在36例肝癌患者中,血清miR-200a表达水平与肝癌分化程度、TNM分期及AFP有关(P<0.05),而与性别、年龄、抽烟、饮酒、HBV、肝硬化无关(P>0.05)。结论血清miR-200a表达水平可作为新的生物学指标对肝癌的诊断具有一定的价值。; 汪建林戴斌杨西胜高远阮柏申炜炜李小磊李海民; 关键词：肝肿瘤分子诊断技术

活化的肝星状细胞RBP-J可诱导性基因敲除小鼠的构建及应用: 2019年; 目的:利用Cre-loxp可诱导系统构建活化的肝星状细胞RBP-J可诱导性基因敲除小鼠模型,以实现肝纤维化过程中活化的肝星状细胞Notch信号通路的特异性阻断。方法:将Sm22α^CreERT2和RBP-J^flox/flox转基因小鼠杂交,得到F1小鼠,将繁殖的F1小鼠继续进行交配,得到F2小鼠,通过PCR鉴定出基因型为Sm22α^Cre ERT2,RBP-J^flox/flox的小鼠。通过腹腔注射四氯化碳建立肝纤维化模型,检测四氯化碳注射不同时间段后肝脏纤维化进展情况和肝星状细胞活化过程中Sm22α的表达情况。注射他莫昔芬诱导活化肝星状细胞中RBP-J基因的特异性敲除。分选肝星状细胞,q-PCR和Western Blot检测活化肝星状细胞中Notch下游靶基因Hes1、Hey1表达情况以验证敲除效果。结果:通过连续交配我们获得了Sm22α^Cre ERT2,RBP-J^flox/flox小鼠。四氯化碳腹腔注射4周即可诱导肝脏发生较为明显的纤维化,同时肝星状细胞活化并逐渐高表达Sm22α。给予他莫昔芬诱导Cre重组酶发挥作用后,敲除了活化的肝星状细胞中的RBP-J基因,其下游基因Hes1、Hey1表达降低70%以上,阻断了Notch信号通路。结论:我们成功构建了RBP-J可诱导性条件性基因敲除小鼠模型,实现了小鼠肝纤维化过程中活化肝星状细胞Notch信号通路的阻断,为深入研究Notch信号通路在肝纤维化中的作用和机制奠定了坚实的基础。; 岳振生蒋子剑杨毅聪阮柏王婷婷王琳; 关键词：RBP-J 肝星状细胞纤维化

抑癌基因Tg737下调对肝癌细胞增殖的影响及其机制被引量：4: 2014年; 目的探讨下调Tg737表达对肝癌细胞增殖能力的影响及其下游机制.方法 SMMC7721和MHCC97-H细胞分别转染空白对照病毒和干扰Tg737表达的慢病毒后,用CCK-8法绘制肝癌细胞生长曲线检测其增殖能力变化.通过流式细胞仪检测肝癌细胞周期变化,并进一步检测细胞周期调控蛋白的表达变化,推断可能的分子机制.结果与转染空白对照病毒的细胞相比,稳定下调Tg737的SMMC7721和MHCC97-H细胞增殖能力增强,G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,调控细胞周期完成G1/S转化的cyclinD1的表达水平增高.结论在肝癌细胞SMMC7721和MHCC97-H下调Tg737表达可能通过上调cylinD1的表达促进肝癌细胞周期由G1期向S期转化,进而促进肝癌细胞的增殖.; 高远阮柏张卓超汪建林杨西胜戴斌周倜王兴马奔刘卫辉张福琴窦科峰; 关键词：肝癌细胞周期细胞周期蛋白

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