陈丽香 作品数:30 被引量:37 H指数:4 供职机构: 上海市公共卫生临床中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市自然科学基金 上海市科学技术发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
一种肾人源化小鼠模型的构建方法 本发明属于生物医学技术领域,涉及实验动物模型的构建方法及构建的实验模型,具体涉及一种基于人源细胞构建肾人源化小鼠模型的方法及构建的肾人源化小鼠模型。本发明的构建方法包括步骤:将间充质干细胞、人脐静脉内皮细胞和从尿液中分离... 周晓辉 蒋超 王超 任晓楠 李顺 陈丽香 武斌 秦波音 杨华 彭秀华 徐春华PCR和限制性内切酶在uPA-SCID小鼠基因型鉴定中的应用 2015年 目的 建立一种简便、快捷、准确的基因型鉴定方法用于uPA-SCID小鼠的基因型鉴定.方法 应用PCR技术与限制性内切酶相结合的方法检测uPA-SCID小鼠的基因型.结果 uPASCID小鼠的uPA基因型鉴定结果显示:uPA基因野生型在153 bp有条带,纯合子在337 bp有条带,杂合子在337bp、153bp有条带.uPA-SCID小鼠的SCID基因型鉴定结果显示:uPA-SCID小鼠SCID基因突变体在38 bp、26 bp有条带,杂合子在64 bp、38 bp、26 bp有条带,野生型在64 bp有条带.结论 建立的基因型鉴定方法简便易行、可靠,通过该方法可以确定uPA-SCID小鼠的基因型,筛选出需要的纯合子uPA-SCID小鼠. 徐春华 陈丽香 任晓楠 杨玉琴 彭秀华 蔡家麟 周晓辉 周文江关键词:基因型鉴定 限制性内切酶 一种基于基因敲除细胞的阳性筛选体系的建立方法 本发明属于动物生物技术领域,涉及一种基于基因敲除细胞的阳性筛选体系的建立方法,并利用建立的系统在NIH/3T3细胞中对p53和MAD2基因进行敲除,并对发生基因敲除的细胞进行阳性筛选。本发明中在NIH/3T3细胞系中定点... 李顺 周晓辉 陈丽香 彭秀华 赵锐 诸蒋鸣文献传递 高压水注射法HBV慢性转染模型的建立与优化 背景:乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染是全球范围影响健康的重要问题,慢性感染人群存在肝硬化和肝细胞癌的高患病风险.HBV感染具有宿主特异性,在自然情况下,HBV不感染医学研究中常用的实验小动... 周晓辉 彭秀华 方钟 陈丽香一种乙型肝炎病毒慢性转染模型的构建方法 本发明属于生物医学领域,具体涉及一种乙型肝炎病毒慢性转染模型的构建方法。本发明方法基于高压水动力法,转染HBV质粒至造模实验鼠(优先采用4~8周龄雄性C3H/HeN),构建HBV慢性转染模型;本发明方法构建获得的乙型肝炎... 周晓辉 彭秀华 任晓楠 陈丽香 徐春华 方钟文献传递 C57BL/6J背景基因修饰小鼠精子冷冻保种及品系恢复方法 被引量:2 2019年 目的建立一种高效的C57BL/6J背景基因修饰小鼠的精子冷冻及体外受精(IVF)方法。方法以C57BL/6J小鼠为研究对象,围绕冷冻保护液、冷冻精子浓度、复苏后精子处理方法及IVF培养液等方面进行研究,IVF后2-细胞发育率作为冷冻和复苏效率评价标准,对比各组之间发育情况。结果以R18S3(含质量比为18%棉子糖和3%脱脂奶粉)、M-R18S3冷冻保护液[含终浓度为477μmol/L硫代甘油(MTG)的R18S3冷冻液]进行精子冷冻,复苏后在HTF培养液中进行IVF,2-细胞发育率分别为8.4%和20.6%;以R18S3和M-R18S3作为冷冻保护液,以含浓度为1 mmol/L还原性谷胱甘肽(GSH)的HTF培养液进行IVF,2-细胞发育率分别为25.0%和43.5%。高浓度精子冷冻及复苏法可获得64.2%的2-细胞发育率;选取4种C57BL/6J背景基因修饰小鼠进行精子冷冻及IVF,2-细胞发育率34%~90%,胚胎移植后出生率40%~57%。结论 M-R18S3作为冷冻保护液,采用高浓度精子冷冻法进行精子冷冻,冷冻精子复苏后进行受精滴洗涤筛选,以含1 mmol/L GSH的HTF培养液进行冷冻精子IVF,此技术体系可以作为C57BL/6J背景基因修饰鼠的保种及品系恢复手段。 牛博文 陈丽香 朱孟敏 彭秀华 秦波音 李峰关键词:C57BL/6J小鼠 鼠衣原体感染L929细胞致宿主死亡方式的研究 2017年 目的对鼠衣原体感染L929细胞48h后细胞发生死亡的方式(凋亡、自噬、坏死)进行初步探讨。方法以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为0.85的鼠衣原体感染小鼠成纤维细胞L929,48h后利用荧光显微镜观察DAPI染色情况;应用Propidium Iodide(PI)与AnnexinV染色后流式细胞术分析细胞的凋亡.坏死情况;转染GFP—LC3质粒后荧光显微镜观察LC3表达.Western blot检测LC3蛋白分析细胞自噬情况。结果鼠衣原体感染L929细胞48h后,表现为DAPI染色无凋亡时细胞核碎裂特征,PI与AnnexinV染色后流式分析表明细胞坏死增多,转染GFP.LC3后,与未感染对照相比.鼠衣原体感染组可见荧光弥散状变为点状分布:Westernblot分析可发现鼠衣原体感染的L929细胞LC31蛋白向LC3Ⅱ蛋白转化增强。结论鼠衣原体感染48h后L929细胞主要发生细胞坏死而非细胞凋亡,并伴有细胞自噬现象。 陈丽香 于辛 刘雪 李顺 赵秀云 周晓辉关键词:衣原体 L929细胞 坏死 自噬 猕猴ROSA26基因及其基因修饰的方法和应用 本发明属于生物技术领域,涉及一种猕猴ROSA26基因,其包括SEQ ID NO 4中1‑428位DNA序列。本发明还包括在LLC‑MK2细胞系中对猕猴ROSA26基因进行基因修饰的方法,以及利用该体系构建ROSA26位点... 李顺 周晓辉 陈丽香 彭秀华文献传递 一种嵌合人HLA-DP基因组区域的人源化转基因小鼠模型的构建方法 本发明属于生物技术领域,涉及一种表达人HLA‑DP基因组区域的转基因动物模型的构建方法。本发明的BAC克隆含有124kb的HLA‑DP基因组区域(DOA‑DPA1*0103‑DPB1*0401),经过DNA测序、脉冲场凝... 李峰 周晓辉 朱孟敏 牛博文 秦波音 彭秀华 刘玲玲 陈丽香 徐春华 王超文献传递 沙眼衣原体感染诱生的活性氧(ROS)对宿主细胞坏死的影响 被引量:4 2012年 目的初步观察沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)感染诱生的活性氧(reactive oxygen species,ROS)对宿主细胞坏死的影响,为沙眼衣原体与宿主细胞死亡机制的相互作用提供初步线索。方法沙眼衣原体小鼠生物型(Chlamydia muridarum)感染L929细胞,分别在12h、24h收集细胞,检测其ROS、坏死率及16srRNA表达,并检测应用ROS抑制剂(diphenyliodonium chloride,DPI)后上述指标及caspase-1的活性情况。结果沙眼衣原体感染了L929细胞。与对照组相比,实验组在12h、24h2个检测时间点的ROS、细胞坏死率及16srRNA表达均有显著增加,且随时间延长增加趋势加大(P<0.05)。用药物DPI处理感染的L929细胞后,实验组与对照组相比不但ROS水平降低,而且伴随着细胞坏死率、caspase-1活性和16srRNA表达的降低(P<0.05)。结论沙眼衣原体感染L929细胞后诱生的ROS一定程度上促进了宿主细胞的坏死。 刘文文 周晓静 陈丽香 吕建新 周晓辉关键词:沙眼衣原体 细胞坏死