陈建梁
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：浙江大学化学工程与生物工程学系更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 重组牛凝血酶原-2包涵体的体外重折叠复性研究
- 凝血酶是目前应用最为广泛的一种止血剂,在临床上有非常重要的用途。凝血酶原-2(pThr-2)是α-凝血酶生成过程中的分子量最小的单链中间前体,经激活后可转化为有活性的α-凝血酶。本论文通过将含凝血酶原-2基因的质粒克隆至...
- 陈建梁
- 关键词：包涵体发酵条件培养基
- 文献传递
- 稀释复性法体外复性重组牛凝血酶原-2包涵体
- 2005年
- 对重组牛凝血酶原-2包涵体的体外重折叠复性进行了研究。凝血酶原-2是α-凝血酶生成过程中的一个最小的单链中间前体。重组牛凝血酶原-2在E.coli中高效表达并形成包涵体,经2.5mol?L?1脲和0.7%Triton X-100洗涤,再用8mol?L?1脲和0.3mol?L?1DTT溶解后,得到了包涵体裂解液。研究优化了体外复性溶液,其组成为含2.7mol?L?1脲、0.6mmol?L?1GSSG、GSSG/GSH0.9、0.1%PEG6000和0.5mol?L?1L-Arg、pH7.4Na3PO4缓冲液。牛凝血酶原-2复性后经透析,再被Echis Carinatus Snake Venom激活,转化为有活性的α-凝血酶,其总活力可达2948U?mL?1。结果表明稀释复性法可用于重组牛凝血酶原-2包涵体的体外重折叠复性。
- 陈建梁关怡新崔志芳姚善泾
- 关键词：复性包涵体
- 重组牛凝血酶原-2在大肠杆菌中的表达及包涵体的制备被引量：2
- 2005年
- 将含凝血酶原-2的质粒成功地转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导培养,获得凝血酶原-2包涵体.经对培养基成分及操作条件进行优化,详细考察了碳源、氮源、无机盐、诱导起始时间、诱导剂添加量、接种量、发酵温度和转速等因素对目标蛋白表达量的影响.在优化的条件下,重组凝血酶原-2包涵体的产量为110mg/L发酵液,占菌体总蛋白的21.7%.
- 陈建梁关怡新崔志芳姚善泾
- 关键词：大肠杆菌发酵包涵体
