陈正华
- 作品数：153 被引量：2,131H指数：30
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划山西省青年科技研究基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学电子电信更多>>
- 杨树叶绿体3′rps12基因,rps7基因和ndhB基因片段的克隆及序列分析被引量：7
- 2001年
- 通过烟草叶绿体相关序列设计引物 ,从杨树的叶绿体基因组中克隆出 2个相邻的DNA片段 .经分析发现 ,这 2个DNA片段包含核糖体蛋白 3′rps12、rps7基因和NADH脱氢酶第二亚基ndhB基因片段 .利用DNAMAN等软件 ,将扩增到的杨树叶绿体DNA片段与烟草、拟南芥、玉米和黑松的相关序列进行比较 ,证实所扩增的片段具有较高的保守性 ,尤其是在这 3个基因的编码区 ,同源性均在 90 %以上 .插入或缺失常发生在基因间隔区 ,同源性在 80 %左右 ;对其编码区所推导的氨基酸序列进行了比较 ,同源性均在 92 %以上 .首次克隆了杨树叶绿体的部分DNA序列 ,详细报道并分析了杨树 3′rps12、rps7基因和ndhB基因片段及其边界序列信息 .所报告的基因序列均已登录GenBank .
- 周奕华侯丙凯石东乔肖宇红石锐胡赞民陈正华
- 关键词：杨树叶绿体基因克隆
- 油菜叶绿体基因ndhB的序列(英文)
- 2001年
- 侯丙凯张海燕党本元周奕华陈正华
- 关键词：油菜叶绿体基因
- 巴西木的组织培养和快速繁殖研究被引量：13
- 1997年
- 巴西木的组织培养和快速繁殖研究刘桂珍１梁国平２王兰岚１陈正华１（１中国科学院遗传研究所，北京１００１０１；２云南热带作物研究所，景洪６６６１００）关键词巴西木；组织培养；快速繁殖ＴｉｓｓｕｅＣｕｌｔｕｒｅａｎｄＲａｐｉｄＰｒｏｐａｇａｔｉｏｎｏｆＤｒ...
- 刘桂珍梁国平王兰岚陈正华
- 关键词：巴西木快速繁殖
- 芜菁花叶病毒外壳蛋白基因的克隆及其植物表达载体的构建被引量：14
- 1992年
- 从感病的萝卜叶片中得到芜菁花叶病毒(TuMV)的分离物,以oligo(dT)为引物,合成了其基因组RNA的互补DNA,并克隆到载体λ-ZAPⅡ中。通过单链cDNA探针杂交和DNA末端序列分析找出含有poly-A尾巴的阳性克隆。我们对一个含有1429个碱基插入片断的克隆进行了序列分析,根据芜菁花叶病毒外壳蛋白分子量的大小和马铃薯Y病毒组蛋白质加工位点氨基酸序列的保守性,确定了外壳蛋白基因的5′末端。利用PCR方法对其5′末端进行改造,加进起始密码ATG和两个限制性内切酶位点。通过基因重组操作,将该基因插入到双元载体pBI121的衍生物pBIN437中,得到芜菁花叶病毒外壳蛋白基因的植物表达载体。
- 孔令洁方荣祥陈正华莽克强
- 关键词：芜菁花叶病毒外壳蛋白基因马铃薯
- 植物离体培养细胞的类减数分裂被引量：7
- 1996年
- 陈一华陈正华
- 关键词：植物细胞离体培养
- 表达β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的转基因烟草及其抗真菌病的研究被引量：149
- 2000年
- 利用烟草碱性β－１，３－葡聚糖酶及菜豆碱性几丁质酶基因构建了组成型表达的双价植物 表达载体ｐＢＬＧＣ，利用农杆菌介导法转化了烟草，并得到了转基因植株。对其进行分子生物 学分析的结果表明，部分转基因植株在所有检测中都显示较强的阳性反应，这说明外源基因 已整合到烟草基因组中并得到正确表达。活体接菌实验初步表明，转基因植株与对照相比，对 赤星病的侵染具有较强的抵抗能力。
- 蓝海燕张丽华王兰岚陈正华田颖川王长海王长海
- 关键词：Β-1,3-葡聚糖酶基因转基因烟草抗真菌病
- 利用微分离黑麦1R染色体的体外扩增产物进行染色体着染研究被引量：7
- 1999年
- 首先对显微分离出的黑麦（ＳｅｃａｌｅｃｅｒｅａｌｅＬ．）１Ｒ染色体进行了两轮Ｓａｕ３Ａ连接接头介导的ＰＣＲ扩增（ＬＡ＿ＰＣＲ）。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实这些染色体扩增片段来源于基因组ＤＮＡ之后，再利用１Ｒ染色体的第二轮扩增产物、黑麦基因组ＤＮＡ、ｒＤＮＡ基因为探针，与其根尖细胞中期分裂相进行染色体原位杂交，发现微分离的１Ｒ染色体体外扩增产物中包含大量的非该染色体特异性重复序列，而其信息量却较黑麦总基因组少；当以适量的黑麦基因组ＤＮＡ进行封阻时，微分离染色体的体外扩增产物成功地被重新定位在中期分裂相的一对１Ｒ染色体上，说明微分离１Ｒ染色体的ＰＣＲ扩增产物中的确包含了该染色体特异性的片段。此外，以从１Ｒ染色体微克隆文库中筛选出的一单、低拷贝序列和一高度重复序列分别为探针，染色体原位杂交检测发现，这一高度重复序列可能为端粒相关序列；而单、低拷贝序列却未检测到杂交信号。这些结果从不同侧面反映出染色体着染技术是证实微分离、微切割染色体的真实来源及筛选染色体特异性探针的有利工具。建立了可供参考的植物染色体着染实验体系，为染色体微克隆技术在植物中的进一步应用提供了便利。
- 周奕华王槐党本元邓向东胡赞民陈正华
- 关键词：染色体原位杂交微分离微克隆黑麦
- 黑麦1R染色体微克隆文库的构建与分析被引量：11
- 1999年
- 通过玻璃针分离法 ,从黑麦 (SecalecerealeL .)根尖细胞中期分裂相中显微分离出 2条及 5条 1R染色体。经Sau3A接头介导的PCR(LA_PCR)方法对其进行体外扩增 ,得到了 0 .3～ 2 .5kb之间的DNA片段。以DIG标记的探针进行多次Southern杂交 ,证明显微分离出的染色体的体外扩增产物与黑麦基因组DNA同源 ,并且来自 1R染色体。然后利用 5条 1R染色体的第二轮PCR产物构建质粒文库 ,可得到 2 2 0 0 0 0个重组子。随机挑选 172个重组子进行分析 ,发现插入片段主要介于 30 0～ 180 0bp之间。此外 ,根据基因组点杂交结果推算出该文库包含约 42 %的中、高重复序列和 5 8%的单、低拷贝序列 ,而且文库的冗余度较低。研究构建的黑麦 1R染色体微克隆文库为 1R染色体高密度遗传图谱的建立以及位于其上的重要基因的定位与分离提供了便利。
- 周奕华党本元王槐胡赞民王兰岚陈正华
- 关键词：黑麦
- 甘蓝型油菜游离小孢子培养的胚胎发生被引量：6
- 1995年
- 以生长在非控温控光下的4个冬性甘蓝型油菜(Brassica napus L.)品种为供体,进行游离小孢子培养.研究发现,多数品种在开花3~7d内取材最为适宜.在甘蓝型油莱小孢子培养中只有单核晚期的小孢子才可能发育成胚状体,而花药培养时处于单核早期的小孢子易于发育成胚状体.在适当花期选取发育比较一致的单核晚期小孢子培养.经数小时后,部分小孢子便开始膨大,这是小孢子发育成胚的最早标志,膨大的小孢子中,有部分形成多细胞球并进一步发育成胚.用春性甘蓝型油菜为材料进行蔗糖浓度的实验结果表明:培养3d后,在16%蔗糖培养基中存活的小孢子最多,达16.13%,培养30d后,胚状体诱导频率则以13%蔗糖浓度为最高,每花蕾可达144个胚状体.如果在16%蔗粮培养基中培养3d后,添加等体积的13%蔗糖培养基,能够大大提高胚状体的诱导频率,为仅用13%蔗糖培养基培养的3.7倍.这一实验体系正在用于抗菌核病诱变与筛选,并作为外源基因导入的实验体系.
- 陈正华姚渝光张丽华关月兰陈军刘澄清
- 关键词：甘蓝型油菜小孢子培养
- 用于生产口蹄疫疫苗的油菜叶绿体转基因植物的获得方法
- 本发明涉及一种用于生产口蹄疫多肽疫苗的油菜叶绿体转基因植物的获得方法。方法包括：克隆油菜叶绿体基因组同源重组片段SEQ ID NO：1所示序列，以及SEQ ID NO：2所示序列，并用这两个DNA片段构建油菜叶绿体定点转...
- 周长生陈正华杜若甫胡赞民石锐
- 文献传递
