韦凌娅
- 作品数：68 被引量：273H指数：10
- 供职机构：杭州市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：浙江省重点科技创新团队项目杭州市科技发展计划项目浙江省医药卫生科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 双链RNA饲喂干扰家蝇CYP6D1基因表达方法的建立
- 2020年
- 目的利用饲喂双链RNA(dsRNA)对家蝇拟除虫菊酯抗性相关基因CYP6D1的表达进行干扰,并对干扰效果进行评价。方法化学合成家蝇CYP6D1基因,连接入载体质粒L4440,转化入大肠埃希菌DH5α扩增质粒。抽提质粒,将其转化到大肠埃希菌HT115(DE3),并在异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下表达CYP6D1基因的dsRNA。将含有CYP6D1基因dsRNA的HT115(DE3)饲喂家蝇,72 h后通过荧光相对定量技术评价家蝇体内CYP6D1基因的表达变化。未进行质粒L4440转化的大肠埃希菌菌株HT115(DE3)饲喂家蝇作为对照。结果采用2-△△Ct法对对照组和处理组的mRNA相对表达量进行定量。目的基因和内参基因标准曲线R2值均>0.99,扩增效率M值均在0.90~1.10之间。与对照组相比,处理组CYP6D1基因mRNA相对表达量下降了40.1%,两者之间差异有统计学意义(t=-11.377,P=0.008)。结论初步建立了饲喂dsRNA对家蝇拟除虫菊酯抗性基因CYP6D1表达进行干扰的方法,在mRNA水平上实现基因表达干扰效果。
- 孔庆鑫韦凌娅沈林海王英红曹阳
- 关键词：家蝇RNA干扰抗药性
- 高分辨率熔解曲线分析检测家蝇cyp6d1基因突变被引量：4
- 2012年
- 目的探讨家蝇溴氰菊酯抗性机制。方法使用高分辨率熔解曲线(highresolutionmelting,HRM)分析与半分析定量PCR相结合的方法,分析家蝇抗性基因cyp6d1突变和扩增情况。通过对扩增的PCR产物进行测序来验证HRM准确性。结果与敏感品系相比,抗性品系cyp6d1基因的mRNA表达量显著增加(P=0.0002),抗性品系cyp6d1基因的mRNA表达量是敏感品系的50.7倍;使用HRM对cyp6d1进行突变分析,将其分为3种基因型,分别为A型(Tm=85.5℃)、B型(Tm=87.3℃)和C型(Tm=88.5℃);经测序,该HRM分析结果分别与3类基因序列型相对应。A型基因型为纯合的1087G、1101T和1155A(对应GenBank序列号U22367.1);C型基因型为纯合的1087A、1101G和1155G;B型基因型为A型和C型的杂合型。生物信息学分析表明,该突变为无意义突变。结论杭州市家蝇抗性品系cyp6d1基因mRNA表达量显著增加,可能是家蝇抗性增加的原因之一。
- 王英红孔庆鑫邱丽华韦凌娅沈林海倪晓平
- 关键词：高分辨率熔解曲线家蝇抗性基因突变
- 41株环境分离MRSA的SCCmec基因分型与耐药性研究被引量：2
- 2014年
- 目的了解杭州市医疗机构ICU高频接触表面分离的MRSA菌株的SCCmec基因型与耐药特征。方法采用葡萄球菌药敏试剂盒对MRSA菌株进行药敏检测;采用多重PCR技术对MRSA菌株进行SCCmec基因分型。结果 41株环境分离的MRSA菌株,25株(61.0%)可扩增出目标条带,其中SCCmecII型13株(52.0%)、SCCmecIII型5株(20.0%)、SCCmecIV型7株(28.0%);药敏结果显示,SCCmecII型对β-内酰胺类、林可酰胺类、喹诺酮类、大环内脂类这4类抗菌药耐药;SCCmecⅢ型对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类、大环内脂类这5类抗菌药耐药;SCCmecⅣ型对β-内酰胺类、林可酰胺类、喹诺酮类、磺胺类这4类抗菌药耐药。3种不同SCCmec基因型MRSA对奎奴普汀、万古霉素、利福平和呋喃妥因均100%敏感。结论本市部分医疗机构ICU环境表面受到3种SCCmec型的MRSA污染,均为多重耐药株,应重视环境表面的日常清洁与消毒,为患者提供清洁而安全的诊疗环境。
- 金慧沈林海徐虹韦凌娅倪晓平
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
- 虚拟实验室技术评价recA标准序列比对法对洋葱伯克霍尔德菌复合体种别鉴定效果被引量：1
- 2015年
- 目的利用虚拟实验室技术评价rec A标准序列比对(ARRS)法,对洋葱伯克霍尔德菌复合体(Bcc)种别鉴定效果。方法通过对Gen Bank、MLST数据库等公共数据库内相关信息进行核实和分析,筛选出在Gen Bank、MLST 2个数据库中均存在详实的rec A基因及MLST分型信息的Bcc菌株作为目标菌株。根据目标菌株的rec A基因序列信息,采用ARRS法对其进行鉴定。鉴定结果与MSLT数据库中该菌株分型鉴定结果进行比较。以MSLT法作为Bcc菌株鉴定的标准方法,计算ARRS法的灵敏度、特异度等相关统计学指标,评估其对Bcc菌株种别鉴定的效果。结果 ARRS法和MSLT法对93株目标菌株的鉴定结果显示,92株鉴定结果一致。相对于MSLT法,ARRS法灵敏度为98.9%,特异度为100.0%;2种方法一致性为98.9%(P<0.01)。结论 ARRS法对于鉴定Bcc内菌株具有较好的效果,可以满足临床筛检、医院感染流行病学调查等需求。
- 孔庆鑫沈林海徐虹韦凌娅陈冰冰倪晓平
- 关键词：虚拟实验室
- 医院环境清洁措施的多中心干预效果研究被引量：11
- 2015年
- 目的评价医院环境清洁综合干预措施效果,为医院环境感染控制提供依据。方法 2013年7月-2014年12月对4个ICU医护人员、环境清洁人员实施教育培训,采用更换ICU的清洁用品、引入消毒湿巾、改变清洁用品复用方式和结果反馈的综合干预措施,干预前、后共分别采集120份环境样本,分别进行三磷酸腺苷(ATP)相对光单位值及细菌菌落总数的中位数(Md)与四分位数(IQR)及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)阳性率监测。结果 4所医院ICU内环境表面采集120份标本,ATP监测的Md和IQR干预前为320.5RLU/100cm2和565RLU/100cm2,干预后分别为33.5RLU/100cm2和70RLU/100cm2,两者差异有统计学意义(P<0.01);干预前、后细菌菌落总数的Md、IQR分别为50、215CFU/cm2和19、84CFU/cm2,差异有统计学意义(P<0.01)。结论实施综合环境感染控制措施,可以有效提高环境清洁程度,降低环境表面耐药菌的检出率。
- 徐虹任淑华陆群干铁儿赵岚金慧沈林海韦凌娅陈冰冰孔庆鑫倪晓平
- 关键词：干预耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
- 小型压力蒸汽灭菌器PCD监测结果被引量：5
- 2011年
- 目的了解小型压力蒸汽灭菌器在口腔器械灭菌中选择与灭菌质量。方法采用现场调查与过程挑战装置监测方法,对杭州市部分口腔医疗单位进行了调查。结果共调查25所医疗单位口腔门诊的26台小型压力蒸汽灭菌器,有8所口腔门诊选择B型灭菌器,有17所口腔门诊选择S型或N型灭菌器,主要用于各类口腔器械(含带孔/腔)的灭菌。监测9台B型灭菌器,化学PCD监测合格率77.8%,生物PCD监测全部合格;监测11台S型灭菌器,化学PCD监测均不合格,生物PCD合格率为90.9%。6台N型灭菌器,未进行PCD监测,但S型与N型均用于带孔/腔器械的灭菌。结论小型压力蒸汽灭菌器对口腔科带孔/腔器械灭菌使用中存在问题,应加强相关技术培训和监测力度。
- 查捷徐虹金慧倪晓平韦凌娅
- 关键词：口腔器械灭菌质量
- 一种复方碘消毒液的毒性观察被引量：2
- 2015年
- 目的观察一种复方碘消毒剂的相关毒性,为其安全应用提供科学依据。方法采用活体动物试验,对复方碘消毒剂的相关毒性进行安全性评价。结果该消毒液对小鼠经口急性毒性LD50>5 000 mg/kg体重。该消毒液原液豚鼠完整皮肤、家兔破损皮肤急性刺激反应积分均值均为0,对家兔眼刺激试验平均积分为0,7 d恢复正常。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验均为阴性。结论该复方碘消毒剂属实际无毒级物质,对皮肤和眼睛无刺激性,对体细胞和生殖细胞无致突变作用,具有良好的安全性。
- 项华王英红韦凌娅
- 关键词：醋酸氯己定毒性刺激性微核精子畸形
- 高分辨率熔解曲线分析检测家蝇kdr基因突变被引量：2
- 2012年
- 目的探讨kdr基因在家蝇溴氰菊酯抗性增加中的作用。方法首次将高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)分析与半定量PCR相结合,用于分析家蝇抗性基因kdr扩增和突变情况。对扩增的PCR产物进行测序来验证HRM准确性。结果与敏感品系家蝇相比,kdr的mRNA表达量在现场品系家蝇中没有显著改变(P>0.05)。使用HRM对kdr进行突变分析,发现所有样本均为同一基因型。经核酸测序,该扩增片段没有突变位点。结论杭州家蝇溴氰菊酯抗性增加与kdr基因无关。
- 王英红孔庆鑫邱丽华韦凌娅沈林海倪晓平
- 关键词：高分辨率熔解曲线家蝇抗性
- 艰难梭菌分离培养与病原学分子特征研究被引量：13
- 2014年
- 目的建立艰难梭菌分离培养与鉴定的表型诊断技术,并对分离获得的艰难梭菌进行分子学特征研究。方法采集杭州某医院ICU住院患者肛拭标本,接种厌氧血琼脂平皿,置厌氧培养箱,可疑菌株采用厌氧菌鉴定试剂条鉴定;用VIDAS荧光酶联免疫技术检测A/B毒素;用PCR技术检测艰难梭菌毒素基因和核糖体分型。结果 28例ICU患者检出艰难梭菌9株,检出率为32.14%。9株艰难梭菌中,A/B毒素表型阳性7株(77.78%),毒素基因检测均阳性。9株艰难梭菌可分为3种核糖型,其中R3型为优势株,占77.78%。结论杭州市ICU患者检出艰难梭菌的比例较高,均携带A/B毒素基因,且存在优势型别。
- 金慧吴建浓韦凌娅朱越献徐虹甘铁儿胡连根倪晓平
- 关键词：艰难梭菌分子特征
- 老年医学科患者艰难梭菌检测结果与定植危险因素分析被引量：5
- 2016年
- 目的研究医院老年医学科患者粪便中艰难梭菌的检出率,并分析定植危险因素,为制定有效的预防与控制措施提供理论依据。方法 2014年12月14日开展横断面调查,留取老年医学科78例住院患者的粪便标本,用选择性培养基进行厌氧培养,并利用多重PCR技术进行艰难梭菌毒素基因检测,同时收集所有患者的临床资料,进行艰难梭菌定植高危因素分析;采用SPSS18.0软件进行统计分析。结果 78例患者中艰难梭菌培养阳性36例,阳性率46.15%,均为无症状携带患者;36株艰难梭菌中有tcdA+/tcdB+基因14株占38.89%,tcdA-/tcdB-基因18株占50.00%,tcdA-/tcdB+基因4株占11.11%;患者年龄、住院日、1个月内鼻饲管及抗菌药物的使用为其定植高危因素。结论医院老年医学科住院患者艰难梭菌定植率高,年龄、住院日、1个月内鼻饲管及抗菌药物的使用为其定植高危因素。
- 顾吉娜金慧蔡雅卫陈琳沈林海韦凌娅倪晓平胡耀仁邬兴炳
- 关键词：艰难梭菌细菌定植老年患者
