鲍洁
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：武汉大学中南医院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- γ射线增强喉癌细胞hTERTp启动子活性研究
- 2008年
- 目的 探讨γ射线对喉癌细胞中端粒酶逆转录酶基因启动子(hTERTp)活性的影响,以及通过射线增强hTERTp下游基因表达的可行性.方法 将含hTERTp的质粒转染细胞,采用报告基因评价启动子活性,通过RT-PCR和酶活性检测观察射线作用下hTERTp调控辣根过氧化物酶(HRP)的表达,克隆形成实验评价射线对phTERTp-HRP/IAA杀伤和放射增敏作用的影响.结果 在Hep-2细胞中,6 Gy γ射线照射后hTERTp活性是0 Gy照射后的2.96倍,在Hep-2R细胞中是1.60倍.质粒phTERTp-HRP转染Hep-2和Hep-2R细胞后,6 Gy照射组的HRP mRNA分别增高2.1和1.1倍,酶活性分别增高2.54和1.23倍.6 Gy联合吲哚乙酸(IAA)组Hep-2细胞的存活分数为1.3%,Hep-2R细胞的存活分数为3.5%,比对照组明显降低(F=234.280和F=357.148,P值均＜0.01).6 Gy联合IAA组与IAA组相比,放射增敏比SERSF2分别为1.52(Hep-2)和1.68(Hep-2R),存活曲线的参数α分别为0.416、0.099(Hep-2)和0.356、0.090(Hep-2R).结论 γ射线可以增强不同放射敏感性喉癌细胞hTERTp活性,增强下游基因表达.射线联合phTERTp-HRP/IAA对喉癌细胞具有更加明显的杀伤和放射增敏作用.
- 廖正凯周云峰谢丛华熊杰鲍洁周福祥
- 关键词：Γ射线HTERT启动子喉癌
- 辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因系统联合放疗作用于Hep-2细胞效应研究
- 目的研究辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)/吲哚乙酸(indole-3-acetic acid,IAA)自杀基因系统联合放疗对人喉鳞癌 Hep-2细胞株的生长抑制作用及对凋亡的影响,观...
- 鲍洁廖振凯周福祥谢丛华於海军张弓周云峰
- 文献传递
- 喉癌细胞hTERT启动子介导基因治疗研究被引量：4
- 2007年
- 目的研究喉癌细胞中端粒酶活性、端粒酶逆转录酶（hTERT）表达和hTERT启动子活性的关系，以及hTERT启动子介导喉癌基因治疗的可行性。方法将含hTERT启动子的质粒转染不同放射敏感性喉癌细胞（Hep2和Hep2R），通过报告基因评价启动子活性，RT-PCR检测hTERT mRNA表达，PCR—ELISA法检测端粒酶活性。构建质粒phTERTp-HRP，用RT-PCR和酶活性分析评价辣根过氧化物酶（HRP）表达，以克隆形成实验评价phTERTp-HRP／吲哚乙酸（IAA）对克隆形成率和放射敏感性的影响。结果Hep2R的端粒酶活性、hTERT mRNA表达水平和hTERT启动子活性分别是Hep2的1．37、1．43和1．81倍。hTERT启动子活性与hTERT mRNA表达水平和端粒酶活性之间显著正相关（P〈0．01）。转染phTERTp-HRP后，Hep2R细胞中HRP mRNA表达和HRP活性水平分别是Hep2细胞的2．1倍和1．8倍。0．5mmol／L IAA处理后，SERSF2分别为1．24（Hep2R）和1．20（Hep2），无IAA和有IAA组存活曲线参数α分别为0．020、0．090（Hep2R）和0．042、0．099（Hep2）。结论hTERT启动子可用于不同放射敏感性喉癌细胞的基因治疗。hTERTp—HRP／IAA基因治疗有望用于喉癌细胞的靶向杀伤和放射增敏。
- 廖正凯周云峰周福祥骆志国熊杰鲍洁谢丛华刘诗权
- 关键词：基因治疗HTERT启动子喉癌
- 辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因系统联合放射对Hep-2细胞的生长抑制作用被引量：2
- 2008年
- 目的:研究辣根过氧化物酶(HRP)/吲哚乙酸(IAA)自杀基因系统联合放射对人喉鳞癌Hep-2细胞株的生长抑制作用,观察HRP/IAA系统是否具有放射增敏性。方法:将构建成功的pcDNA3.1-HRP转染Hep-2细胞,RT-PCR及Western blotting分别在mRNA和蛋白质两个水平检测其表达;分别以0.5 mmol/L IAA、2 Gyγ-射线及两者联合作用于转染HRP后的Hep-2细胞,实验分为4组:A、对照组;B、加药组;C、放射组;D、加药及放射组。克隆形成实验观察HRP/IAA系统对细胞存活分数的影响,通过拟合生存曲线计算放射增敏比SERSF2;流式细胞仪分析各组细胞周期时相的变化;AnnexinV-FITC试剂盒比较各组细胞凋亡率。结果:转染pcDNA3.1-HRP的Hep-2细胞,RT-PCR和Western blotting能检测到HRP的表达;加药及放射组比单纯放射组细胞存活分数降低,SERSF2为1.302;与A组相比,B、C、D组G2/M期细胞比例升高,S期细胞比例降低,细胞凋亡率均显著增高(P<0.01);D组与B组相比,G2/M期细胞比例升高,S期细胞比例百分比降低,凋亡率增高(P<0.01);D组与C组比较,G0/G1期、G2/M期细胞比例升高(P<0.05),S期细胞比例百分比降低,凋亡率增高(P<0.01)。结论:HRP/IAA系统与放射联合应用能更有效地抑制Hep-2细胞生长、诱导其凋亡,HRP/IAA系统具有放射增敏性。
- 鲍洁廖正凯周福祥谢丛华熊杰刘诗权周云峰
- 关键词：自杀基因疗法放疗HEP-2细胞
- 辣根过氧化物酶/吲哚乙酸系统作为基因导向性酶前体药物疗法的研究被引量：3
- 2006年
- 目的:研究辣根过氧化物酶(HRP)/吲哚乙酸(IAA)系统作为基因导向性酶前体药物疗法(GDEPT)体外作用于人喉鳞癌Hep-2细胞株所产生的细胞毒性作用。方法:构建pcDNA3.1-HRP,将其瞬时转染Hep-2细胞后,Western blotting检测HRP蛋白的表达,MTT法检测加药IAA后对细胞增殖的影响。结果:pcDNA3.1-HRP构建成功,瞬时转染Hep-2细胞后Western blotting能检测到HRP蛋白的表达,MTT法显示HRP/IAA系统能较明显抑制细胞增殖。结论:HRP/IAA系统具备一定的作为基因导向性酶前体药物疗法治疗肿瘤的潜力。
- 熊杰廖正凯周福祥谢丛华鲍洁刘诗权周云峰
- 关键词：辣根过氧化物酶吲哚乙酸HEP-2细胞
