黄路标
- 作品数：4 被引量：20H指数：2
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 乳酸菌表达质粒载体组成型启动子的克隆及表达的初步研究
- 人们普遍认为大部分乳酸菌是安全的益生菌。利用某些乳酸菌可以在胃肠道、泌尿、生殖系统中或粘膜部位黏附存活且无病原性等特点，以乳酸菌作为活菌口服疫苗或粘膜疫苗载体的研究受到了研究者们广泛的重视。乳酸菌活菌携带抗原可以诱导免疫...
- 黄路标
- 关键词：粪肠球菌口服疫苗表达质粒启动子
- 文献传递
- 粪肠球菌中具有启动功能的DNA片段的捕获及鉴定
- 2006年
- PCR扩增来自质粒pUC119的β-内酰胺酶基因(bla)作报告基因,克隆进质粒pNZ8037上的能被Nisin诱导的启动子PnisA下游,构建了粪肠球菌启动功能片段探测载体pNZ-bla.利用该探测载体从粪肠球菌染色体总DNA中克隆到了能在粪肠球菌中表达的一系列具有启动功能的DNA片段,将包含克隆片段的pNZ-P-bla6质粒电击转化粪肠球菌,培养转化子并检测其抗氨苄强度,结果表明其抗氨苄强度大于Nisin诱导的含pNZ-bla质粒的粪肠球菌.表明克隆的功能片段启动能力强于PnisA.在pNZ-P-bla6的启动功能片段下游Sau3AⅠ和EcoRⅠ之间接上绿色荧光蛋白基因作为标记,构建表达绿色荧光蛋白的质粒载体pNZ-P-gfp并导入粪肠球菌中,共聚焦显微镜下可以观察到绿色荧光蛋白的表达.
- 黄路标张伯生任大明
- 关键词：乳酸菌粪肠球菌启动子克隆载体GFP
- 乳酸菌表达质粒的构建被引量：3
- 2004年
- 粪肠球菌是乳酸菌的一个属.采用生物信息学方法,预测了粪肠球菌AS1.2984基因组中乳酸脱氢酶和三磷酸甘油醛脱氢酶的组成型启动子序列.设计引物通过PCR扩增得到这2段启动子序列,并克隆到乳酸菌 大肠杆菌穿梭质粒pNZ8037上,在启动子下游接上绿色荧光蛋白基因作为标记,构建乳酸菌的组成型蛋白表达质粒.通过电转化将上述改造过的pNZ8037质粒导入粪肠球菌中,在共聚焦显微镜中可以观察到绿色荧光蛋白的表达.在乳酸菌MRS培养基中加入乳酸、盐酸、氢氧化钠等试剂,发现可以调节绿色荧光蛋白的表达量.
- 倪伟明黄路标王荫榆刘国元张伯生任大明
- 关键词：粪肠球菌表达质粒绿色荧光蛋白电转化MRS培养基乳酸菌
- 利用PCR-DGGE法分析暗纹东方鲀的弧菌菌落组成被引量：17
- 2006年
- 采用16S rDNA特征序列PCR-DGGE法,分析了不同饵料饲养的暗纹东方的表皮、性腺和肠道中,以弧菌为主的细菌群落的组成。结果表明:(1)共鉴定出暗纹东方体内18种微生物,均归属于变形细菌的gamma亚群,其中13种为弧菌科细菌,3种为肠杆菌科细菌,2种为气单胞菌属细菌;(2)投喂鲜活鱼虾的与投喂人工配合饲料的暗纹东方肠道和性腺中的细菌组成是不同的,在性腺中分离到的所有12种细菌中,只有2种细菌是相同的,约占17%;在肠道中分离到的所有13种细菌中,有4种是相同的,约占31%。而在表皮上所分离到的11种细菌中,有7种细菌是相同的,约占64%;(3)DGGE特征条带V1、V13、V18、V14和V17所代表的细菌只在表皮组织被分离到,V6所代表的细菌仅出现在以鲜活鱼虾作为饵料的暗纹东方性腺中,V5所代表的细菌仅出现在以鲜活鱼虾作为饵料的暗纹东方肠道中;(4)DGGE特征条带V5、V8、V13、V18、V6、V14和V17所代表的细菌不能在TCBS培养基上培养,占18种被鉴定的细菌总数的39%。
- 杨桂梅唐文乔李会荣黄路标任大明鲍宝龙
- 关键词：暗纹东方鲀弧菌RDNA变性梯度凝胶电泳细菌群落
