齐海燕 作品数:5 被引量:9 H指数:2 供职机构: 浙江省人民医院 更多>> 发文基金: 浙江省医药卫生科学研究基金 浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
结直肠癌中钙离子钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ的表达及其意义 2015年 目的分析钙离子钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ体内外的表达情况并探讨其机制,为临床诊断治疗提供新的靶点。方法采用半定量RT-PCR技术检测3种人结直肠癌细胞系、20对结直肠癌组织及其配对癌旁组织中CAMKⅡδmRNA的表达水平;利用Western Blot技术及免疫组化SP技术检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中CAMKⅡδ蛋白的表达情况,并结合患者的临床病理参数进行分析。结果CAMKⅡδmRNA水平在3种结直肠癌细胞系中均有较高的表达,其中SW620表达最高,依次为HT-29、RKO。20对结直肠癌组织,有16对癌组织中CAMKⅡδmRNNA表达高于癌旁组织,其值分别是0.48±0.31和0.25±0.16,两者之间有统计学差异(P=0.002)。1 Western Blot的检测结果与RT-PCR的检测结果相一致,同样可以观察到CAMKⅡδ在配对的癌组织中的表达强于癌旁组织(P<0.05)。免疫组化提示CAMKⅡδ在结直肠癌组织中免疫反应强阳性,而癌旁正常组织中表达明显减弱。20例结直肠癌组织标本中,CAMKⅡδ的阳性表达率为55%(11/20),明显高于癌旁正常组织的表达率20%(4/20)。(P=0.022)结论 CAMKⅡδ在结直肠癌细胞系及结直肠癌组织中高表达,提示可能促进肿瘤细胞的不断增殖,与直肠癌的发生发展密切相关。 齐海燕 徐菲 徐荣臻关键词:结直肠癌 钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ在非霍奇淋巴瘤中的功能和作用研究 被引量:1 2022年 目的 探讨钙离子-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在非霍奇淋巴瘤中的功能及作用机制。方法 人Burkitt’s淋巴瘤Raji细胞随机分为空白组、对照组、实验组和联合组。空白组给予RPMI1640培养基进行培养;对照组先给予pCaMKⅡshRNA-1和pCaMKⅡshRNA-2转染后,再给予RPMI1640培养基进行培养;实验组先给予pcDNA3.1/CaMKⅡ真核表达质转染后,再给予RPMI1640培养基培养;联合组先用pcDNA3.1/CaMKⅡ真核表达质粒转染后,再给予含20μmol·L^(-1)SP600125的RPMI1640培养基进行培养。干预48 h后,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用Western blot法检测淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、磷酸化即刻早期原癌基因(p-c-Jun)和磷酸酸化c-Jun N末端激酶(p-JNK)蛋白的表达情况。结果 干预48 h后,实验组、对照组、联合组和空白组的细胞凋亡率分别为(29.57±4.38)%,(5.23±0.89)%,(21.24±0.97)%和(11.85±1.24)%,Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.38±0.08,1.92±0.13,1.39±0.09和1.13±0.09,p-c-Jun蛋白相对表达量分别为1.06±0.08,0.14±0.05,0.71±0.09和0.58±0.06,p-JNK蛋白相对表达量分别为1.53±0.12,0.28±0.06,1.05±0.09和0.83±0.08。实验组的上述指标与对照组和联合组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 CaMKⅡ可能通过激活JNK途径,从而诱导Raji细胞凋亡。 齐海燕 蓝建平 杨天新 王文松 叱珑关键词:非霍奇金淋巴瘤 细胞凋亡 CaMKⅡ_γ通过上调NFκB信号通路促进结直肠癌细胞的增殖 被引量:3 2013年 目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱγ(CaMKⅡγ)体内外促进结直肠癌细胞增殖的作用并探讨其机制。方法半定量RT-PCR法测定5种结直肠癌细胞系及20对结直肠癌组织及其配对癌旁组织中CaMKⅡγmRNA表达水平。用慢病毒载体pLenti6.3-MCS-IRES2-eGFP制备慢病毒颗粒Lenti-CaMKⅡγ,转染SW620细胞,建立稳定表达CaMKⅡγ结直肠癌细胞系SW620-CaMKⅡγ。测定SW620-CaMKⅡγ细胞的生长曲线及克隆形成能力。Western blotting检测SW620-CaMKⅡγ细胞IKKα、IKKβ、IKKγ、p-IKKα/β、P-IκB和IκB表达水平。免疫荧光检测SW620-CaMKⅡγ细胞NF-κB p65核浆及核内的表达情况。检测裸鼠移植瘤的瘤体积。结果 CaMKⅡγ在5种结直肠癌细胞系中的mRNA水平均高,在20对组织中有18对癌组织mRNA水平比癌旁组织高。慢病毒转染的CaMKⅡγ过表达细胞系增殖能力增强(P<0.05)。CaMKⅡγ能够激活细胞内的NF-κB信号通路,促进NF-κ3 p65进核。CaMKⅡγ过表达细胞的裸鼠移植瘤瘤体积大于阴性对照(P<0.05)。结论 CaMKⅡγ体内外均能促进结直肠癌细胞的增殖,并激活NF-κB通路。 徐菲 齐海燕 于晓方 徐荣臻关键词:结直肠癌 高三尖杉酯碱对白血病细胞凋亡、增殖的影响及对Ras/Raf/MEK通路的抑制作用 被引量:1 2023年 目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)对白血病细胞凋亡、增殖的影响及对Ras/Raf/MEK通路的抑制作用。方法取对数生长期K562、Kasum-1细胞进行研究,分别用0、10、20、50 ng/ml的HHT处理。采用MTT检测相对细胞活力,计算24、48、72 h时细胞IC50,采用克隆形成实验检测检测细胞克隆数量,采用流式细胞仪检测细胞凋亡水平,采用蛋白质印迹法检测Ras/Raf/MEK通路蛋白和凋亡相关蛋白相对水平。结果24、48、72 h时HHT对K562细胞IC50分别为80.69、65.28、50.76 ng/ml,HHT对Kasum-1细胞IC50分别为85.16、70.11、51.14 ng/ml。培养24、48、72 h时,10、20、50 ng/ml HHT细胞存活率均低于0 ng/ml,20、50 ng/ml HHT细胞存活率均低于10 ng/ml,50 ng/ml HHT细胞存活率均低于20 ng/ml HHT,差异有统计学意义(P<0.05)。10、20、50 ng/ml HHT细胞克隆数均低于0 ng/ml,20、50 ng/ml HHT细胞克隆数均低于10 ng/ml HHT,50 ng/ml HHT细胞克隆数均低于20 ng/ml HHT,差异有统计学意义(P<0.05)。10、20、50 ng/ml HHT细胞凋亡率均高于0 ng/ml HHT,20、50 ng/ml HHT细胞凋亡率均高于10 ng/ml HHT,50 ng/ml HHT细胞凋亡率均高于20 ng/ml HHT,差异有统计学意义(P<0.05)。10、20、50 ng/ml HHT RAS、p-cRAF、p-MEK蛋白表达量均低于0 ng/ml HHT,20、50 ng/ml HHT RAS、p-cRAF、p-MEK蛋白表达量均低于10 ng/ml HHT,50 ng/ml HHT RAS、p-cRAF、p-MEK蛋白表达量均低于20 ng/ml HHT,差异有统计学意义(P<0.05)。10、20、50 ng/ml HHT Survivan蛋白表达量均低于0 ng/ml HHT,Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白表达量均高于0 ng/ml HHT;20、50 ng/ml HHT Survivan蛋白表达量均低于10 ng/ml HHT,Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白表达量均高于10 ng/ml HHT、50 ng/ml HHT Survivan蛋白表达量均低于20 ng/ml HHT,Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白表达量均高于20 ng/ml HHT,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HHT可抑制Ras/Raf/MEK通路活性,抑制白血病细胞增殖和促进白血病细胞凋亡。 齐海燕 蓝建平 宋晓露 王晓刚 王文松关键词:高三尖杉酯碱 白血病 凋亡 增殖 地西他滨联合小剂量IA方案治疗老年急性髓系白血病患者的临床疗效 被引量:4 2021年 目的探讨去甲基化药物地西他滨联合小剂量IA(去甲氧柔红霉素+阿糖胞苷)方案治疗老年急性髓系白血病患者的临床疗效。方法选取2016年10月至2020年7月浙江省人民医院收治的老年急性髓系白血病患者72例。其中38例患者采用地西他滨联合小剂量IA方案治疗,为观察组;另34例采用小剂量IA方案治疗,为对照组。观察并比较两组患者临床疗效、不良反应发生情况及预后,分析患者总生存期影响因素。结果治疗1个疗程及4~6个疗程后,观察组患者治疗总有效率均高于对照组(73.68%比47.06%、76.92%比43.75%,均P<0.05)。观察组患者肺部感染、骨髓抑制、恶心、呕吐及肝肾功损害等不良反应发生率比较差异均无统计学意义(52.63%比47.06%、81.58%比64.71%、60.53%比52.94%、10.53%比8.82%,均P>0.05)。患者染色体核型差异、治疗方案差异是影响患者总生存期的因素。与对照组相比,观察组患者中位总生存期、中位无进展生存期均明显改善(15个月比10个月、9.61个月比6.06个月,均P<0.05)。结论去甲基化药物地西他滨联合小剂量IA方案治疗老年急性髓系白血病患者临床疗效确切,未增加不良反应发生率,值得临床借鉴。 齐海燕 王文松 蓝建平关键词:地西他滨 去甲氧柔红霉素 阿糖胞苷 去甲基化药物 老年白血病