严健
- 作品数：5 被引量：7H指数：1
- 供职机构：杭州师范大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 鱼油对高果糖高脂高胆固醇饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝炎的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨鱼油对高果糖高脂高胆固醇饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的干预效果.方法 45只6周龄C3H小鼠随机分为3组：普通饲料组（对照组）、猪油组（模型组）、鱼油组（干预组）.分别在4、8、16周末处死小鼠,每组次5只.观察血生化指标,肝指数（肝脏湿重/体重）、肝脏炎症程度及炎症相关基因的表达情况.结果 16周末模型组血清总胆固醇（TC）和血清ALT及AST比对照组显著升高,鱼油组TC和ALT、AST水平与猪油组相比明显下降.基因表达检测显示猪油组单核细胞趋化因子MCP-1的表达在第4周显著上调（P＜0.05）,而鱼油组MCP-1mRNA水平明显低于猪油组（P＜0.05）.猪油组TNF-α和TGF-β在第8周表现出上调趋势,鱼油组对此上调有抑制作用.HE染色显示猪油组和鱼油组在第8、16周出现明显的脂肪变及炎症细胞浸润.猪油组的炎症浸润较鱼油组显著.肝库普弗细胞的标记物CD68在8周（P＜0.05）、16周表达上调,鱼油组对此上调有抑制作用.结论 鱼油能减轻高果糖高脂高胆固醇诱导的小鼠NASH肝损伤.
- 庄振杰刘静柳银兰严健罗燕施军平
- 关键词：鱼油脂肪肝枯否细胞
- 高脂高果糖诱导的非酒精性脂肪性肝病小鼠枯否细胞及其信号分子的活化
- 2013年
- 目的探讨高脂高果糖饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）小鼠枯否细胞（KCs）活化及其信号通路蛋白的变化，了解KCs在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）致病机制中的意义。方法将20只6～8周龄SPF级C3H小鼠随机分为4组（正常组、果糖组、高脂组、高脂果糖组）饲养，每组5只。16周后处死小鼠，做肝脏病理检查，同时使用蛋白免疫印迹（WesternBlot）方法检测肝组织中F4／80、NF-KB、p-AKT、AKT的表达情况。结果与正常组比较，果糖组、高脂组、高脂果糖组肝组织脂质沉积明显，肝脏HE染色存在明显的炎症及肝细胞脂肪变，高脂高果糖组最为严重。与正常组比较，3组模型组小鼠肝组织中F4／80、NF—KB显著升高，果糖组p-AKT（P〈0．01）、高脂高果糖组AKT（P〈0．05）明显降低。结论高脂高糖饮食可使C3H／HeN小鼠出现典型的非酒精性脂肪肝表现，NAFLD形成涉及肝组织中KCs活化及其相关信号通路的激活。
- 朱明利刘静柳银兰杨文君罗燕庄振杰焦其彬陈建玉严健卞冬雪马晓洁荀运浩施军平
- 关键词：枯否细胞鼠科
- 成纤维细胞生长因子21类似物对非酒精性脂肪性肝病斑马鱼模型疾病指征的改善情况被引量：1
- 2023年
- 目的检测成纤维细胞生长因子21类似物对非酒精性脂肪性肝病斑马鱼模型的治疗效果。方法采用每日给予3倍正常饮食的方式喂养野生型斑马鱼建立非酒精性脂肪性肝病斑马鱼模型,外源给予终浓度为0.5μmol/L PF-05231023,20 d后检测其体长、体质量、体内甘油三酯等指标。肝脏组织切片HE染色评价病理学变化。定量PCR检测与脂质代谢、内质网应激及炎症等相关基因的表达变化。组间比较采用t检验进行统计学分析。结果QPCR和免疫荧光染色结果显示,成纤维细胞生长因子21在模型组斑马鱼高表达。加入成纤维细胞生长因子21类似物PF-05231023,显著降低模型组斑马鱼体长和体质量(P<0.01)、模型组体内甘油三酯的含量(P<0.05)。肝脏HE染色结果显示PF-05231023可以减轻模型组斑马鱼肝脏脂肪大泡和小泡等病变。定量PCR结果表明PF-05231023降低模型组脂质生成因子表达(P<0.01),增加脂质氧化相关因子表达(P<0.05)。PF-05231023降低模型组与炎症相关的因子表达(P<0.001)。PF-05231023降低模型组与内质网应激相关基因表达(P<0.05)。加入PF-05231023,可以减低油酸诱导HepG2细胞中的脂质和甘油三酯水平。结论加入FGF21类似物,可以改善非酒精性脂肪性肝病斑马鱼模型的疾病指征。
- 芈肖肖严健施军平
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病疾病斑马鱼
- 顺铂诱导斑马鱼侧线毛细胞损伤及再生模型的建立被引量：5
- 2016年
- 目的建立顺铂诱导斑马鱼侧线毛细胞损伤及再生模型。方法采用顺铂溶液直接孵育斑马鱼方法,通过免疫组化、荧光特异性标记侧线细胞的转基因鱼活体成像、原位杂交等方法统计分析顺铂处理前后斑马鱼侧线毛细胞剩余情况以及药物撤除后毛细胞再生情况。结果顺铂引起斑马鱼侧线毛细胞丢失具有剂量依赖效应,相同的孵育时间较高浓度的顺铂孵育后几乎可杀死全部侧线毛细胞;毛细胞再生与顺铂的毒性积累程度有关,较低浓度孵育较短时间毛细胞再生速度较快。毛细胞再生数目随着时间的延长不断增加,72小时后可再生原有数目的90%以上。结论斑马鱼侧线毛细胞经不同浓度顺铂孵育不同时间后,其毛细胞丢失与再生具有剂量和时间依赖效应。
- 芈肖肖严健李圆施军平
- 关键词：顺铂毛细胞损伤毛细胞再生
- Wnt/β-catenin信号通路对斑马鱼侧线毛细胞再生影响的实验研究
- 2018年
- 目的探讨Wnt/β-catenin信号通路对斑马鱼侧线毛细胞再生影响。方法利用模式动物斑马鱼侧线毛细胞可再生的优势,通过流式细胞分选助细胞类群、荧光定量PCR、整胚原位杂交以及外源添加Wnt/β-catenin信号通路小分子化合物抑制剂和增强剂的方法,观察顺铂诱导毛细胞损伤过程中Wnt/β-catenin信号通路各因子的时空表达情况及毛细胞再生情况变化,为探究经典信号因子Wnt/β-catenin信号通路对毛细胞再生的影响提供在体实验依据。结果反转录PCR(reverse transcription PCR,RTPCR)与定量PCR(quantitative PCR,Q-PCR)结果显示,与对照组相比,顺铂处理组Wnt/β-catenin信号通路配体wnt2,wnt3a和关键因子ctnnb1(beta-catenin)在助细胞类群中表达量升高(P<0.05)。整胚原位杂交结果表明Wnt/β-catenin信号通路拮抗因子dkk1a和dkk2在助细胞类群表达量下降。外源添加抑制剂,低浓度连续浸泡48小时再生毛细胞数目可达到正常组40%左右,高浓度连续浸泡48小时毛细胞再生数目仅为正常组10%左右。而在毛细胞再生前12小时时间窗添加抑制剂也可观察到毛细胞再生数目减少(P<0.0001)。外源添加增强剂,毛细胞再生数目相较对照组无显著变化(P>0.05)。结论通过分选助细胞各因子表达变化、整胚原位杂交显示时空图谱以及外源添加抑制剂与增强剂,得出结论Wnt/β-catenin信号对斑马鱼侧线毛细胞再生是必需非充分条件。
- 芈肖肖严健李圆施军平
- 关键词：动物顺铂毛细胞斑马鱼WNT/Β-CATENIN信号通路
