刘凯山 作品数:6 被引量:9 H指数:2 供职机构: 遵义医学院 更多>> 发文基金: 贵州省教育厅自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
重组hIL-10对皮肤移植家兔T细胞凋亡及IL-2的影响 被引量:4 2011年 目的探讨重组hIL-10诱导皮肤移植家兔与外周血T细胞凋亡的关系。方法将18只受体家兔随机分成重组hIL-10实验组[低剂量5μg/(kg.d);高剂量10μg/(kg.d)],CsA阳性对照组[低剂量5 mg/(kg.d);高剂量10 mg/(kg.d)],hIL-10+CsA联合组[5μg+5 mg/(kg.d)],生理盐水阴性对照组(1 mL/d)共6组,每组3只;供体18只。实验组及对照组均在术前1 d至术后9 d持续肌肉注射药物,并观察各组移植术后皮片情况。流式细胞仪检测各组家兔术后1、4、7、14 d外周血T细胞凋亡率的变化。用ELISA法检测家兔术后1、4、7、14 d血清中细胞因子IL-2的变化。结果重组hIL-10组与生理盐水组皮片平均存活时间相比较,存在显著性差异(P<0.05)。hIL-10+CsA组皮片存活时间与低剂量重组hIL-10组及低剂量CsA组比较有明显差异(P<0.05)。重组hIL-10组术后T细胞凋亡率随着时间逐渐升高,血清IL-2的水平逐渐降低,与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05),其作用呈剂量依赖性;hIL-10+CsA组与单独用药的低剂量重组hIL-10组及低剂量CsA组相比,外周T细胞凋亡率升高,血清IL-2的水平下降,差异有显著性(P<0.05)。结论重组hIL-10对家兔皮肤移植排斥有抑制作用,延长移植皮片存活时间,其机制可能是通过诱导外周血T细胞凋亡,下调外周血IL-2水平,实现免疫抑制,或与诱导免疫耐受有关。 李阳飞 王春梅 孙万邦 张磊 温琼娜 刘凯山关键词:皮肤移植 细胞凋亡 白介素2 重组人白介素-10对兔皮肤移植排斥反应及外周血T细胞亚群的影响 2013年 目的观察重组人白介素-10(rhIL-10)对白兔皮肤移植排斥反应及外周血T细胞亚群的影响。方法 36只白-1-1兔随机等分为供体组和受体组,再将18只受体白兔随机分为rhIL-10组(5、10 g·kg·d)、环孢素(CsA)阳性对照组(5、-1-1-1-1-1-110 mg·kg·d)、rhIL-10+CsA联合组(5 g·kg·d hIL-10+5 mg·kg·d CsA)、生理盐水阴性对照组(1 mL/d)。在移植++前1 d至术后8 d连续肌注药物,观察各组皮片移植排斥反应情况及外周血CD4和CD8细胞数、CD4/CD8细胞比值。结果rhIL-10组排斥反应发生时间比阴性对照组延长(P<0.05),而rhIL-10+CsA组排斥反应发生时间比低剂量rhIL-10及+CsA组延长(P<0.05)。在发生急性排斥反应时,CD4细胞数及CD4/CD8细胞比值升高,在皮片坏死时达到峰值。结论 rhIL-10可抑制白兔皮肤移植排斥反应,CD4/CD8细胞比值有助于监测排斥反应发生。 温琼娜 夏嫱 张磊 刘凯山 孙万邦关键词:白介素-10 皮肤移植 淋巴细胞 重组hIL-10抗家兔皮肤移植反应及其对Treg细胞、IL-10、TGF-β的影响 目的:经rhIL-10或CsA作用,观察家兔皮肤移植后移植皮片出现排斥的时间、移植皮片存活时间及外周血液中Treg细胞、IL-10、TGF-β的变化,研究IL-10在抗移植排斥反应治疗中Treg细胞、调节因子IL-10、... 刘凯山关键词:白细胞介素-10 CD4+CD25+调节性T细胞 转化生长因子-Β 文献传递 重组人白细胞介素10抗家兔同种异体皮肤移植排斥模型的建立 被引量:7 2010年 背景:研究表明,白细胞介素10在移植排斥反应的预防和治疗中具有一定的应用前景,有望成为一种新的临床用免疫抑制剂。动物移植模型是研究免疫抑制剂常用的实验平台,最常用的皮肤移植模型动物是小鼠,但小鼠属于小动物模型,移植技术要求较高。目的:建立家兔同种异体皮肤移植模型,观察重组人白细胞介素10抗家兔皮肤移植排斥反应的效果。方法:取家兔背部皮肤修剪成含真皮层的全厚皮片、中厚皮片和不含真皮层的薄层皮片进行家兔自体皮肤移植,随机分为固定组和非固定组,固定组用自制脖套对家兔头颈部活动进行一定限制;药物抗家兔同种异体移植排斥设重组人白细胞介素10组、环孢素A阳性对照组和生理盐水阴性对照组。采用混合淋巴细胞反应法观察家兔混合淋巴细胞反应增殖指数。在30d内连续观察移植皮肤出现排斥的时间和移植皮片平均存活时间。结果与结论:供、受体混合淋巴细胞培养呈增殖反应,表明家兔同种异体主要组织相容性复合体不同,相互皮肤移植可发生排斥反应。移植皮片厚度以含真皮的中厚皮片为最佳;自制脖套固定可有效限制家兔脖头颈部活动,有利于移植创面的保护。实验成功建立了重组人白细胞介素10抗家兔同种异体皮肤移植排斥模型,重组人白细胞介素10具有抗移植排斥的作用。 冯继红 孙万邦 罗军敏 刘凯山 张磊 温琼娜 陈富超 王胜香关键词:皮肤移植 免疫抑制剂 移植排斥 白细胞介素-10的制备工艺及应用 本发明公开了医药生物技术领域的一种白细胞介素-10的制备工艺及应用,制备工艺包括:PCR扩增hIL-10基因、构建hIL-10表达载体、转化DH5α感受态细胞、重组质粒鉴定、电转化毕赤酵母X-33菌株重组酵母菌的筛选、r... 陈富超 孙万邦 罗军敏 张磊 刘凯山 温琼娜文献传递 重组hIL-10抗家兔皮肤移植排斥反应中血清IL-10及其抗体的检测 被引量:1 2011年 目的检测重组人白细胞介素-10(recombinant human interleukiu-10,rhIL-10)作用后皮肤移植家兔血清中IL-10及其抗体的变化,探讨外源性hIL-10诱生IL-10增强抑制效应和外源性hIL-10有无免疫原性,为rhIL-10的应用提供实验依据。方法家兔分为6组:①组rhIL-10低剂量,②组rhIL-10高剂量,③组环孢菌素(CsA)低剂量,④组CsA高剂量,⑤组rhIL-10+CsA低剂量联合,⑥组生理盐水组。移植术前1d开始用药,连续用药10d,肌肉注射。术前1d、术后1d、4d、7d、14d、21d、28d分别取外周血,分离血清,以ELISA方法检测血清中IL-10及IL-10抗体水平。结果①移植家兔血清IL-10检测,术后各组结果较术前均有升高,在术后7d达到高峰,术后4d、术后7d rhIL-10低剂量及高剂量组IL-10水平高于其余各组(P<0.05)。CsA低剂量及高剂量组IL-10水平低于rhIL-10组及联合组(P<0.05)。②移植家兔血清抗IL-10抗体检测,术后各组检测结果较术前均无明显升高(P>0.05),与抗体阳性对照比较有显著差异(P<0.05)。结论 rhIL-10抗家兔皮肤移植反应中,家兔血清IL-10含量在皮肤移植后明显升高,表明外源IL-10诱导内源性IL-10分泌,从而增强抑制排斥反应;外源IL-10注射后家兔血清中没有检测出特异性抗体,外源性rhIL-10进入机体没有免疫原性。 陈富超 孙万邦 刘凯山 张磊 温琼娜 冯继红 罗军敏关键词:皮肤移植 抗体