刘好桔
- 作品数：19 被引量：52H指数：4
- 供职机构：江西农业大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：江西省自然科学基金国家自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程文化科学生物学更多>>
- 纤维素降解复合菌系中纤维结合蛋白的分离及鉴定被引量：5
- 2015年
- 采用亲和消化法分离纯化了纤维素降解复合菌系中的纤维素结合蛋白,纯化后的纤维结合蛋白液经SDS-PAGE（聚丙烯酰氨凝胶电泳）后得到13条条带（命名为CBP1- 13）,通过对其进行酶谱分析,发现低分子量的蛋白主要表现CMC（羧甲基纤维素钠）酶活性,而高分子量（66- 200 kDa）的蛋白兼有CMC酶和木聚糖酶的活性,其中纤维结合蛋白CBP6表现出的木聚糖酶和CMC酶活性最强.这些条带经质谱鉴定后被确定由8种蛋白组成,除CBP4为Paenibacillus sp.分泌的木聚糖酶5外,其余的蛋白均由C.clariflavum DSM 19732所产生,其中CBP1-3为β-1,4木聚糖酶,CBP5,6为碳水化合物结合蛋白,CBP7-9,11,12为锚定蛋白,CBP10和CBP13为未知蛋白.通过结构域预测,发现除纤维结合蛋白CBP13外所有的蛋白均具有一种催化结构域,分别隶属于第8、9、10及48家族的糖苷水解酶,而部分蛋白（CBP1,2,4-6）还具有碳水化合物结构域或者锚定蛋白结构域（CBP5- 12）.
- 黄根树孔令保朱向东王刚刘好桔张庆华
- 关键词：纤维素降解复合菌系纤维结合蛋白
- 女贞子抗丙型肝炎病毒复制酶活性成分研究被引量：11
- 2013年
- 在前期发现女贞子(Ligustrum lucidum,LL)提取物抑制丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)复制酶(NS5B)活性的基础上,研究女贞子提取物抑制NS5B活性的化学成分及其作用机制。采用乙酸乙酯萃取和薄层色谱法分离女贞子水提取物,NS5B活性抑制实验检测各个分离组分的抑制活性。结果显示,分离组分1和2能够抑制NS5B活性,组分2的抑制能力更强。采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)及NS5B活性抑制实验分析组分1和2中的活性成分。结果显示,熊果酸和齐墩果酸分别是组分1和2的抗NS5B活性成分,齐墩果酸的抑制能力更强。进一步的抑制机制分析发现,熊果酸和齐墩果酸通过非竞争抑制作用抑制NS5B活性,熊果酸和齐墩果酸的Ki分别约为4.7μg·mL 1(10μmol·kg-1)和2.5μg·mL-1(5.5μmol·kg-1)。本研究发现齐墩果酸和熊果酸通过非竞争抑制作用抑制丙型肝炎病毒复制酶NS5B活性,揭示这两个天然化合物具有潜在的丙型肝炎治疗价值。
- 孙瑞娜张艳妮汪俊刘好桔孔令保
- 关键词：丙型肝炎病毒女贞子熊果酸
- HCV NS5B在人肝癌细胞系Huh7细胞内的表达及活性分析被引量：1
- 2009年
- 目的为靶向抗HCV药物筛选奠定基础。方法使用脂质体将包含HCV非结构蛋白5B(NS5B)基因的重组载体pcDNA-5B转染至人肝癌细胞系Huh7细胞,分别采用RT-PCR和Western Blot鉴定NS5B mRNA和蛋白表达,采用荧光素酶试验检测NS5B细胞内RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)活性。结果转染的Huh7细胞出现1.8kb的特异性NS5B mRNA目的带及一条相对分子质量约66 kD的蛋白目的带,且后者具有细胞内RdRp活性。结论人肝癌细胞系Huh7细胞可成功表达具有细胞内RdRp活性的NS5B,以其为靶标的抗HCV药物可为临床治疗提供新思路。
- 孔令保吴晓玉朱向东刘好桔刘志文王园秀熊舒
- 关键词：NS5BHUH7细胞活性
- 丙型肝炎病毒NS4B蛋白调控Hep3B细胞非折叠蛋白质反应研究被引量：3
- 2012年
- 研究表达的丙型肝炎病毒(HCV)NS4B对Hep3B细胞非折叠蛋白质反应的影响。NS4B重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)NS4B通过脂质体转染Hep3B细胞,G418筛选和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内XBP1 mRNA剪接,Western blot鉴定ATF6蛋白切割,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78和XBP1启动子活性。G418筛选和Western Blot鉴定证实获得稳定表达NS4B的Hep3B细胞;在该细胞内,XBP1 mRNA剪接、ATF6切割、XBP1和Grp78启动子激活均被检测到。NS4B在Hep3B的稳定表达诱导了非折叠蛋白质反应。
- 张艳妮张庆华陈瑶刘好桔刘志文孔令保
- 关键词：丙型肝炎病毒NS4BHEP3B
- 持续表达HCV NS5B的Bel-7402细胞系的构建与鉴定被引量：2
- 2009年
- HCV NS5B是HCV复制所必需的RNA依赖的RNA聚合酶和抗HCV药物的一个理想靶标,构建持续表达NS5B的肝细胞系将有助于研究HCV在肝细胞的复制机制和抗HCV药物的研发。ScaI酶切含有NS5B基因的重组表达载体pcDNA-5B,获得的线性化pcDNA-5B通过脂质体转染人肝癌细胞系Bel-7402细胞,G418筛选转染细胞。阳性细胞经基因组PCR、RT-PCR和Western Blot鉴定,证实获得持续表达NS5B的Bel-7402细胞系。体外复制试验和荧光素酶试验表明:Bel-7402细胞表达的NS5B蛋白有体外和细胞内RNA依赖的RNA聚合酶活性。持续表达有聚合酶活性的HCV NS5B的Bel-7402细胞系的建立为进一步研究NS5B催化的HCV复制机制和NS5B抑制剂的筛选奠定基础。
- 孔令保吴晓玉李昆太徐波刘好桔熊舒珺
- 关键词：HCVNS5BBEL-7402活性
- 深化生物科学专业实验课程体系改革以主动适应社会对生物科技人才的需求
- 2019年
- 为培养高素质生物科学类人才,江西农业大学生物科学专业改革专业实验课程教学体系与内容,调整实验室运转机制,变革实验考核方法,强化学生的生物科学专业技能。实践证明,这种改革是必要和正确的,可以更好地培养社会或市场所需要的生物科学类高级技术人才。
- 胡颂平杨堉楠祝锦敏张琳夏海林刘好桔
- 关键词：生物科学实验课程体系
- 江西省首次发现不明水生生物聚集体的初步研究报告被引量：1
- 2009年
- 目的:为了探索不明水生生物聚集体的生物种类组成和化合物成分。材料:以南昌县泾口乡大浦村水域中的不明水生生物聚集体为试验材料。通过对水生生物聚集体的细胞生物组成釆用显微观察,通过与微生物鉴别图谱比对,经中科院武汉水生所及上海水产学院的专家鉴定;聚集体透明的非细胞物质釆用理化分析法,分别测定其水份,有机物质的组成含量和灰份含量。结果:聚集体细胞生物主要由蓝藻门(Cyanophyta)的6种藻类:水网藻(Hydrodictyon reticulatum)、水溪绿球藻(Chlorococcumin fusionum)、椭圆小球藻(Chlorella ellip-soidea)、四尾柵藻(Scenedesmus quadricauda)、亚麻色单歧藻(Tolypothrixbyssoides)、阿氏拟鱼腥藻(Anabaenopsisarnolodii)和硅藻门(Bacillariophyta)的3种藻类:偏心圆筛藻(Coscinodiscus excentricus)、短线脆杆藻(Fragilariabrevistriata)、近缘桥弯藻(Cymbella affinis)等组成;聚集体透明的非细胞物质主要由水分、有机质和灰分组成,其中水分占98.90%,干物质仅占1.10%;在干物质中总糖和蛋白质及灰份的含量分别为17.37%、79.77%和2.68%。结果表明:南昌县泾口乡大浦材水域中的发现的不明水生生物聚集体主要由水网藻等9种分布广泛的藻类组成,无毒,并非是传说中的"太岁"。
- 王飞高勇生刘好桔李蓉涂国全
- 关键词：蓝藻
- 三种啤酒酵母菌种发酵性能的比较被引量：6
- 2011年
- 采用三种不同酵母菌种,对其进行了发酵性能比较。测定了热死灭温度、凝聚性、死亡率、双乙酰还原能力、发酵速度、高级醇与酯及发酵终了理化性质等方面的综合指标。结果显示菌种JB的综合性能最佳,具有应用于啤酒生产的潜能。
- 邱秀文郭晓燕吴晓玉刘好桔
- 关键词：啤酒酵母双乙酰发酵
- 洋葱伯克霍尔德菌T1828质粒消除方法及条件被引量：4
- 2011年
- 采用十二烷基硫酸钠和提高生长温度结合法、紫外线涂布平板法、冻融法、吖啶橙法和黄芩甙提取液消除法等方法消除洋葱伯克霍尔德菌T1828菌株质粒,探讨适合洋葱伯克霍尔德菌质粒消除的方法,并研究最佳质粒消除条件。结果表明十二烷基硫酸钠和提高生长温度结合法最适合于洋葱伯克霍尔德菌T1828质粒消除,同时最佳消除条件为:在T1828培养16 h后加入SDS使其终浓度0.1%,36°C处理18 h,消除率达到49%。筛选到的无质粒突变株可以用于进一步的研究。
- 钟义军吴晓玉刘好桔武琳饶志强王园秀
- 关键词：质粒消除
- 洋葱伯克霍尔德菌T1828和ZWL15-Tn5转座子插入突变体库的构建及相关突变体的筛选初探
- 2014年
- 采用双亲结合法将含有Tn5转座子的质粒pRLl063a导入洋葱伯克霍尔德菌T1828和ZWL15中,在含有卡那霉素和链霉素的抗性平板上筛选抗性接合子。通过随机插入诱变后,共获得300个突变株。PCR检测随机挑选的6株突变株,结果显示为阳性;且6株突变株发酵后高效液相色谱检测不能合成冠毒素。研究结果表明,6株突变株均已被Tn5插入染色体基因组且丧失冠毒素合成的能力。本研究为今后转座子插入位点侧翼序列的克隆与测序,并进行功能回复试验提供了基础。
- 刘好桔钟义军饶志强葛岚吴晓玉
- 关键词：洋葱伯克霍尔德菌突变体库
