刘小辉
- 作品数：18 被引量：23H指数：3
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- 低温-18℃冷冻保存人肝癌细胞的实验研究被引量：1
- 2000年
- 目的 :了解低温 - 18℃保存人肝癌细胞Bel74 0 2 回收率 ,并观察其复苏后培养的形态。方法 :采用不同浓度的二甲基亚砜 (DMSO)为冷冻保护剂 ,直接于 - 18℃冰箱中冻存人肝癌细胞株Bel74 0 2 ,于冻存后 1周、 1个月、 2个月和 3个月分别取样观察分析。结果 :冻存 3个月后 ,台盼蓝拒染存活率 >70 % ,置瓶培养后第 4天细胞均可贴壁生长、形成克隆。结论 :用 - 18℃普通冰箱冻存肿瘤细胞效果好 。
- 周燕琼刘小辉
- 关键词：冷冻保存肝癌细胞
- 人神经胶质瘤组织中连接蛋白43的表达
- 2000年
- 目的 为了研究人神经胶质瘤发生中连接蛋白 43的作用。方法 本实验用免疫组化的方法 ,检测了 2 6例不同级别的脑瘤组织中连接蛋白 43的蛋白表达。结果 在正常脑组织星形胶质细胞和良性的脑质细胞瘤连接蛋白 43表达阳性反应 ,在恶性的脑胶质细胞瘤 ,连接蛋白 43明显减弱 ,呈弱性或阴性。结论 人脑胶质细胞肿瘤的发展及恶化程度与其连接蛋白 43蛋白表达有关 ;在癌的多阶段学说 (起始阶段、促癌变阶段、进展阶段 )中 ,连接蛋白 43表达的减少被认为是促瘤变阶段的重要机制。
- 曾自立徐锡金刘小辉周燕群
- 关键词：连接蛋白43胶质细胞肿瘤
- 人肝癌细胞冷冻保存方法研究被引量：6
- 2000年
- 有关利用普通冰箱-18℃冷冻保存组织及细胞,迄今未见报道.本实验对-18℃冷冻保存人肝癌细胞株 Bel-7402进行实验研究,现报告如下:1 材料和方法人肝癌细胞株 Bel-7402引自中山医科大学实验动物中心,置于含100 mL/L新生牛血清的 RPMI 1640培养液中,在37℃,50 mL/L CO2,饱湿条件下传代培养,细胞贴壁生长.将处于对数生长期的细胞经 D-Hank’s 液洗2次,后用2.5 g/L 胰蛋白酶消化,再用含100mL/L 新生牛血清的1640液洗涤1次.后分别用含0mL/L,5mL/L,10mL/L,15mL/L,20mL/L DMSO的完全培养基（含100mL/L 新生牛血清1640）重新制成细胞悬液.细胞浓度保持在1×106/mL 左右.将细胞悬液置于2mL的硬塑料冻存管中,加盖密封,做好标记.直接迅速地放入-18℃冰箱中冻存.每种浓度各分装12支冻存管,每管装1 mL 悬液.于1 wk,1 mo,2 mo,3 mo 后分别进行融冻.将上述的冻存管,直接从-18℃冰箱中取出,迅速投入40℃水浴中使之迅速完全融化（约1min 左右）.迅速倒入已备好的RPMI 1640营养液中,并用 RPMI 1640洗涤冻存管2次.后离心,再用 RPMI 1640洗涤细胞2次,置瓶培养;同时制成一定量的细胞悬液,取其中0.5mL 的细胞悬液加入4mL/L 台盼蓝染液0.5 mL,混匀,取少许滴于计数板的计数池内,静置2min 后计算细胞存活率（不着蓝色的细胞为活细胞）.细胞存活率=（活细胞数）/（活细胞数+死细胞数）×100%观察指标:①存活率:台盼蓝拒染试验计数;②冻存后复苏的细胞接种入培养瓶,置于含100mL/L 新生牛血清的 RPMI1640培养基中,于37℃,50 mL/L CO2,饱湿培养箱中培养,24 h 后半保留换液,每天观察.2 结果-18℃条件下用不同浓度的 DMSO 为冷冻保护剂,冻存Bel-7402 1 wk,1 mo,2 mo 及3 mo 后细胞存活率及镜下观察到的生长状况见表1.表1 不同浓度 DMSO 对 Bel-7402的影响DMSO 浓度细胞存活率（%） 接种后见细胞贴壁生长天数（mL/L） 1 wk 1 mo 2 mo 3mo 1 wk 1 mo 2 mo 3 mo0 22.1 17
- 周燕琼刘小辉刘幸平曾自立
- 关键词：冷冻保存BEL-7402肝癌细胞
- 双头畸形伴内脏多发畸形一例
- 1995年
- 双头女婴于妊娠41周经剖腹出娩出.右头在正常位置,另一头等大,从左肩部长出.两头共一躯干和四肢.由于左头压迫,左侧锁骨、肋骨和乳头均较对侧下移2～3厘米.从躯干背面观察并触摸,可知畸婴有两条脊柱,分别连于同一髂骨.剖开胸、腹腔,见心血管和消化系统有多处畸形.兹分述如下.心脏和大血管 畸婴有两套呼吸器官,心脏只有一个.心脏外形,前面几乎全为右心室占据,心房当底边向下的等边三角形占据心脏背侧.心房左上方另一心耳。
- 石嵩山何国栋刘小辉
- 关键词：畸形胎儿
- 曲安奈德治疗重症春季角结膜炎的护理被引量：1
- 2005年
- [目的]总结上穹隆结膜下注射曲安奈德治疗重症春季角结膜炎的疗效及护理。[方法]采用曲安奈德行上穹隆结膜下注射。[结果]一次性治愈71例(31.14%),3个月后复发57例(25.00%),半年后复发63例(27.63%),1年后复发37例(16.22%)。[结论]应用曲安奈德上穹隆注射对于重症春季角结膜炎是一种安全有效的治疗方法,护理配合中应注意做好病人的心理护理,使其积极配合并定期随访。
- 黄瑞珠刘小辉张燕蔡林苹陈彩芳
- 关键词：春季角结膜炎重症曲安奈德护理
- 用Van Gieson法鉴别培养的平滑肌细胞被引量：1
- 1999年
- 周燕琼刘小辉
- 关键词：平滑肌细胞VA
- 组织学与胚胎学教学方法探讨被引量：1
- 2008年
- 组织学与胚胎学是研究人体微细结构、结构与功能的关系和人体发生发展的科学，属于显微形态学科。其特点是理论性与实践性较强，名词、概念多，形态描述困难，理论知识抽象。因此，组织学与胚胎学历年来被学生认为是难学的基础课，给教学带来很大困难。因此，教师在教学中应想方设法提高学生的识记能力，逐步提高学生的学习兴趣，使其学习潜能、潜力充分发挥，从而在学习中得到事半功倍的效果。笔者在教学中有几点体会，总结如下。
- 林常敏张锦堃陈海滨苏中静刘小辉
- 关键词：教学方法胚胎学组织学微细结构形态学科
- 大鼠出生前后睾丸间质细胞的形态学观察和计量分析被引量：2
- 1994年
- 对大鼠睾丸间质细胞出生前后的发育进行了形态学观察和计量分析.睾丸经戊二醛固定,树脂包埋,半簿切片.用点取截距法求得间质细胞核的平均体积,用点计数法求得间质细胞在睾丸的体积密度和细胞的核质比.依据核的平均体积和核质比计算出细胞的平均体积.在计算睾丸的间质细胞总数时考虑了组织收缩的影响.文内对出生前后间质细胞的形态及数量变化的意义进行了讨论.
- 石嵩山何国栋刘小辉林若薇
- 关键词：间质细胞发育体视学睾丸
- 利用普通冰箱冻存肿瘤细胞的技术研究
- 1999年
- 利用普通冰箱-18℃冷冻保存组织、细胞,迄今少见报道.本实验以人肝癌细胞株Bel7402为对象,探讨-18℃冷冻保存方法.1材料与方法1.1 细胞来源及培养方法人肝癌细胞株Bel7402引自中山医科大学实验动物中心,置于含100mL/L新生牛血清的RPMI1640培养液中,在37℃,50mL/LCO2,饱湿条件下传代培养,细胞贴壁生长.1.2 试剂DMSO（AR）由北京化工厂生产;新生牛血清由杭州四季青生物工程材料研究所生产;RPMI 1640由Life Technologies Ins生产;胰蛋白酶（AR）由新疆化学研究所生产.1.3 冻存方法处于对数生长期的细胞经D-Hank’s液洗2次,后用0.25%胰蛋白酶消化,再用含100mL/L新生牛血清的1640液洗涤1次.后分别用含5%、10%、15%、20%DMSO的完全培养基（含100mL/L新生牛血清1640）重新制成细胞悬液.细胞浓度保持在1×106/mL左右.将细胞悬液置于2mL的硬塑料冻存管中,加盖密封,做好标记.直接迅速地放入-18℃冰箱中冻存.每份样品分装4支冻存管,每管装1mL悬液.于1周,1个月,2个月,3个月后分别进行融冻.
- 周燕琼刘小辉
- 关键词：冰箱冻存肿瘤细胞
- 猪冠状动脉平滑肌细胞的简易培养
- 2003年
- 目的 :培养猪冠状动脉平滑肌细胞 (SMCs)。方法 :分离猪心冠状动脉 ,用贴块法进行操作。结果 :细胞传至第 4代时 ,锥虫蓝染色检查细胞存活率 95 % ,用光学显微镜、免疫组织化学法进行α 肌动蛋白染色来鉴定SMCs ,其纯度约 96 %。结论 :该法经济而简单易行。
- 周燕琼刘幸平刘小辉李乐娜
- 关键词：冠状动脉平滑肌细胞细胞培养免疫组织化学
