刘棠
- 作品数：10 被引量：48H指数：3
- 供职机构：厦门出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家自然科学基金出入境检验检疫行业标准计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 食源性变形杆菌簇致病菌的检测被引量：3
- 2010年
- 为建立食源性变形杆菌簇致病菌的检测方法,对富集培养基、选择性平板分离培养基和生化特性进行了筛选比较。结果表明,肠杆菌富集肉汤培养基更有利于变形杆菌簇致病菌的检出,平板分离培养基可用EMB琼脂培养基和SS琼脂培养基(或麦康凯琼脂培养基),初筛方法为革兰氏反应和苯丙氨酸脱氨酶实验,最后用其他生化反应进行确认。该方法检出率高,检测范围较宽,可为建立变形杆菌簇致病菌的检验标准提供实验依据。
- 陈双雅张永祥陈伟玲王群力谢明星刘棠彭小莉
- 关键词：致病菌
- 空肠弯曲菌的磁捕获_-荧光PCR检测方法的建立被引量：22
- 2005年
- 为提高畜禽类食品中空肠弯曲菌的检出率和灵敏度 ,应用抗血清和磁性微珠首次制备弯曲菌免疫磁珠 ,利用弯曲菌免疫磁珠直接捕获检样中目的菌 ,不需要增菌培养 ;通过荧光PCR检测鞭毛蛋白A(flaA)基因和 或马尿酸酶 (hipO)基因 ,首次建立空肠弯曲菌的磁捕获_荧光聚合酶链反应 (IMC_FPCR)方法。IMC_FPCR法检测空肠弯曲菌方法简便易行 ,可在 2 4h内完成 ,特异性好 ,检测低限达到 10cfu mL ,抗干扰性强。IMC_FPCR方法可望解决非可培养状态的空肠弯曲菌检测难题 ,是一种适用于检验检疫、卫生防疫和农产品安全检验等领域的快速方法。
- 刘光明苏文金蔡慧农谢明星刘棠彭小莉
- 关键词：空肠弯曲菌荧光PCR
- 凡纳滨对虾桃拉综合征病毒主要结构蛋白基因的克隆及原核表达
- 凡纳滨对虾是全球最重要的经济养殖虾品种之一，在世界范围内大量养殖。但其病害也日益严重，对虾病毒病暴发流行给世界对虾养殖业造成巨大经济损失，对海洋资源的可持续发展造成巨大威胁，因此对虾病毒病的研究已成为当前世界虾病研究领域...
- 刘棠
- 关键词：凡纳滨对虾病毒检测结构蛋白基因原核表达
- 文献传递
- 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒衣壳蛋白基因在毕赤酵母中的表达
- 2012年
- 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒是"须向OIE申报的甲壳动物重要疾病"之一。将该病毒主要结构蛋白基因克隆至毕赤酵母穿梭表达质粒pPIC9K,构建重组表达载体(命名为pPIC9K-IV),限制性内切酶BglⅡ对其进行酶切线性化,采用电穿孔法转化到毕赤酵母GS115宿主菌。采用PCR方法分析和G418筛选来鉴定重组的毕赤酵母,诱导表达的产物分别进行ELISA分析或Western blot免疫印迹鉴定,分泌表达产物分子量大小为40ku左右,原核表达时制备的兔抗对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒衣壳蛋白的血清可与真核表达的目的蛋白发生特异性反应。
- 彭小莉谢明星刘棠陈双雅王群力陈伟玲王景明张其清
- 关键词：衣壳蛋白毕赤酵母真核表达
- 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒衣壳蛋白基因的克隆表达及抗体制备被引量：2
- 2008年
- 本文根据GenBank登录的对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的全基因组序列(NC-002190),设计出主要结构蛋白基因的相应引物,从厦门发病的对虾中,提取DNA,以此为模板,利用PCR扩增目的基因.再将目的基因分别与pGEX-6p1载体和pET-28a载体连接,构建重组表达载体pGEX-IV、pET-IV,重组子经酶切和测序鉴定后导入表达型大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,大小约为62KDa和41KDa,与预测大小一致.将pET-IV表达重组蛋白经纯化,免疫小鼠,W estern免疫印迹反应结果表明其抗体均可与pGEX-IV和pET-IV表达的蛋白发生特异性反应.本研究的结果为对虾IHHNV的快速检测及其免疫提供了研究基础.
- 彭小莉刘棠徐维佳王群力陈伟玲陈双雅王景明谢明星
- 关键词：衣壳蛋白基因克隆及表达蛋白质纯化对虾
- 空肠弯曲菌的磁捕获-荧光PCR检测技术研究被引量：2
- 2004年
- 空肠弯曲菌是世界卫生组织列为最常见食源性传染病菌之一的人兽共患病原菌,传统的分离鉴定方法需要耗费大量工时,并存在敏感性低、难以检出非可培养状态细菌和易出现假阴性结果等问题。本研究首创了空肠弯曲菌的磁捕获-荧光PCR快速检测方法,无需增菌培养即可直接捕获检样中的弯曲菌,利用实时荧光PCR进行鉴定,可在24h内完成检测,检测低限达到10cfu/mL,提高了非可培养状态空肠弯曲菌的检出率。
- 刘光明方元炜陈伟玲周昱孔繁德王根芳刘棠彭小莉
- 关键词：空肠弯曲菌格林-巴利综合症人兽共患病
- 柚苷酶处理、果汁浓缩和低温贮藏对柚子果汁中柠檬苦素的影响被引量：12
- 2015年
- 采用高效液相色谱法测定柠檬苦素含量,以柚子果汁为对象研究柚苷酶处理、果汁浓缩和低温贮藏等工序对柑橘果汁中柠檬苦素含量的影响。结果表明,液相色谱方法可使柠檬苦素、普鲁宁、柚皮苷和柚皮素完全分离,消除了柚皮素对柠檬苦素测定的影响;柠檬苦素检出限为0.95μg/m L,定量限为3.17μg/m L,样品回收率为102.6%~104.2%,相对标准偏差为0.34%~1.04%。柚苷酶水解过程中的加热及果汁浓缩和低温贮藏等操作都能促进柠檬苦素的从果汁中结晶析出,综合采用柚苷酶水解、浓缩和低温贮藏等操作,并经过离心分离可去除柚汁中78%的柠檬苦素,使果汁中柠檬苦素含量降低到19μg/m L。
- 刘棠杨远帆杜希萍黄良仕肖安风倪辉Feng CHEN
- 关键词：柚子果汁柠檬苦素柚苷酶
- 凡纳滨对虾桃拉综合征病毒主要结构蛋白基因的克隆及原核表达被引量：2
- 2007年
- 根据GenBank中桃拉病毒的全基因组序列,分别设计扩增该病毒主要结构蛋白基因vp1、vp2、vp3的相应引物,以发病的凡纳滨对虾中提取的总RNA为模板,利用RT-PCR技术对目的基因进行了扩增,分别获得分子量为1 164、849、507bp的基因片段,与预期一致.再将目的基因与pET-28a载体连接,分别构建重组表达载体pET-VP1、pET-VP2和pET-VP3,重组子经酶切和测序鉴定后导入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测.SDS-PAGE电泳的结果表明,在37℃下,0.5mmol/dm3的IPTG诱导表达的重组蛋白均以包涵体的形式存在,重组蛋白VP1、VP2、VP3的大小分别为48、36、24KDa.本研究的结果为制备桃拉病毒主要结构蛋白的特异性抗体,进而研制桃拉病毒快速检测试剂盒奠定了基础.
- 刘棠彭小莉陈亮徐维佳陈伟玲方元炜陈双雅谢明星
- 关键词：桃拉病毒结构蛋白原核表达凡纳滨对虾
- 牛白细胞黏附缺陷病液相基因芯片检测方法的建立被引量：4
- 2013年
- 从福建某奶牛场200头进口荷斯坦牛采血提取牛血液DNA,根据已知牛染色体上CD18编码基因序列383位碱基由A变为G而引起牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)设计特异性野生型和突变型引物,建立液相基因芯片检测方法用于牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)的检测,结果检出2头母牛为BLAD携带者,检出率为0.67%,没有发现患病牛。结果证明建立的液相基因芯片检测方法是一种敏感性和特异性很高的筛选奶牛BLAD有害基因的新方法。
- 谢明星彭小莉苗春柳刘棠陈伟玲王群力王景明周斌华徐维佳许秋贝
- MGB双探针实时荧光PCR检测牛白细胞粘附缺陷病方法的建立
- 2015年
- 从福建某奶牛场250头进口荷斯坦牛采血提取牛血液DNA,根据已知牛染色体上CD18编码基因序列383位碱基由A变为G而引起牛白细胞粘附缺陷病设计特异性野生型和突变型探针,建立实时荧光定量PCR检测方法用于牛白细胞粘附缺陷病的基因分型检测。结果检出2头母牛为牛白细胞粘附缺陷病携带者,检出率为0.8%,没有发现患病牛。结果证明本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法是一种敏感性和特异性很高的筛选奶牛牛白细胞粘附缺陷病有害基因的新方法。
- 谢明星许秋贝彭小莉刘棠王群力陈伟玲王景明
- 关键词：实时荧光PCR
